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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学检测,尤其涉及一种核桃致敏蛋白jug r 1多抗血清及其制备方法与应用。
技术介绍
1、核桃蛋白是一种较为优质的植物蛋白资源,但同时也是世界上主要的食物过敏原之一。核桃过敏可作用于人体呼吸道、胃肠道等部位,导致恶心、唇肿、呼吸困难等临床症状,严重影响人们尤其是儿童的身体健康。因此,明确核桃中的过敏原蛋白并进行检测,对人类膳食健康有重要意义。
2、截至目前,世界过敏原数据库(http://www.allergenonline.org)共收录了6种核桃过敏原的信息,分别为jugr 1、jug n 1(2s蛋白),jug r2、jugn 2(7s蛋白),jug r 3(脂质转移蛋白)和jugr4(11s球蛋白)。其中jug r 1是一种分子质量约16.4kda的2s种子贮藏蛋白,由139个氨基酸组成。核桃过敏患者中,对抗原jug r 1过敏占比大,因此jug r 1是引发核桃过敏反应的主要原因。但目前国内外关于jug r 1检测的相关研究较少,因此,迫切需要一种能够有效检测jug r 1过敏原的试剂。
3、酶联免疫吸附法(elisa)经过几十年的发展和应用,已经成为食物过敏原定量检测的最常用方法。多克隆抗体具有生产成本低、生产周期短等优点。而目前还没有建立灵敏性检测jugr 1抗原性的ic-elisa方法的相关报道。
技术实现思路
1、鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种核桃致敏蛋白jug r 1多抗血清及其制备方法与应用,该核桃致敏蛋白ju
2、为了实现上述专利技术目的,本专利技术提供了以下技术方案:
3、本专利技术提供了一种核桃致敏蛋白jugr 1在制备核桃致敏蛋白jugr 1多抗血清中的应用,所述核桃致敏蛋白jug r 1的氨基酸序列如seq id no.1所示。
4、本专利技术提供了一种免疫原性组合物,包括佐剂和上述的核桃致敏蛋白jug r 1。
5、优选的,所述佐剂为弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂;所述核桃致敏蛋白jug r 1的浓度为0.3~1.2μg/μl;所述免疫原性组合物中,所述弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂的体积百分数为40%~60%。
6、本专利技术提供了一种核桃致敏蛋白jug r 1多抗血清的制备方法,包括以下步骤:
7、利用上述的免疫原性组合物免疫动物。
8、优选的,所述免疫的次数为3~5次,每次免疫间隔14~21天;首次免疫使用的所述免疫原性组合物中的佐剂为弗氏完全佐剂,后续免疫使用的所述免疫原性组合物中的佐剂为弗氏不完全佐剂。
9、优选的,所述免疫动物为小鼠;每次免疫的抗原含量为40~110μg核桃致敏蛋白jug r 1/只。
10、本专利技术提供了一种上述的制备方法制备得到的核桃致敏蛋白jugr 1多抗血清。
11、本专利技术提供了一种上述的核桃致敏蛋白jug r 1多抗血清的应用,包括如下至少一种:
12、(1)在制备检测核桃致敏蛋白jugr 1试剂盒中的应用;
13、(2)在核桃筛选或核桃致敏蛋白jug r 1检测靶标筛选中的应用。
14、本专利技术提供了一种检测核桃致敏蛋白jug r 1试剂盒,包括上述的核桃致敏蛋白jug r 1多抗血清。
15、优选的,所述试剂盒包括elisa试剂盒;所述elisa试剂盒还包括以核桃致敏蛋白jugr 1为抗原;所述抗原包被浓度为1μg/ml,所述核桃致敏蛋白jug r 1多抗血清的稀释比为1:12800。
16、相对于现有技术,本专利技术具有如下有益效果:
17、本专利技术提供了一种核桃致敏蛋白jug r 1多抗血清及其制备方法与应用。本专利技术利用氨基酸序列如seq id no.1所示的核桃致敏蛋白jug r 1制备得到的核桃致敏蛋白jugr 1多抗血清,能够特异性结合并识别核桃致敏蛋白jug r 1,具有特异性高、效价高、重复性好、精密度高和灵敏度高的优点,且制备方法简单易于操作。本专利技术在筛选低致敏的优质核桃或核桃致敏蛋白jugr 1检测靶标、制备检测核桃致敏蛋白jugr 1的试剂盒方面奠定基础。
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1.核桃致敏蛋白Jug r 1在制备核桃致敏蛋白Jug r 1多抗血清中的应用,其特征在于,所述核桃致敏蛋白Jug r 1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种免疫原性组合物,其特征在于,包括佐剂和权利要求1所述的核桃致敏蛋白Jugr1。
3.根据权利要求2所述的免疫原性组合物,其特征在于,所述佐剂为弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂;所述核桃致敏蛋白Jug r 1的浓度为0.3~1.2μg/μL;所述免疫原性组合物中,所述弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂的体积百分数为40%~60%。
4.一种核桃致敏蛋白Jugr 1多抗血清的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
5.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,所述免疫的次数为3~5次,每次免疫间隔14~21天;首次免疫使用的所述免疫原性组合物中的佐剂为弗氏完全佐剂,后续免疫使用的所述免疫原性组合物中的佐剂为弗氏不完全佐剂。
6.根据权利要求4或5所述的制备方法,其特征在于,所述免疫动物为小鼠;每次免疫的抗原含量为40~110μg核桃致敏蛋白Jugr 1/只。
8.权利要求7所述的核桃致敏蛋白Jugr 1多抗血清的应用,其特征在于,包括如下至少一种:
9.一种检测核桃致敏蛋白Jug r 1试剂盒,其特征在于,包括权利要求7所述的核桃致敏蛋白Jug r 1多抗血清。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括ELISA试剂盒;所述ELISA试剂盒还包括以核桃致敏蛋白Jug r 1为抗原;所述抗原包被浓度为1μg/mL,所述核桃致敏蛋白Jug r 1多抗血清的稀释比为1:12800。
...【技术特征摘要】
1.核桃致敏蛋白jug r 1在制备核桃致敏蛋白jug r 1多抗血清中的应用,其特征在于,所述核桃致敏蛋白jug r 1的氨基酸序列如seq id no.1所示。
2.一种免疫原性组合物,其特征在于,包括佐剂和权利要求1所述的核桃致敏蛋白jugr1。
3.根据权利要求2所述的免疫原性组合物,其特征在于,所述佐剂为弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂;所述核桃致敏蛋白jug r 1的浓度为0.3~1.2μg/μl;所述免疫原性组合物中,所述弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂的体积百分数为40%~60%。
4.一种核桃致敏蛋白jugr 1多抗血清的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
5.根据权利要求4的制备方法,其特征在于,所述免疫的次数为3~5次,每次免疫间隔14~21天;首次免疫使用的所述免疫原性组合物中的佐剂为弗氏完全佐剂,后续免疫使...
【专利技术属性】
技术研发人员:张雪春,方越,沈明娟,杨曦,王振兴,何雪梅,孙健,
申请(专利权)人:西南林业大学,
类型:发明
国别省市:
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