【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及食窦魏斯氏菌zmc030及其胞外多糖在防治炎症性肠病中的应用。
技术介绍
1、溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,uc)是一种主要累及消化系统的，慢性非特异性，反复发作的炎症性肠道疾病，且uc患者发展为结直肠癌的风险较高，世界卫生组织已经把uc归为临床难治病种之一。近年来，随着城市化和人们日常生活的现代化，uc的发病率均逐年上升，已经成为全球公共卫生的挑战。uc治愈的难度较大，目前临床常用药物主要包括水杨酸类、糖皮质激素类、免疫抑制剂类、生物制剂和抗生素等。但常规的药物治疗手段存在着副作用明显、病人耐受性差和容易复发等缺点，因此，寻求不良反应少和更有效的药物，对uc临床用药和基础研究具有重要意义。
2、微生物制剂对包括uc在内的各种疾病有治疗潜力，但活菌制剂疗法存在稳定性差、胃肠道存活率较低、和可能的安全隐患等问题。后生元是一种对宿主健康有益的无生命微生物、细胞成分或微生物分泌的代谢产物，比如短链脂肪酸、膜蛋白和胞外多糖(exopolysaccharides,eps)等，可发挥与益生菌类似的调控作用，且后生元稳定性和安全性较好，易于储存和运输等优势，可能是益生菌的一种更安全的替代品。后生元可调节肠道菌群、增强肠上皮屏障功能、调节局部和全身免疫等，在包括uc在内的各种疾病中的应用越来越受到大家的重视。
3、食窦魏斯氏菌(weissella.cibaria)属于乳酸菌的一种，广泛存在于唾液、母乳、人类胃肠道以及传统发酵食品中。w.cibaria属于高产eps的乳
技术实现思路
1、本专利技术的目的旨在提供一种食窦魏斯氏菌zmc030及其胞外多糖在防治炎症性肠病中的应用。
2、为实现专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：
3、本专利技术第一方面提供了一种食窦魏斯氏菌，所述食窦魏斯氏菌核酸序列中含有序列1(seq id no.1)所示的序列。
4、根据上述的食窦魏斯氏菌，优选地，所述食窦魏斯氏菌为食窦魏斯氏菌zmc030，食窦魏斯氏菌zmc030(weissella cibaria zmc030)，所述食窦魏斯氏菌的保藏编号为cctccno:m 20241261，保藏机构为中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏机构地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学中国典型培养物保藏中心；保藏日期为2024年06月17日。
5、上述食窦魏斯氏菌zmc030的筛选和鉴定过程为：将健康婴幼儿粪便用无菌生理盐水重悬，震荡混匀后静置沉淀颗粒状杂物，将悬浮液加入到mrs液体培养基中，37℃培养48h；将菌液进行梯度稀释吸取10-5稀释液涂布到mrs固体培养基中，于37℃培养至生长出明显单菌落。采用引物(27f：5’-agagtttgatcctggctcag-3’和1492r：5’-tacggctaccttgttacgactt-3’)对单菌落进行16s rdna序列扩增，并将扩增序列送擎科生物科技有限公司进行测序。16s rdna的测序结果输入利用ncbi的blast数据库对菌株的16srdna序列进行分析，最终根据同源序列分析鉴定分离菌株为食窦魏斯氏菌(weissella.cibaria)，命名为食窦魏斯氏菌zmc030，将该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏号为cctcc m 20241261。所述食窦魏斯氏菌zmc030的16s rdna序列为如序列1(seq id no.1)所示。
6、序列1的核苷酸序列如下：
7、gctttgggtgttacaaactctcatggtgtgacgggcggtgtgtacaagacccgggaacgtattcaccgcggcgtgctgatccgcgattactagcgattc
8、cgacttcatgtaggcgagttgcagcctacaatccgaactgagacgtactttaagagattagctcaccctcgcgggttggcaactcgttgtatacgccattgtagc
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10、caactagtaataagggttgcgctcgttgcgggacttaacccaacatctcacgacacgagctgacgacaaccatgcaccacctgtcaccttgtccccgaaggg
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13、gtttacggtgtggactaccagggtatctaatcctgtttgctacccacactttcgagcctcaacgtcagttacagtccagaaaagccgccttcgccactggtgttct
14、tccatatatctacgcatttcaccgctacacatggagttccactttcctctactgcactcaagtcatccagtttccaaagcaattcctcagtttgagctgagggctttc
15、acttcagacttaaataaccgtctgcgctcgctttacgcccaataaatccggataacgcttggaacatacgtattaccgcggctgctggcccgtattttagcccgtt
16、cctttctggtaagataccgtcacacattgaacagttactctcaatgtcattcttctcttacaacagtgttttacgagccgaaacccttcatcacacacgcggcgttgc
17、tccatcaggctttcgcccattgtggaagattccctactgctgcctcccgtaggagtatgggccgtgtctcagtcccattgtggccgatcagtctctcaactcggct
18、atgcatcatcgtcttggtgagccattacctcaccaactaa本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种食窦魏斯氏菌，其特征在于，所述食窦魏斯氏菌核酸序列中含有序列1所示的序列。
2.根据权利要求1所述的食窦魏斯氏菌，其特征在于，所述食窦魏斯氏菌为食窦魏斯氏菌ZMC030，食窦魏斯氏菌ZMC030的保藏编号为CCTCC NO: M 20241261。
3.一种胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖是将权利要求1或2所述食窦魏斯氏菌进行发酵培养，得到发酵液，对所述发酵培液进行分离纯化得到。
4.根据权利要求3所述的胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖的制备方法为：将所述食窦魏斯氏菌接种至培养基进行发酵培养，得到发酵液，发酵液经菌体去除、蛋白脱除处理，得到上清液；对上清液进行醇沉处理，收集沉淀物，沉淀物经透析除杂、冻干处理，得到所述胞外多糖。
5.根据权利要求4所述的胞外多糖，其特征在于，所述培养基为MRS 培养基或mMRS培养基；所述发酵培养温度为30℃～37℃；所述透析截留分子量为8000～14000 Da。
6.权利要求1或2所述食窦魏斯氏菌或食窦魏斯氏菌的培养物或权利要求3-5任一所述胞外多糖在如下任一中的应用：p>
7.根据权利要6所述的应用，其特征在于，所述产品为药物、食品添加剂、功能性食品、饲料添加剂或饲料。
8.一种药物，其特征在于，包含有效成分，所述有效成分为权利要求1或2所述的食窦魏斯氏菌或含食窦魏斯氏菌的培养物或权利要求3～5任一所述胞外多糖；所述药物用于预防、缓解或/和治疗结肠炎或用于减少肠道上皮溃疡面积或用于改善肠道黏膜屏障紊乱或用于调节肠道菌群。
9.一种功能性食品，其特征在于，所述食品中含有权利要求1或2所述的食窦魏斯氏菌或含食窦魏斯氏菌的培养物或权利要求3～5任一所述胞外多糖。
10.一种饲料，其特征在于，所述饲料中含有权利要求1或2所述的食窦魏斯氏菌或含食窦魏斯氏菌的培养物或权利要求3～5任一所述胞外多糖。
11.一种食品添加剂，其特征在于，所述食品添加剂中含有权利要求1或2所述的食窦魏斯氏菌或含食窦魏斯氏菌的培养物或权利要求3～5任一所述胞外多糖。
12.一种饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂中含有权利要求1或2所述的食窦魏斯氏菌或含食窦魏斯氏菌的培养物或权利要求3～5任一所述胞外多糖。
...【技术特征摘要】
1.一种食窦魏斯氏菌，其特征在于，所述食窦魏斯氏菌核酸序列中含有序列1所示的序列。
2.根据权利要求1所述的食窦魏斯氏菌，其特征在于，所述食窦魏斯氏菌为食窦魏斯氏菌zmc030，食窦魏斯氏菌zmc030的保藏编号为cctcc no: m 20241261。
3.一种胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖是将权利要求1或2所述食窦魏斯氏菌进行发酵培养，得到发酵液，对所述发酵培液进行分离纯化得到。
4.根据权利要求3所述的胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖的制备方法为：将所述食窦魏斯氏菌接种至培养基进行发酵培养，得到发酵液，发酵液经菌体去除、蛋白脱除处理，得到上清液；对上清液进行醇沉处理，收集沉淀物，沉淀物经透析除杂、冻干处理，得到所述胞外多糖。
5.根据权利要求4所述的胞外多糖，其特征在于，所述培养基为mrs 培养基或mmrs培养基；所述发酵培养温度为30℃～37℃；所述透析截留分子量为8000～14000 da。
6.权利要求1或2所述食窦魏斯氏菌或食窦魏斯氏菌的培养物或权利要求3-5任一所述胞外多糖在如下任一中的应用：<...
【专利技术属性】
技术研发人员：马望，赵环，任静，苏晓宁，吴秋扬，马燕娥，
申请(专利权)人：郑州大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：
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