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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域,涉及枳椇子提取工艺,具体涉及一种具有保肝作用的枳椇子保肝活性组分提取物的制备方法及所得产品、应用。
技术介绍
1、酒精性肝病(ald)是指过度饮酒产生的肝脏病变,初期症状主要是脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化,严重时可引起肝癌甚至出现肝脏衰竭。2019年,全世界约25%的肝硬化死亡与酒精有关。目前其治疗方法多为严格戒酒、还原性谷胱甘肽治疗等药物治疗、营养支持性疗法,用于疾病中后期。中医中药在改疾病各个阶段治疗都取得有效进展。
2、枳椇子始载于《唐本草》,具有止渴除烦,清湿热、解酒毒的功效,《医编》记录“解酒毒,枳椇子最妙”。现代医学研究已证实枳椇子有解酒、保护肝脏、抗肿瘤等作用,现已有多款以枳椇子为主的解酒保肝产品在售。然而,其保肝组分不清楚,限制产品的使用和品质升级,因此对枳椇子中具有保肝作用的活性组分进行提取与研究,能够为枳椇子的临床应用、资源开发提供理论和技术支持。
技术实现思路
1、针对现有技术中存在的问题,本专利技术提供了一种具有保肝作用的枳椇子活性组分提取物的制备方法。本专利技术还提供了利用上述制备方法制备得到的枳椇子活性组分提取物。
2、本专利技术的另一目的提供了上述枳椇子活性组分提取物的应用。
3、本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:
4、本专利技术提供了一种具有保肝作用的枳椇子活性组分提取物的制备方法,包括以下步骤:
5、s1.将枳椇子粉碎成粗粉,加乙醇溶液回流提
6、s2.将所得稠膏用水混悬,使用有机溶剂依次萃取至有机层颜色淡,减压回收有机溶剂,冷冻干燥处理得各部位的提取物;
7、s3.取乙酸乙酯部位干浸膏称重,加甲醇溶解,过滤膜后,加c4粉吸附,搅拌均匀,减压回收溶剂;干法装柱,用洗脱剂按洗脱程序进行主分离和二级分离,自动接取馏分;
8、s4.减压回收溶剂至小体积,冷冻干燥即得。
9、进一步的,s1中,所述乙醇溶液的体积分数为75%;所述枳椇子和乙醇溶液的质量体积比为1:10;所述回流提取的次数为2次,每次1.5h。
10、进一步的, s2中,萃取过程中,依次使用二氯甲烷、乙酸乙酯进行萃取。
11、进一步的,s3中,干浸膏与甲醇的质量体积比0.1-0.5:1;干浸膏与c4粉的质量比为1-2:1。
12、进一步的,s3中,所述主分离所采用的洗脱程序为:
13、
14、主分离阶段,收集第33~36min的洗脱部位,然后进行二级分离。
15、进一步的,s3中,所述二级分离使用的洗脱程序为:
16、
17、二级分离阶段,收集第26.7~30.1min的洗脱部位,得馏分trap-48。
18、进一步的,s4中,冷冻干燥的操作如下:在-40~-50℃冷阱中预冻2~4小时后,再在-45~-55℃下冷冻干燥8~24小时。
19、本专利技术还提供了一种利用上述制备方法制备得到的枳椇子活性组分提取物,所述枳椇子活性组分提取物中黄酮类物质含量>80%。
20、本专利技术进一步的提供了上述枳椇子活性组分提取物在制备治疗和/或预防酒精性肝损伤的产品中的应用。
21、本专利技术制备得到的枳椇子活性组分提取物可以用于制备辅助保肝的药品、保健食品和食品等任意形式的产品。本专利技术制备的枳椇子活性成分提取物能够预防性保护酒精性肝损伤,降低氧化应激反应、降低alt和ast水平。
22、与现有技术相比,本专利技术具有以下有益效果:
23、(1)本专利技术提供的枳椇子提取物,通过采用二维高通量分离分析技术能够更高效获得指定组成的活性组分;精准获得枳椇子粗提物中黄酮类成分,其中黄酮类成分的含量>80%,提取时间缩短60%,且节省人力和试剂的使用。
24、(2)使用本专利技术提供的方法获得的枳椇子活性组分的物质组成明确,黄酮类成分的提取率高,在保肝方面具有明显的生物活性,通过体外细胞实验验证,枳椇子提取物可显著降低细胞ros水平,提高细胞成活率,显著降低细胞上清液中alt和ast水平。
25、(3)本专利技术制备得到的枳椇子活性组分提取物为开发一种治疗酒精性肝病的新药奠定实验基础。
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1.一种具有保肝作用的枳椇子活性组分提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,S1中,所述乙醇溶液的体积分数为75%;所述枳椇子和乙醇溶液的质量体积比为1:10;所述回流提取的次数为2次,每次1.5h。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于, S2中,萃取过程中,依次使用二氯甲烷、乙酸乙酯进行萃取。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,S3中,干浸膏与甲醇的质量体积比0.1-0.5:1;干浸膏与C4粉的质量比为1-2:1。
5.根据权利要求1或4所述的制备方法,其特征在于,S3中,所述主分离所采用的洗脱程序为:
6.根据权利要求1或5所述的制备方法,其特征在于,S3中,所述二级分离使用的洗脱程序为:
7.根据权利要求1、4-6任一项所述的制备方法,其特征在于,S4中,冷冻干燥的操作如下:在-40~-50℃冷阱中预冻2~4小时后,再在-45~-55℃下冷冻干燥8~24小时。
8.一种利用权利要求1-7任一项所述的制备方法制备得到
9.一种如权利要求8所述的枳椇子活性组分提取物在制备治疗和/或预防酒精性肝损伤的产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种具有保肝作用的枳椇子活性组分提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,s1中,所述乙醇溶液的体积分数为75%;所述枳椇子和乙醇溶液的质量体积比为1:10;所述回流提取的次数为2次,每次1.5h。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于, s2中,萃取过程中,依次使用二氯甲烷、乙酸乙酯进行萃取。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,s3中,干浸膏与甲醇的质量体积比0.1-0.5:1;干浸膏与c4粉的质量比为1-2:1。
5.根据权利要求1或4所述的制备方法,其特征在于...
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