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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物病虫害防治,具体涉及一种苹果漆酶lac3基因及其在提高植物抗蚜中的应用。
技术介绍
1、蚜虫是重要的农业害虫,苹果绵蚜是重大果树害虫,感染苹果绵蚜的苹果树,感染部位会附着羊毛状的白色物质,果树受害减产10%-30%,可削弱树势,果实质量差,严重时会使果树枯死,每年造成巨大损失。
2、化学防治是防治苹果绵蚜等蚜虫害虫的有效方法,但易产生3r问题;另外,化学防治给果农带来了不小的经济压力,最终导致果农整体经济效益下降。因此,替代化学防治的灭蚜办法亟待开发。
3、植物抗虫育种、提高植物自身对害虫的抗性是防治农业害虫的可持续发展策略,明确植物的抗虫特性并挖掘植物的抗虫基因是抗虫育种的关键问题。然而苹果是木本植物,在木本植物中筛选抗虫基因比较困难。利用转基因验证基因功能技术发展比较缓慢,再加上木本植物难以培养,所以苹果的抗虫基因筛选及利用方面进展缓慢,限制了苹果园害虫的可持续治理发展,急需挖掘抗虫基因,利用苹果自身抗虫性,可持续地治理果园害虫。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种苹果漆酶lac3基因及其在提高植物抗蚜中的应用,本专利技术克隆了苹果漆酶lac3基因,明确了其核酸序列和蛋白结构,在此基础上设计引物,构建其过表达载体,通过烟草组培苗培养和农杆菌介导,转入烟草中,得到转基因植株,并进行筛选获得了纯合体株系,通过epg技术进行蚜虫取食行为学观测,接种蚜虫研究并明确其抗蚜功能。转基因植株与野生型相比,地上部分长势密度均大于野生型,茎秆粗
2、本专利技术首先提供一种苹果漆酶lac3基因,所述的基因编码:
3、1)氨基酸序列为seq id no:1的蛋白酶
4、mealnaifvnkirftlclfglcllvasstmslaepqihkhefvvqatpvkrlcktqnsitvngqlpgptlevnngdtlvvkvtnraqynvti
5、hwhgirqmrtgwadgpefvtqcpirpggsytyrftiqgqegtlwwhahsswlratvygaliihpkqgdsypftkpksettlllgewwnanpi
6、dvlrqatmtgaapnvsdaytinaqpgdlyncssqdtvivpidsgetnllrvinaalnqplffsvanhkltvvsadasytkpftttvlmlgpg
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10、2)与1)中的蛋白酶具有不低于90%同源性的蛋白酶;
11、更进一步的,所述的同源性不低于95%;
12、本专利技术所提供的苹果漆酶lac3基因,其一种具体的核苷酸序列如下:
13、atggaggcactcaacgctattttcgtcaacaagattcgcttcacgttatgcctttttggtctttgccttctcgtggcgtc
14、atcgacaatgtccttggcagaaccccaaattcacaagcatgagtttgttgttcaagcaacaccagtgaagaggctgtgca
15、aaacccaaaactccatcacagtgaatggacagctccctggaccaaccttggaagtaaacaatggtgacactcttgtcgtc
16、aaagtcaccaacagagctcaatacaacgtcaccatccactggcatgggattaggcaaatgagaactggatgggcagatgg
17、gccagaatttgtgactcagtgcccgattaggccaggagggagctacacctaccgctttacaattcaagggcaagagggta
18、ctctgtggtggcatgctcacagctcatggcttagagccaccgtttacggagcactcatcattcatcctaaacaaggagac
19、tcctaccccttcactaaaccgaaaagtgaaacaacccttcttctcggtgaatggtggaacgctaaccctatcgatgtctt
20、gaggcaggcgactatgacaggagcagctccaaatgtttctgatgcatacaccatcaatgctcaacctggtgatctttaca
21、actgctcaagccaagacactgtcatagttcctatagactccggcgagaccaaccttcttagagtcatcaacgctgcactc
22、aaccaacctcttttcttctccgtggccaaccacaagctcaccgttgttagcgctgatgcctcctacaccaaacctttcac
23、taccacggttctcatgctagggcctgggcagaccactgatgttttaatcaccggtgaccagtcaccagcccggtactact
24、tggcggcaagtgcttatttcagcgcgcaaaatgcagcattcgacaacaccaccaccaccgccattcttgaatacaagtct
25、gccccttgcagccccaattgcaaaaacagttcagcagccaaaccaattatggcacaactccctgctttcaatgacacaaa
26、cactgcttctgctttcaccaagagtttcagaagtccaagaaaagttgaagtcccaactgaaatcgatgaaaatctcttct
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29、agttttcactgct本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种苹果漆酶LAC3基因,其特征在于,所述的基因编码:
2.如权利要求1所述的苹果漆酶LAC3基因,其特征在于,所述2)中的同源性不低于95%。
3.如权利要求1所述的苹果漆酶LAC3基因,其特征在于,所述的基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:2。
4.一种植物表达载体,所述的表达载体中携带有权利要求1所述的苹果漆酶LAC3基因的核酸片段。
5.一种重组农杆菌,其特征在于,所述的重组农杆菌中携带有权利要求4所述的植物表达载体。
6.权利要求1所述的苹果漆酶LAC3基因在提高烟草中木质素的生物合成中的应用。
7.一种提高烟草抗蚜虫抗性的方法,其特这个在于,所述的方法是在烟草植株中提高权利要求1所述的苹果漆酶LAC3基因的表达量。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的提高权利要求1所述的苹果漆酶LAC3基因的表达量,是使用权利要求5所述的重组农杆菌来转化烟草植株。
9.一种筛选具有更好抗蚜虫抗体的烟草植株的方法,其特征在于,所述的方法是通过检测权利要求1所述的苹果漆酶LAC
...【技术特征摘要】
1.一种苹果漆酶lac3基因,其特征在于,所述的基因编码:
2.如权利要求1所述的苹果漆酶lac3基因,其特征在于,所述2)中的同源性不低于95%。
3.如权利要求1所述的苹果漆酶lac3基因,其特征在于,所述的基因的核苷酸序列为seq id no:2。
4.一种植物表达载体,所述的表达载体中携带有权利要求1所述的苹果漆酶lac3基因的核酸片段。
5.一种重组农杆菌,其特征在于,所述的重组农杆菌中携带有权利要求4所述的植物表达载体。
6.权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员:周洪旭,李津洋,崔梦霞,陈芳龙,王颖,滕子文,范银君,万方浩,
申请(专利权)人:青岛农业大学,
类型:发明
国别省市:
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