【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学制药，具体而言涉及一种德谷胰岛素的合成方法。
技术介绍
1、德谷胰岛素，化学名：赖氨酸b29(nε-十六烷二醇-γ-谷氨酸)去(b30)人胰岛素。由丹麦诺和诺德公司研制的重组德谷胰岛素注射液是一种新型长效胰岛素类似物。2012年10月在日本人上市，2013年1月得到欧盟批准上市，应用于i型和ii糖尿病患者的治疗。经皮下注射后形成多六聚体，半衰期24小时，作用时间长达42小时。
2、国内外关于德谷胰岛素制备的方法很多，一般通过基因重组技术得到德谷胰岛素主链，再通过连接侧链t-bu-pal-glu(osu)-o(t-bu)，脱去保护，得到德谷胰岛素。由于主链包括a链和b链，其a1和b1胺基也会参与反应，导致收率低，分离困难。
3、因此，本领域技术人员致力于开发一种收率高、分离简单、工业化操作难度低的德谷胰岛素合成方法。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种德谷胰岛素的合成方法，该合成方法具有操作简单、定向转化率高、环境友好、收率高、纯度高的优点。
2、本专利技术解决技术问题所采用的技术方案是：一种德谷胰岛素的合成方法，包括如下步骤：
3、步骤1)、以五十肽、侧链为原料，加入反应溶剂，调整ph值，反应得到德谷胰岛素粗品；所述五十肽为德谷胰岛素主链；所述侧链为十六烷二酸酰化l-谷氨酸-γ-活性酯，所述侧链的结构式如下：
4、
5、步骤2)、将德谷胰岛素粗品经制备液相分离，
6、具体合成路线如下：
7、
8、进一步地，所述德谷胰岛素主链与侧链的摩尔比为1：1～1：10。优选为1：3～1：5。
9、进一步地，侧链活性酯中的r取代基团包括：五氟苯(pfp)、邻苯二甲酰亚胺(pht)、5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺(nb)、7-偶氮苯并三氮唑(at)、琥珀酰亚胺(su)、苯并三唑(bt)、苯并吡唑、苯并吡咯、对硝基苯、吡唑、磺酸琥珀酰亚胺中的任意一种。
10、进一步地，所述反应溶剂为水、乙醇、甲醇、异丙醇、丁二醇、dmf、二氧六环、thf中的一种或多种的混合。反应溶剂优选混合溶剂，如水+dmf；水溶解德谷胰岛素主链的效果较好，dmf对侧链活性酯溶解性比较好；两者组成的混合溶剂可以兼顾主链和侧链的溶解性。
11、进一步地，反应过程中的ph值通过无机酸碱调节；无机碱包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾中的一种或多种；无机酸包括盐酸、硫酸、磷酸中的一种或多种。
12、进一步地，反应过程中，先通过无机碱将反应体系调节为碱性，再通过无机酸将反应体系调节至中性。
13、进一步地，步骤1)中，在反应体系中加入五十肽、反应溶剂，调节ph值为碱性后，分批加入侧链活性酯，保持反应一段时间后，调节ph值至中性，得到德谷胰岛素粗品溶液。侧链活性酯需要分批加入，由于活性酯需要过量很多，一次性加完不仅不能促进反应，还会浪费侧链活性酯；分批加入可以做到反应效率最高和成本控制最优。
14、进一步地，步骤2)中，纯化制备流动相为醇和水。
15、本专利技术的有益效果是：与现有技术相比，本专利技术提供的德谷胰岛素的合成方法，采用脱保护的侧链活性酯直接与德谷胰岛素主链反应，通过反应溶剂和控制ph值达到定向转化；采用混合溶剂，兼顾主链与侧链的溶解性；反应过程中对ph值进行调控，在碱性环境下，可以大大提高反应的选择性，使侧链活性酯主要与胰岛素主链b29位的赖氨酸ε位点反应，极少与胰岛素ab两条链端部的氨基发生反应；为了防止多肽被水解，反应完成后再将ph调回；降低了工业化操作难度，大幅度提高了反应收率；具有操作简单、定向转化率高、环境友好、收率高、纯度高的优点。
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1.一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于：所述德谷胰岛素主链与侧链的摩尔比为1：1～1：10。
3.如权利要求1所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于，侧链活性酯中的R取代基团包括：五氟苯(PFP)、邻苯二甲酰亚胺(PHT)、5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺(NB)、7-偶氮苯并三氮唑(At)、琥珀酰亚胺(Su)、苯并三唑(Bt)、苯并吡唑、苯并吡咯、对硝基苯、吡唑、磺酸琥珀酰亚胺中的任意一种。
4.如权利要求1所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于：所述反应溶剂为水、乙醇、甲醇、异丙醇、丁二醇、DMF、二氧六环、THF中的一种或多种的混合。
5.如权利要求1所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于：反应过程中的pH值通过无机酸碱调节；无机碱包括氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸氢钾中的一种或多种；无机酸包括盐酸、硫酸、磷酸中的一种或多种。
6.如权利要求1或2所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于：反应过
7.如权利要求1所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于：步骤1)中，在反应体系中加入五十肽、反应溶剂，调节pH值为碱性后，分批加入侧链活性酯，保持反应一段时间后，调节pH值至中性，得到德谷胰岛素粗品溶液。
8.如权利要求1所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于：步骤2)中，纯化制备流动相为醇和水。
...【技术特征摘要】
1.一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于：所述德谷胰岛素主链与侧链的摩尔比为1：1～1：10。
3.如权利要求1所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于，侧链活性酯中的r取代基团包括：五氟苯(pfp)、邻苯二甲酰亚胺(pht)、5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺(nb)、7-偶氮苯并三氮唑(at)、琥珀酰亚胺(su)、苯并三唑(bt)、苯并吡唑、苯并吡咯、对硝基苯、吡唑、磺酸琥珀酰亚胺中的任意一种。
4.如权利要求1所述的一种德谷胰岛素的合成方法，其特征在于：所述反应溶剂为水、乙醇、甲醇、异丙醇、丁二醇、dmf、二氧六环、thf中的一种或多种的混合。
5.如权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员：翟富民，范豪，时彬，平宪卿，黄潇，温佳红，祁高富，任富山，
申请(专利权)人：恒敬合创生物医药浙江有限公司，
类型：发明
国别省市：
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