【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物病原物，具体为一种小麦茎基腐病接种体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、小麦茎基腐病(fusarium crown rot，fcr)是一种由镰孢菌属真菌(fusariumspp.)引起的严重危害小麦生产的土传病害。该病在小麦全生育期均可发生，发病植株症状主要表现为茎基部叶鞘和茎秆变褐，茎节坏死，从而造成植株死亡、穗部枯白，严重影响小麦籽粒形成和灌浆。不仅如此，有研究表明小麦茎基腐病发生严重时极大降低谷物的产量和品质，同时产生脱氧雪腐镰刀菌烯醇(don)、雪腐镰刀菌烯醇(niv)等多种毒素，严重影响到人畜的健康。
2、由于茎基腐病具有病原菌腐生性强、宿主广泛、主要发病部位为茎基部、全生育期都可发病等特点，采用杀菌剂等传统方法难以有效根治。因此，种植抗病品种成为防控茎基腐病发生、减轻危害最有效、最环保的措施之一。病原生物的接种工作是整个抗病品种筛选过程中最基础、最重要的步骤，接种体的制备又是决定接种工作成败的重要因素之一。尤其对于田间接种环境而言，往往存在小麦茎基腐病感染不均，其他病原体的污染以及环境条件不稳定等问题，这些因素都不利于病情的稳定发生与病情的稳定鉴定，进而影响抗病品种的筛选。因此，亟需提供一种适用于田间接种环境的小麦茎基腐病接种体，以满足小麦品种抗茎基腐病病情鉴定，进而利于小麦茎基腐病抗性种质资源的筛选。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种小麦茎基腐病接种体及其制备方法和应用，本专利技术所述制备方法节约空间，能够在短时间
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种小麦茎基腐病接种体的制备方法，包括如下步骤：
4、将活化后的假禾谷镰刀菌菌丝块加入液体发酵培养基中摇培4～6天，得到分生孢子悬浮液；
5、将稀释后的分生孢子悬浮液作为二级种，将所述二级种与谷粒培养物混合进行发酵，得到板结的谷粒培养物；
6、将板结的谷粒培养物继续发酵，得到小麦茎基腐病接种体；
7、所述假禾谷镰刀菌，保藏编号为cgmcc 3.20319，命名为14ly24-2，保藏时间为2021年2月，保藏单位为中国普通微生物菌种保藏管理中心。
8、优选地，所述活化后的假禾谷镰刀菌菌丝块与液体发酵培养基的体积比为1:10～20。
9、优选地，所述摇培的温度为23～25℃。
10、优选地，所述稀释后的分生孢子悬浮液浓度为1×102～1×104个/ml。
11、优选地，所述二级种与谷粒培养物混合的体积比为1:30～38。
12、优选地，所述发酵的条件为在22～28℃，湿度55～85％条件下发酵培养3～8天。
13、本专利技术还提供了一种所述制备方法得到的小麦茎基腐病接种体。
14、本专利技术还提供了一种小麦茎基腐病田间接种方法，将所述的小麦茎基腐病接种体与谷粒混合，进行播种或在接种沟中播撒接种体；当所述谷粒为小麦粒时，接种体使用量为8.0～12.0kg/亩；当所述谷粒为粟粒时，接种体施用量为4.0～6.0kg/亩。
15、本专利技术还提供了一种所述的小麦茎基腐病接种体在小麦茎基腐病病情鉴定中的应用。
16、本专利技术还提供了一种所述的小麦茎基腐病接种体在小麦茎基腐病抗性种质筛选中的应用。
17、本专利技术与现有技术相比，具有以下有益效果：
18、本专利技术利用液固双相发酵生产小麦茎基腐病接种体，本专利技术的制备方法节约空间，能够在短时间内获得大量接种体。本专利技术的制备方法一次性发酵得到的接种体量大且时间短，是常规聚乙烯袋的4～7倍，培养时间缩短6天；一次性培养量操作次数减少4次。另外，常规聚乙烯袋培养方法培养100袋，污染20～30袋(平均25袋)，污染比例为20～30％(平均25％)；本专利技术的制备方法污染概率极低，培养100盘，污染1～3盘(平均2盘，2％污染率)。本专利技术首先采用液体发酵获得分生孢子悬浮液，将分生孢子悬浮液与谷物培养物混合后进行发酵培养，相比固体浅盘发酵培养直接将菌种与谷物培养物混合培养，提高了菌种与谷物培养物的接种面积，使谷物培养物充分发酵。本专利技术的发酵培养方法使用液相二级种进行扩繁，采用适量浓度的分生孢子悬浮液与谷物培养物共同培养，既能够有效降低污染概率，保证接种体的侵染效率；又达到快速混匀，节约发酵时间的目的。
19、本专利技术得到的接种体用于田间接种试验效果显著，2021年河南省安阳市内黄拔节期对照病株率为71.2％，成熟期对照病茎率为70.3％，病情指数为38.4。2022年河南省安阳市内黄拔节期病株率为69.5％，成熟期对照病茎率为70.7％，病情指数为37.5。两年田间试验均达到了进行小麦成熟期抗性鉴定的发病程度，感病品种平均病情指数>35，能够满足小麦品种抗茎基腐病鉴定的发病程度的要求。
20、生物保藏信息
21、假禾谷镰刀菌(fusariumpseudograminearum)，命名为：14ly24-2，保藏单位为：中国普通微生物菌种保藏管理中心单位，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号：cgmcc 3.20319，保藏日期：2021年2月。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种小麦茎基腐病接种体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述活化后的假禾谷镰刀菌菌丝块与液体发酵培养基的体积比为1:10～20。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述摇培的温度为23～25℃。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述稀释后的分生孢子悬浮液浓度为1×102～1×104个/mL。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述二级种与谷粒培养物混合的体积比为1:30～38。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述发酵的条件为在22～28℃，湿度55～85％条件下发酵培养3～8天。
7.权利要求1-6任意一项所述制备方法得到的小麦茎基腐病接种体。
8.一种小麦茎基腐病田间接种方法，其特征在于，将权利要求7所述的小麦茎基腐病接种体与谷粒混合，进行播种或在接种沟中播撒接种体；当所述谷粒为小麦粒时，接种体使用量为8.0～12.0kg/亩；当所述谷粒为粟粒时，接种体施用量为4.0～6.0kg/亩。<...
【技术特征摘要】
1.一种小麦茎基腐病接种体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述活化后的假禾谷镰刀菌菌丝块与液体发酵培养基的体积比为1:10～20。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述摇培的温度为23～25℃。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述稀释后的分生孢子悬浮液浓度为1×102～1×104个/ml。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述二级种与谷粒培养物混合的体积比为1:30～38。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐飞，李丽娟，张姣姣，刘露露，石瑞杰，冯超红，王爽，王俊美，李亚红，韩自行，
申请(专利权)人：河南省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。