【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及新型功能材料和生物传感，具体涉及一种双淬灭剂au@nifemofs复合材料的制备方法和应用。
技术介绍
1、自然海水中广泛存在多种海洋致病菌，这些致病菌的存在不仅关系到水产养殖业的发展，而且对人体健康存在巨大的隐患。而副溶血弧菌作为海洋致病菌的一种，广泛的存在于海水及各种海鲜产品中，其在我国以及世界范围内引起的食物中毒的现象逐年上升，已成为危害最严重的海洋致病菌之一。副溶血弧菌常见的检测基因包括tlh、tdh、trh基因，而副溶血弧菌中的tlh基因是和人类的疾病无关的溶血素基因，前期的研究显示该溶血素基因存在于所有的副溶血性弧菌菌株中，因此它被认为是检测副溶血性弧菌的特异性靶点。
2、目前对副溶血弧菌的国标检测方法为传统的分离培养法，该方法不能满足如今快速、灵敏、高效率的检测要求。因此，近些年一系列新型的检测方法逐渐进入我们的视野。其中就包括聚合酶链式反应法、环介导等温扩增技术、酶链免疫吸附法、生物传感器，而生物传感器检测速度快、成本较低、操作简便、随时可以进行现场检测等优点倍受关注。而电化学发光生物传感器不仅背景信号低、稳定性好、反应快、灵敏度高、简单，而且可便携化、实现现场实时检测，目前具有很大的发展前景。
3、金纳米颗粒还有优异的电化学性能及协同效应，将金属/金属氧化物的纳米颗粒负载到mof中制备成复合材料是一个非常有吸引力的领域。mof金属有机框架给金属/金属氧化物的纳米颗粒提供可调控的孔径及更大的比表面积，还可防止颗粒聚集，并可以为其提供更多的功能性活性位点。当金属/金属氧化物的纳
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种双淬灭剂au@nifemofs复合材料的制备方法和应用。本专利技术采用易获得的镍源和铁源，通过常温搅拌的绿色方法得到沉淀的双金属nifemof材料；将上述材料干燥后，通过表面生长的方法，使金纳米颗粒与nifemof复合，制得au@nifemof复合材料。本专利技术制备的nifemof的多孔的结构及较高的比表面积可以防止金纳米颗粒聚集、提高更多的活性位点，而金纳米颗粒可以提高这种框架结构的导电性和电催化活性，从而使得au@nifemof复合材料表现出优异的电化学性能。
2、为实现上述目的，本专利技术所设计的技术方案如下：
3、本专利技术提供了一种au@nifemof复合材料的制备方法，该方法是以nifemof为载体，通过表面原位还原的方法使金纳米颗粒均匀的负载在nifemof的表面，合成得到au@nifemof复合材料。
4、进一步地，所述nifemof的制备方法如下：
5、a.称取铁氰化钾、六水合氯化镍和柠檬酸钠；
6、b.将铁氰化钾溶于水中得到铁氰化钾溶液；
7、c.再将六水合氯化镍和柠檬酸钠溶于水中得到镍源混合液；
8、d.将铁氰化钾溶液和镍源混合液混合超声溶解，并搅拌直至溶液浑浊产生大量沉淀，洗涤和干燥，得到nifemof。
9、再进一步地，铁氰化钾、六水合氯化镍和柠檬酸钠的质量比为1∶1～1.2∶2～2.2。
10、再进一步地，铁氰化钾、六水合氯化镍和柠檬酸钠的质量比为1∶1.09∶2.03。
11、再进一步地，au@nifemof复合材料由以下方法负载而成：
12、a.称取nifemof、聚乙烯吡咯烷酮、碳酸钾和硼氢化钠，配制1％的haucl4溶液；
13、b.将nifemof和碳酸钾分别溶于水中，分别获得nifemof溶液和碳酸钾溶液；
14、c.向nifemof溶液中加入haucl4溶液，搅拌均匀，然后加入聚乙烯吡咯烷酮(简称为pvp，防止金纳米颗粒聚集)；再加入碳酸钾溶液，最后加入硼氢化钠搅拌均匀，离心洗涤干燥，得到au@nifemof复合材料。
15、再进一步地，nifemof、聚乙烯吡咯烷酮、碳酸钾和硼氢化钠的质量比为1∶0.8～1.2∶1～1.5∶1.7～2.5；nifemof与haucl4溶液的质量体积比为7.5～9mg/ml。
16、再进一步地，nifemof、聚乙烯吡咯烷酮、碳酸钾和硼氢化钠的质量比为1∶1∶1.4∶2.25；nifemof与haucl4溶液的质量体积比为8.3mg/ml。
17、本专利技术还提供了一种au@nifemof复合材料在构建电化学发光生物传感器中的应用。
18、本专利技术还提供了一种基于au@nifemofs复合材料在电化学发光生物传感器构建方法，包括以下步骤：
19、a.将au@nifemof溶于n,n-二甲基甲酰胺(dmf)中，获得au@nifemof溶液；
20、b.将玻碳电极抛光，然后依次用去离子水、无水乙醇和去离子水进行清洗，再用n2吹干表面，预处理烘干后备用，得到预处理后的玻碳电极；
21、c.将5μl荧光二硫化钼(mos2qds)量子点发光材料滴在预处理后的玻碳电极表面，干燥，然后将2μl 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(edc)和2μl n-羟基丁二酰亚胺(nhs)溶液继续滴加到玻碳电极上，干燥后加入4μl发夹dna，接着加入2μl三(2-羧乙基)膦(tcep)，再滴加4μl au@nifemof溶液，干燥后加入5μl牛血清白蛋白(bsa)溶液，最后干燥后制得修饰电极；
22、d.采用三电极体系，以制得的修饰电极为工作电极，铂片电极为辅助电极，银氯化银电极为参比电极，将以上三个电极插入溶有共反应剂的pbs缓冲溶液中，通过bpcl超弱发光仪器测试电化学发光信号，记录电化学发光信号的强度，最终构建得到基于au@nifemofs复合材料的电化学生物传感器。
23、进一步地，所述步骤c)中，发夹dna的碱基序列及两端修饰的基团如下所示：
24、nh2-(ch2)6-ggaagacgtgaacgcaagtgatcctttcttc c-(ch2)6-sh。
25、本专利技术还提供了一种上述方法制备的电化学发光生物传感器在检测副溶血弧菌的tlh基因中的应用，包括如下步骤：
26、a.利用pbs缓冲溶液将10μm的tlh基因dna溶液进行稀释，得到100pm～10am的dna溶液；其中，所述tlh基因的碱基序列如下：
27、ggttgatgtccaaacaaggatcacttgcgttcacgaaac cgtgctcttct；
28、b.然后将dna溶液滴加到上述电化学发光生物传感器的修饰电极表面，干燥测试；检测得到副溶血弧菌tlh基因的浓度。
29、本专利技术的有益效果：...
【技术保护点】
1.一种Au@NiFeMOF复合材料的制备方法，其特征在于：所述方法是以NiFeMOF为载体，通过表面原位还原的方法使金纳米颗粒均匀的负载在NiFeMOF的表面，合成得到Au@NiFeMOF复合材料。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述NiFeMOF的制备方法如下：
3.根据权利要求2所述方法，其特征在于：所述步骤a)中，铁氰化钾、六水合氯化镍和柠檬酸钠的质量比为1∶1～1.2∶2～2.2。
4.根据权利要求2或3所述方法，其特征在于：所述步骤a)中，铁氰化钾、六水合氯化镍和柠檬酸钠的质量比为1∶1.09∶2.03。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述Au@NiFeMOF复合材料由以下方法负载而成：
6.根据权利要求5所述方法，其特征在于：所述步骤a)中，NiFeMOF、聚乙烯吡咯烷酮、碳酸钾和硼氢化钠的质量比为1∶0.8～1.2∶1～1.5∶1.7～2.5；NiFeMOF与HAuCl4溶液的质量体积比为7.5～9mg/mL。
7.根据权利要求5或6所述方法，其特征在于：所述步骤a)中，N
8.一种Au@NiFeMOF复合材料在构建电化学发光生物传感器中的应用。
9.一种基于Au@NiFeMOFs复合材料在电化学发光生物传感器构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
10.一种权利要求9所述方法制备的电化学发光生物传感器在检测副溶血弧菌的TLH基因中的应用，其特征在于：包括如下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种au@nifemof复合材料的制备方法，其特征在于：所述方法是以nifemof为载体，通过表面原位还原的方法使金纳米颗粒均匀的负载在nifemof的表面，合成得到au@nifemof复合材料。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述nifemof的制备方法如下：
3.根据权利要求2所述方法，其特征在于：所述步骤a)中，铁氰化钾、六水合氯化镍和柠檬酸钠的质量比为1∶1～1.2∶2～2.2。
4.根据权利要求2或3所述方法，其特征在于：所述步骤a)中，铁氰化钾、六水合氯化镍和柠檬酸钠的质量比为1∶1.09∶2.03。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述au@nifemof复合材料由以下方法负载而成：
6.根据权利要求5所述方法，其特征在于：所述步骤...
【专利技术属性】
技术研发人员：张甜，张友航，李明，程菲，史玮玮，
申请(专利权)人：武汉理工大学三亚科教创新园，
类型：发明
国别省市：
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