【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及有效减少甲型流感感染的抗体及此类抗体的用途。特别地，本专利技术涉及甲型流感感染的预防和治疗。
技术介绍
1、流感是一种传染病，每年都会在世界各地爆发，导致每年约300万至500万例严重疾病和约290000至650000例呼吸道感染死亡(who,influenza(seasonal)fact sheet,2018年11月6日)。最常见的症状包括：突然发烧、咳嗽(通常干咳)、头痛、肌肉和关节疼痛、严重身体不适(感觉不舒服)、喉咙痛和流鼻涕。潜伏期从一天到四天不等，但通常在暴露于病毒后两天左右开始出现症状。流感的并发症可能包括肺炎、鼻窦感染及既往健康问题的恶化，如哮喘或心力衰竭、脓毒症或慢性基础疾病的加剧。
2、流感由流感病毒引起，流感病毒是正粘病毒(orthomyxoviridae)科的一组具有抗原性和遗传多样性的病毒，含有负义、单链、分段rna基因组。在四种类型的流感病毒(甲型、乙型、丙型和丁型)中，三种类型(甲型、乙型和丙型)影响人类。甲型流感病毒是最致命的人类病原体并会导致最严重的疾病。甲型流感病毒可根据存在的主要表面蛋白的不同亚型进行分类：血凝素(ha)和神经氨酸酶(na)。存在至少18种由其血凝素(“ha”)蛋白定义的甲型流感亚型。ha可分为两组。组1包括h1、h2、h5、h6、h8、h9、h11、h12、h13、h16和h17亚型，组2包括h3、h4、h7、h10、h14和h15亚型。虽然所有亚型均存在于鸟类中，但大多数h1、h2和h3亚型会导致人类患病。h5、h7和h9亚型正在导致人类散发性严
3、ha是甲型流感病毒的主要表面蛋白，是感染或疫苗接种诱导的中和抗体的主要靶点。ha负责将病毒与膜上具有唾液酸的细胞结合，如上呼吸道中的细胞或红细胞。另外，在降低ph后，ha会介导病毒包膜与内体膜的融合。ha为同源三聚体整合膜糖蛋白。ha三聚体由三个相同的单体组成，每个单体由完整的ha0单多肽链形成，ha1区域和ha2区域通过2个二硫键连接。每个ha2区域呈现α螺旋卷曲螺旋结构并主要形成ha的“茎”或“茎干”区域，而ha1区域为含有α/β结构的混合物的小球状结构域(ha的“头部”区域)。球状ha头部区域介导与唾液酸受体的结合，而ha茎介导病毒和细胞膜之间的随后融合，该融合由低ph在内体中触发。虽然免疫显性ha球状头部结构域具有高度可塑性，不同的抗原位点发生恒定的抗原漂移，但ha茎区域在亚型中是相对保守的。目前的流感疫苗主要诱导针对免疫显性和可变ha头部区域的免疫反应，该区域比ha的茎区域进化得更快(kirkpatrick e,qiu x,wilsonpc,bahl j,krammer f.the influenza virus hemagglutinin head evolves fasterthan the stalk domain.sci rep.2018jul 11；8(1):10432)。因此，一种特定的流感疫苗通常只能提供不超过几年的保护，故而需要每年重新开发流感疫苗。
4、为了克服这些问题，最近开发了新的一类靶向ha茎中的保守位点的流感中和抗体作为流感病毒治疗法。与靶向ha的头部区域的抗体相比，这些靶向ha的茎区域的抗体通常具有更广泛的中和作用。corti d.and lanzavecchia a.,broadly neutralizingantiviral antibodies.annu.rev.immunol.2013；31:705–742中提供了对广泛中和甲型流感抗体的综述。okuno等人用流感病毒a/okuda/57(h2n2)使小鼠免疫并分离出一种单克隆抗体(c179)，该抗体在动物模型中体外和体内与ha2中的保守构象表位结合并中和组1中的h2、h1和h5亚型甲型流感(okuno等人,1993；smirnov等人,1999；smirnov等人,2000)。ha-茎区域靶向抗体的其他实例包括cr6261(throsby m,van den brink e,jongeneelen m,poonllm,alard p,cornelissen l等人(2008)heterosubtypic neutralizing monoclonalantibodies cross-protective against h5n1 and h1n1 recovered from human igm+memory b cells.plos one 3(12):e3942.https://doi.org/10.1371/journal.pone.0003942；friesen rhe,koudstaal w,koldijk mh,weverling gj,brakenhoff jpj,lenting pj等人(2010)new class of monoclonal antibodies againstsevere influenza:prophylactic and therapeutic efficacy in ferrets.plos one 5(2):e9106.https://doi.org/10.1371/journal.pone.0009106)、f10(sui j,hwang wc,perez s,wei g,aird d,chen lm,santelli e,stec b,cadwell g,ali m,wan h,murakamia,yammanuru a,han t,cox nj,bankston la,donis ro,liddington rc,marasco wa(march 2009)."structural and functional bases for broad-spectrumneutralization of avian and human influenza a viruses".nature structural&molecular biology.16(3):265–73.doi:10.1038/nsmb.1566)、cr8020(ekiert dc,friesen rhe,bhabha g,kwaks t,jongeneelen m等人2011.a highly conservedneutralizing epitope on group 2influenza a viruses.science 333(6044):843–50)、fi6(corti d,voss j,gamblin sj,codoni g,macagno a等人2011.a neutralizingantibody selected from plasma cells that binds to group 1and本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗体，所述抗体包含分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3中所陈列的重链CDR1、CDR2和CDR3序列；分别如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6中所陈列的轻链CDR1、CDR2和CDR3序列；及重链恒定区中的突变M428L和N434S。
2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体与甲型流感病毒的血凝素结合。
3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述抗体中和甲型流感病毒的感染。
4.根据权利要求3所述的抗体，其中所述抗体以不超过用比较抗体中和甲型流感所需剂量的一半的剂量中和甲型流感感染，所述比较抗体与所述抗体的不同仅在于所述比较抗体在重链恒定区中不含突变M428L和N434S。
5.根据权利要求4所述的抗体，其中所述剂量不超过用所述比较抗体中和甲型流感所需剂量的三分之一。
6.根据权利要求4或5所述的抗体，其中所述剂量不超过用所述比较抗体中和甲型流感所需剂量的五分之一。
7.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体中和H
8.根据权利要求7所述的抗体，其中所述抗体中和H3 HA的多态性HA1P11S、HA2 D46N和/或HA2 N49T；和/或H1 HA的多态性N146D，相对于野生型病毒的HA，IC50变化倍数<2。
9.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中与比较抗体相比，所述抗体引发降低的抗药物抗体反应，所述比较抗体与所述抗体的不同仅在于所述比较抗体在重链恒定区中不含突变M428L和N434S。
10.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中与比较抗体相比，所述抗体表现出较低的免疫原性，所述比较抗体与所述抗体的不同仅在于所述比较抗体在重链恒定区中不含突变M428L和N434S。
11.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体为人抗体。
12.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体为单克隆抗体。
13.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体是IgG型的。
14.根据权利要求13所述的抗体，其中所述抗体是IgG1型的。
15.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体的所述轻链为κ轻链。
16.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:7具有至少70％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:8具有至少70％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的CDR序列。
17.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:7具有至少75％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:8具有至少75％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的CDR序列。
18.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:7具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:8具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的CDR序列。
19.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:7具有至少85％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:8具有至少85％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的CDR序列。
20.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:7具有至少90％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:8具有至少90％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的CDR序列。
21.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:7具有至少95％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:8具有至少95％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的CDR序列。
22.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含...
【技术特征摘要】
1.一种抗体，所述抗体包含分别如seq id no:1、seq id no:2和seq id no:3中所陈列的重链cdr1、cdr2和cdr3序列；分别如seq id no:4、seq id no:5和seq id no:6中所陈列的轻链cdr1、cdr2和cdr3序列；及重链恒定区中的突变m428l和n434s。
2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体与甲型流感病毒的血凝素结合。
3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述抗体中和甲型流感病毒的感染。
4.根据权利要求3所述的抗体，其中所述抗体以不超过用比较抗体中和甲型流感所需剂量的一半的剂量中和甲型流感感染，所述比较抗体与所述抗体的不同仅在于所述比较抗体在重链恒定区中不含突变m428l和n434s。
5.根据权利要求4所述的抗体，其中所述剂量不超过用所述比较抗体中和甲型流感所需剂量的三分之一。
6.根据权利要求4或5所述的抗体，其中所述剂量不超过用所述比较抗体中和甲型流感所需剂量的五分之一。
7.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体中和h3 ha的多态性ha1p11s、ha2 d46n和/或ha2 n49t；和/或h1 ha的多态性n146d。
8.根据权利要求7所述的抗体，其中所述抗体中和h3 ha的多态性ha1p11s、ha2 d46n和/或ha2 n49t；和/或h1 ha的多态性n146d，相对于野生型病毒的ha，ic50变化倍数<2。
9.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中与比较抗体相比，所述抗体引发降低的抗药物抗体反应，所述比较抗体与所述抗体的不同仅在于所述比较抗体在重链恒定区中不含突变m428l和n434s。
10.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中与比较抗体相比，所述抗体表现出较低的免疫原性，所述比较抗体与所述抗体的不同仅在于所述比较抗体在重链恒定区中不含突变m428l和n434s。
11.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体为人抗体。
12.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体为单克隆抗体。
13.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体是igg型的。
14.根据权利要求13所述的抗体，其中所述抗体是igg1型的。
15.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体的所述轻链为κ轻链。
16.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与seq id no:7具有至少70％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与seq id no:8具有至少70％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的cdr序列。
17.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与seq id no:7具有至少75％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与seq id no:8具有至少75％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的cdr序列。
18.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与seq id no:7具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与seq id no:8具有至少80％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的cdr序列。
19.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与seq id no:7具有至少85％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与seq id no:8具有至少85％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的cdr序列。
20.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与seq id no:7具有至少90％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与seq id no:8具有至少90％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的cdr序列。
21.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含与seq id no:7具有至少95％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与seq id no:8具有至少95％同一性的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的cdr序列。
22.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如seq id no:7中所陈列的氨基酸序列，所述轻链可变区包含如seq id no:8中所陈列的氨基酸序列，其中保留了如权利要求1中所定义的cdr序列。
23.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体的ch3区不包含除m428l和n434s外的任何其他突变。
24.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体的fc区不包含除m428l和n434s外的任何其他突变。
25.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含重链和轻链，所述重链包含如seq id no:9中所陈列的氨基酸序列，所述轻链包含如seq id no:10中所陈列的氨基酸序列。
26.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体具有由如seq id no:9中所陈列的氨基酸序列组成的重链和由如seq id no:10中所陈列的氨基酸序列组成的轻链。
27.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其用于甲型流感病毒感染的预防或治疗。
28.根据权利要求27所述之用途的抗体，其中所述抗体预防性地施用。
29.根据权利要求27或28所述之用途的抗体，其中所述抗体以不超过用比较抗体预防或治疗甲型流感所需剂量的一半的剂量施用，所述比较抗体与所述抗体的不同仅在于所述比较抗体在重链恒定区中不含突变m428l和n434s。
30.根据权利要求29所述之用途的抗体，其中所述剂量不超过用所述比较抗体预防或治疗甲型流感所需剂量的三分之一。
31.根据权利要求29所述之用途的抗体，其中...
【专利技术属性】
技术研发人员：达维德·科尔蒂，法比奥·贝尼尼，
申请(专利权)人：胡默波斯生物医学公司，
类型：发明
国别省市：
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