【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及于分子生物学及基因工程，具体涉及水稻基因osditf1在水稻抗旱中的应用。
技术介绍
1、随着全球气候变化加剧、人口激增、农业用水需求增加以及淡水资源短缺，干旱成为制约全球农业发展的关键因素，严重影响粮食的品质与产量。在过去十几年中，因干旱造成的全球农作物经济损失总计高达300亿美元。就我国主粮作物而言，水稻与其他作物相比，生产需消耗更多的淡水资源，生产1千克的水稻种子需要3吨至5吨的水分，而玉米或小麦仅需一半以下的水分，导致水稻的生长发育和产量更容易遭受干旱胁迫的影响。因此，深入挖掘水稻干旱相关基因、解析抗旱分子机制，从而培育抗旱水稻品种，对于提高水稻产量和品质以及保障粮食安全具有重要意义。
2、作物生长的任何时期都可能遭受干旱胁迫，导致作物品质和产量下降，特别是作物生殖生长时期的干旱，则会导致至少50％的减产。此时，干旱会影响开花受精，降低花粉育性，从而降低结实率；干旱会导致灌浆不饱满，从而降低千粒重；干旱会影响穗发育，如穗长变短、穗粒数减少，这些因素在很大程度上造成作物减产。因此，产量可以作为评价抗旱性的重要指标。
3、然而，目前仍没有关于osditf1基因在水稻抗旱中应用的报道。本专利技术研究发现，采用生物技术手段改变水稻osditf1基因的表达水平，可提高水稻抗旱性从而提高产量。
技术实现思路
1、基于上述
技术介绍
问题，本专利技术的目的在于提供水稻osditf1基因在水稻抗旱中的应用，具体通过osditf1基因过表达植株，以及采用cr
2、本专利技术的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供一种水稻osditf1基因在水稻抗旱中的应用。
3、本专利技术所采取的技术方案是：
4、本专利技术的第一个方面，提供：
5、水稻基因osditf1在水稻抗旱中的应用，所述osditf1基因的核苷酸序列如seq idno.1所示。
6、在一些的应用实例中，所述osditf1蛋白的氨基酸序列如seq id no.3所示。
7、在一些的应用实例中，包括以下步骤：将水稻基因osditf1在水稻中过表达。
8、在一些的应用实例中，包括以下步骤：构建水稻基因osditf1的过表达载体；
9、将过表达载体转入水稻，得到过表达水稻。
10、在一些的应用实例中，包括以下步骤：
11、b01设计引物，扩增所述osditf1基因的cds序列；
12、b02构建过表达载体；
13、b03将b02所述的过表达载体转化至农杆菌，筛选含有osditf1的重组农杆菌菌株侵染水稻愈伤组织；
14、b04抗性愈伤组织筛选与分化，获得转基因植株；
15、在一些的应用实例中，还包括b05针对获得转基因植株进行基因检测，利用设计引物进行pcr扩增、测序，确认转化成功，得到转基因植株。
16、在一些的应用实例中，所述步骤b01的引物如seq id no.16所示和seq id no.17所示。
17、在一些的应用实例中，所述步骤b05的引物如seq id no.18和seq id no.19所示。
18、本专利技术的第二个方面，提供：
19、一种获得水稻基因osditf1突变体的基因编辑方法，包括以下步骤：
20、a01在osditf1编码区设计sgrna引物；
21、a02构建双靶点的crispr/cas9敲除载体；
22、a03将a02所述的crispr/cas9敲除载体转化至农杆菌，筛选含有crispr/cas9的重组农杆菌菌株侵染水稻愈伤组织；
23、a04抗性愈伤组织筛选与分化，获得t0代株系；
24、a05 t0代株系基因检测，利用设计引物进行pcr扩增、测序，确认敲除成功，得到osditf1突变体。
25、在一些的应用实例中，所述步骤a02中双靶点的序列如seq id no.12所示和seqid no.13所示。
26、在一些的应用实例中，所述步骤a01的sgrna引物包括两对引物，分别如seq idno.8和seq id no.9、seq id no.10和seq id no.11所示。
27、在一些的应用实例中，所述步骤a05中的引物如seq id no.14所示和seq idno.15所示。
28、有益效果
29、本专利技术通过osditf1基因过表达植株，以及采用crispr/cas9方法对osditf1基因进行敲除获得突变体，并利用胁迫条件的方式对其抗旱性进行评估，水稻过量表达osditf1基因后，在旱池中种植下，osditf1过表达植株产量相对于野生型产量显著提高。从而表明，过量表达osditf1能显著提高水稻的抗旱性，并提高干旱条件下水稻的产量。
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1.水稻基因OsDITF1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，所述OsDITF1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的水稻基因OsDITF1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，所述OsDITF1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
3.根据权利要求1所述的水稻基因OsDITF1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，包括以下步骤：将水稻基因OsDITF1在水稻中过表达。
4.根据权利要求3所述的水稻基因OsDITF1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，包括：
5.根据权利要求4所述的水稻基因OsDITF1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，包括：
6.根据权利要求5所述的水稻基因OsDITF1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，还包括：
7.根据权利要求5所述的水稻基因OsDITF1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，步骤B01的引物如SEQ ID NO.16所示和SEQ ID NO.17所示。
8.根据权利要求6所述的水稻基因OsDITF1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，步骤B05的
...【技术特征摘要】
1.水稻基因osditf1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，所述osditf1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的水稻基因osditf1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，所述osditf1蛋白的氨基酸序列如seq id no.3所示。
3.根据权利要求1所述的水稻基因osditf1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，包括以下步骤：将水稻基因osditf1在水稻中过表达。
4.根据权利要求3所述的水稻基因osditf1在水稻抗旱中的应用，其特征在于，包括：
【专利技术属性】
技术研发人员：储成才，黄凯，都兴林，胡斌，姜文洙，张靖童，刘修杰，王威，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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