本发明专利技术公开了一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，于环境中设置多个点位和多种放置时间，将表面起始无微生物附着的微塑料放置于环境中进行预培养；将上一点位预培养后表面定植有微生物的微塑料模拟迁移，同时保留部分微塑料在上一点位、下一点位作为对照组；模拟迁移后重新设置继续培养时间，迁移后微生物在下一点位按照继续培养时间停留，在模拟迁移后在下一点位回收模拟迁移微塑料，在上一点位、下一点位分别回收对照组微塑料；将继续培养后的微塑料回收并分析表面微生物，将模拟迁移微塑料与对照组进行比较分析。本发明专利技术通过人为改变培养位置以将微塑料在环境中的迁移过程可控化，适用于所有迁移路径和所有培养时间的模拟。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于环境微生物和新污染物领域，特别是一种环境中微塑料迁移时不同停留时间下表面微生物群落变化的可控对照研究方法。
技术介绍
1、塑料制品广泛应用于人类的生产生活中。由于不合理的处置，塑料进入环境中，并在光照、风化、颗粒摩擦、微生物作用下，尺寸减小成为微塑料。目前微塑料广泛存在于环境中，成为了一种新污染物。微塑料由于比表面积大、疏水性强、化学性质稳定，是微生物附着的良好载体。当微塑料在环境中发生迁移时，其表面附着的微生物必然也会随之移动，但是目前仍然无法判断微塑料能否携带其表面的微生物到达新环境并持续稳定存在。
2、目前普遍认为微塑料表面的微生物群落与水体、沉积物等自然介质中的不同，由于环境中随机采集的微塑料原始来源不明、在该地点的停留时间不明，难以对其迁移路径进行追踪。因此，通过在自然环境中原位培养微塑料表面生物膜，再将其人为改变位置，可控地模拟了微塑料在环境中的迁移过程，并考虑了不同培养时间，以模拟微塑料在环境中的不同停留时长，并在迁移前后的不同环境中分别设定始终在该处原位培养的微塑料作为对照组，分析了微塑料在环境迁移过程中表面附着的微生物的变动情况。
3、相关术语解释：
4、微塑料：粒径不超过5mm的具有不同形状、颜色、尺寸和聚合物类型的混合物，由richard c.thompson于2004年在《science》期刊上发表的论文中首次提出。
5、原位培养：在野外环境中固定点位放置样品，使其表面附着环境中的微生物群落，培养过程中不改变地理位置环境。
>技术实现思路1、本专利技术旨在提出一种微塑料迁移中的表面微生物群落变化动态实现方法，通过人为改变培养位置以将微塑料在环境中的迁移过程可控化，设置不同的培养时间和回收时间以充分代表微塑料在环境中停留时间不同的实际情况，并以相同培养时间的微塑料作为对照组以避免微生物自由生长和附着生长之间的差异，充分分析微塑料表面微生物群落在迁移前后的变化情况。
2、为了达到上述专利技术目的，本专利技术实现了一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，包括：
3、一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，包括：
4、在不同时间点将多组微塑料放置于各点位进行预培养，设置模拟迁移前原点位的各组微塑料预培养时间，形式化定义包括：设定在模拟迁移前微塑料预培养的最长时间为xn，各组微塑料的预培养时间分别为xa天，预培养时间索引序列a＝1、2……(n-2)、(n-1)、n，n表示各组微塑料的索引，设定放置第一组微塑料的时间为第0天，模拟迁移时的时间为第xn天，放置各组微塑料进行预培养的时间分别为第(xn–xa)天；选取模拟迁移前各点位的各组微塑料预培养环境，在各个点位放置多组微塑料进行原位预培养；
5、将原点位预培养后表面定植有微生物的微塑料进行迁移过程模拟，同时保留部分微塑料在原点位作为对照组；按照所述各组微塑料的预培养时间，在每个时间点在迁移前的原点位放置(2m+1)组微塑料，迁移后的新点位放置(m+1)组微塑料，模拟迁移后有m种不同继续培养时间；在第xn天，在迁移前原点位和迁移后新点位分别回收不同预培养时间的微塑料，每个点位回收预培养xa天的微塑料各1组，每个点位共计n组，代表在各点位原位预培养时间不同的微塑料表面微生物；进行迁移过程模拟，将前一点位的m组微塑料回收后使用过滤后的当前点位水体轻柔冲洗微塑料表面，运输途中使用冰袋保存以保护微生物，携带至迁移路径上的后一点位，放置于与后一点位预培养的微塑料相同的环境条件下；设置对照组微塑料，保留m组微塑料分别始终在各点位培养；
6、模拟迁移后重新设置继续培养时间，迁移后微生物在新环境中按照继续培养时间停留，在下一点位回收模拟迁移微塑料，在上一点位、下一点位分别回收对照组微塑料；
7、回收在环境中培养后的微塑料，将模拟迁移微塑料与对照组进行比较分析：比较分析，比较在下一点位回收的模拟迁移微塑料、在上一点位回收的模拟迁移前的微塑料表面微生物差异情况，从而获得模拟迁移微塑料在改变环境后在新环境中继续定植的微生物情况；以及比较同一时间回收的模拟迁移微塑料和对照组微塑料表面微生物，研究模拟迁移前后在原环境、新环境停留时间不同下，迁移微塑料表面微生物的变动特性。
8、与现有技术相比，本专利技术具有以下技术效果：
9、1、充分考虑了基质对附着微生物生长的影响，将在迁移前后环境中培养的同种微塑料的表面微生物作为对照组；
10、2、充分考虑了微生物群落在不同定植阶段自身的差异，选取相同培养时间的微塑料表面微生物群落作为对照组；
11、3、适用于所有迁移路径和所有培养时间的模拟。
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【技术保护点】
1.一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，其特征在于，通过处理来获取需放置在模拟迁移前各点位进行预培养的微塑料，处理步骤包括微塑料放置前使用95％乙醇冲洗微塑料表面3次，后使用超纯水冲洗微塑料表面3次，保证微塑料表面在培养前没有微生物附着。
3.根据权利要求1所述的一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，其特征在于，所述微塑料回收进一步包括以下处理：
4.根据权利要求1所述的一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，其特征在于，进一步包括：
5.根据权利要求1所述的一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，其特征在于，其中，xa、yb为非等差数列或等差数列，且xa、yb数值相同或不相同。
6.根据权利要求1所述的一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，其特征在于，其中所述培养环境包括且不限于水体中、沉积物中、水体和沉积物交界面。
【技术特征摘要】
1.一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，其特征在于，通过处理来获取需放置在模拟迁移前各点位进行预培养的微塑料，处理步骤包括微塑料放置前使用95％乙醇冲洗微塑料表面3次，后使用超纯水冲洗微塑料表面3次，保证微塑料表面在培养前没有微生物附着。
3.根据权利要求1所述的一种环境迁移中微塑料表面微生物群落变化动态实现方法，其特征在于，所述微塑料回...
【专利技术属性】
技术研发人员：张笑寒，马永正，张颖，牛志广，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：
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