水稻Os04g0650800基因启动子及其应用制造技术

技术编号：43791322 阅读：2 留言：0更新日期：2024-12-24 16:23

本发明专利技术公开了水稻Os04g0650800基因启动子及其应用，属于植物生物技术领域，通过克隆Os04g0650800基因的启动子序列，成功构建了该基因的启动子驱动黄色荧光蛋白基因重组表达载体pPGDH‑YFP。通过农杆菌侵染日本晴水稻，筛选到阳性水稻植株。对T<subgt;0</subgt;代阳性稻苗接种水稻白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo），运用共聚焦显微镜观察，发现Xoo侵染阳性稻株可诱导YFP表达。通过该启动子对水稻进行基因工程改造，如通过该启动子调控目标基因高效表达，将获得响应Xoo侵染的水稻植株；若使用该启动子驱动抗病相关基因在水稻中表达，将获得抗白叶枯病的水稻植株。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物生物，具体涉及到水稻os04g0650800基因启动子及其应用。

技术介绍

1、水稻是人类重要的粮食作物之一，在我国有着悠久的耕种与食用历史。据统计，我国水稻的种植面积占粮食作物种植面积的35％左右，产量占国内粮食总产量的30％。由水稻黄单胞菌水稻致病变种xanthomonas oryzae pv.oryzae(xoo)引起的白叶枯病(ricebacterial blight)是世界范围内水稻栽培中一种常见的重要病害。由于抗病品种的利用，我国白叶枯病曾销声匿迹了一段时间。但是近年来，该病又呈现连年加重趋势，尤其在一些局部地区。防控水稻白叶枯病害最经济有效的手段是利用水稻自身的抗病性。

2、实验室前期通过分析大量水稻受白叶枯病菌(xoo)和稻瘟病菌(mor)侵染的基因芯片数据，发现水稻os04g0650800基因强烈响应xoo和mor侵染而上调表达。依据此结果，实验室通过进一步研究发现，水稻os04g0650800基因剧烈响应xoo诱导而上调表达。已有研究报道，其同源基因编码的蛋白是植物丝氨酸合成的第一个关键酶，丝氨酸又是细胞代谢中一种重要的中间产物，与植物的抗逆性息息相关。

3、然而，目前关于丝氨酸合成途径与水稻抗病性的关系未见有报道。

技术实现思路

1、本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的

2、鉴于上述和/或现有技术中存在的问题，提出了本专利技术。

3、因此，本专利技术的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种水稻os04g0650800基因启动子。

4、为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种水稻os04g0650800基因启动子，所述水稻os04g0650800基因启动子的核苷酸序列如seq id no.1所示。

5、作为本专利技术所述启动子的一种优选方案，其中：扩增水稻os04g0650800基因启动子的引物的核苷酸序列如seq id no.2和seq id no.3所示。

6、本专利技术的再一个目的是，克服现有技术中的不足，提供一种含有所述水稻os04g0650800基因启动子的重组载体。

7、作为本专利技术所述重组载体的一种优选方案，其中：所述重组载体为seq id no.1所示水稻os04g0650800基因启动子与限制性内切酶bamh i、hind iii酶切后的prhecyfp质粒通过同源重组酶连接所得。

8、本专利技术的另一个目的是，克服现有技术中的不足，提供一种水稻os04g0650800基因启动子在转基因水稻响应白叶枯病菌诱导目的基因表达中的应用。

9、本专利技术有益效果：

10、(1)通过克隆os04g0650800启动子序列，成功构建了该启动子驱动yfp表达的重组载体ppgdh-yfp，通过农杆菌侵染日本晴水稻，筛选阳性植株，对t0代阳性植株苗期叶片进行xoo接种，运用共聚焦显微镜观察植株叶片，发现xoo侵染阳性植株可诱导yfp表达，其中，yfp表达是指可以使重组载体内的yfp相关标签序列成功翻译形成黄色荧光蛋白，并可在水稻叶片组织内观察到黄色荧光信号，表明该启动子序列受xoo高度诱导，证明了启动子具有xoo诱导启动子的表达活性与特征。

11、(2)本专利技术的启动子具有病原物(xoo)诱导启动子的表达活性与特征，并可以作为病原物诱导型表达启动子应用于水稻基因工程研究中。

12、(3)本专利技术启动子受水稻白叶枯病菌强烈诱导，在该启动子后添加相关抗病基因构建载体并由农杆菌介导形成的转基因植株，可以实现水稻对水稻白叶枯病的抗性表征，从而增加水稻稻粒品质与产量。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种水稻Os04g0650800基因启动子，其特征在于：所述水稻Os04g0650800基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.如权利要求1所述的启动子，其特征在于：扩增水稻Os04g0650800基因启动子的引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。

3.一种含有权利要求1所述水稻Os04g0650800基因启动子的重组载体。

4.如权利要求3所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体为SEQ ID No.1所示水稻Os04g0650800基因启动子与限制性内切酶BamH I、Hind III酶切后的pRHEcYFP质粒通过同源重组酶连接所得。

5.权利要求1或2所述的水稻Os04g0650800基因启动子在转基因水稻响应白叶枯病菌诱导目的基因表达中的应用。

【技术特征摘要】

1.一种水稻os04g0650800基因启动子，其特征在于：所述水稻os04g0650800基因启动子的核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.如权利要求1所述的启动子，其特征在于：扩增水稻os04g0650800基因启动子的引物的核苷酸序列如seq id no.2和seq id no.3所示。

3.一种含有权利要求1所述水稻os04g0650800...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔维文，杨晨希，丁立，王益平，吴莹莹，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：

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