【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物发酵领域，特别涉及一种苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法。
技术介绍
1、在农业领域，苏云金芽孢杆菌(bacillus thuringiensis，bt)的一些株系通过产生特定的抗生素或酶，可以有效地对付一些害虫或者病害，如蚜虫、白粉病等。这种微生物杀虫剂的优点是环保、无害对人体和有益昆虫，可降解，不会积累在环境中，最终形成了一种绿色、无害的农业防治方式。此外，由于微生物杀虫剂的这些特性，使得它们在避免害虫对化学杀虫剂产生抗药性的情况下具有重要价值。多样化的农业防治手段可以更好地维护生态平衡，保护作物的生长。
2、苏云金芽孢杆菌对人类和非目标生物的影响非常小，因为人类和非目标生物的肠道环境(酸性环境)无法使晶体蛋白活化，而且他们的肠道上皮细胞上也没有毒素可以结合的受体，因此，他们不会受到毒素的影响。这使得苏云金芽孢杆菌成为一种理想的生物农药。
3、苏云金芽孢杆菌kurstaki引进自俄罗斯，有广泛的抑菌谱和高抑制率。其发酵液及采用其发酵液制备制剂用于防治鳞翅目类害虫，具有良好的效果。
4、在苏云金芽孢杆菌的发酵液中，芽孢量及蛋白含量与防治鳞翅目类害虫的效果相关，芽孢量、蛋白量越高，效果越好。
5、现有的苏云金芽孢杆菌发酵工艺，有的生产厂家采用将苏云金芽孢杆菌种子液转接入带搅拌的发酵罐中发酵培养，下罐后得发酵液。
6、苏云金芽孢杆菌的搅拌式发酵存在以下缺陷：能耗较大，能耗(空气供氧、蒸汽消毒、搅拌电耗、循环水冷却)占产品总成本的20％～30％，其中搅拌又占
7、因此，如何降低能耗又不降低发酵液的效果成为行业亟需解决的问题
8、上述
技术介绍
是为了便于理解本专利技术，并非是申请本专利技术之前已向普通公众公开的公知技术。
技术实现思路
1、针对上述缺陷，本专利技术提供一种苏云金芽孢杆菌气升式发酵方法，该方法在发酵过程中，无需搅拌也可获得与搅拌下效果相同或更好的发酵液。
2、技术方案是：一种苏云金芽孢杆菌气升式发酵方法，发酵过程中无搅拌，包括以下步骤：
3、s1,取苏云金芽孢杆菌种子液和发酵培养基，接种量为0.5～10wt％；
4、s2,将种子液和发酵培养基加入气升式发酵罐，装料系数60～80％，通气量0.6～0.8vvm，消泡剂自动控制消泡，ph6.5～7.5，28～31℃发酵培养50～70h；
5、s3，下罐得苏云金芽孢杆菌发酵液。
6、进一步地，s2中，发酵培养进行到ph反弹时，连续补入30～60wt％葡萄糖溶液用于控制溶氧在20～30％。
7、进一步地，s2中，补入50wt％葡萄糖溶液到离发酵终点5～15h时，停止补入30～60wt％葡萄糖溶液。
8、进一步地，所述发酵培养基包括：
9、酵母粉1～10wt％，葡萄糖1～5wt％，磷酸二氢钾0.1～0.5wt％，硫酸镁0.08～0.2wt％，碳酸钙0.1～0.5wt％，氯化钠0.01～0.05wt％，泡敌0.02～0.08wt％，余量为水。
10、进一步地，所述发酵培养基包括：
11、大豆蛋白粉1～10wt％，糖蜜1～5wt％，磷酸二氢钾0.1～0.5wt％，硫酸镁0.08～0.2wt％，碳酸钙0.1～0.5wt％，氯化钠0.01～0.05wt％，泡敌0.02～0.08wt％，余量为水。
12、进一步地，s1中，苏云金芽孢杆菌种子液主要由以下步骤制成：
13、s11，苏云金芽孢杆菌kurstaki在载有lb培养基的平板上进行活化，28～31℃培养12～36h；
14、s12，挑取单菌落接种于装有摇瓶培养基的的摇瓶，摇床28～31℃、100～500r/min培养12～36h,形成种子液；
15、s13，种子液接种于装有种子罐培养基的种子罐中，28～31℃、100～500r/min培养12～36h h，形成发酵前种子液，装料系数60～80％，实消20～50min，接种量0.5～10wt％，通气量为0.6～0.7vvm。
16、进一步地，s11中，lb培养基成分为，每1000ml蒸馏水中，胰蛋白胨5～15g，酵母提取物2～8g，氯化钠5～15g，琼脂粉10～20g；s12中，摇瓶培养基成分为：胰蛋白胨0.5～1.5wt％，酵母提取物0.2～0.8wt％，氯化钠0.5～1.5wt％，余量为水；s13中，种子培养基成分为：酵母粉1～5wt％，葡萄糖1～3wt％，磷酸二氢钾0.1～0.3wt％，硫酸镁0.1～0.2wt％，碳酸钙0.2～0.4wt％，氯化钠0.02～0.04wt％，泡敌0.02～0.08wt％，余量为水。
17、进一步地，所述苏云金芽孢杆菌为苏云金芽孢杆菌kurstaki。
18、进一步地，所述气升式发酵罐包括罐体，罐体上开设有进料口、出料口和补料及空气通过口，罐体围成罐体内腔，进料口开设在罐体顶部，出料口开设在罐体底部，补料及空气通过口位于罐体下部，补料及空气通过口连接有总管，总管穿过罐体，一部分位于罐体内腔内，其余部分位于罐体内腔外，总管位于罐体内腔外的端头连通有进气管和补料管，补料管上安装有补料阀和补料杯，进气管上安装有进气阀，罐体内腔内安装内筒，内筒的顶部开有上开口，底部开有下开口，内筒围成内筒内腔，总管位于罐体内腔的部分穿过内筒，位于内筒内腔内，其端头开口向下，与分布器连通，分布器底部下方设置有第一推动单元，分布器的侧壁上连接有3个以上水平分配管，该3个以上水平分配管沿圆周均布，每一水平分配管的上方设置有2个以上第二推动单元，第一推动单元位于内筒底部的下方，第二推动单元位于内筒内腔内，第一推动单元与分布器通过连接管连通，第二推动单元与水平分配管通过连接管连通，第一推动单元的推动进口在上，推动出口在下，第二推动单元的推动进口在下，推动出口在上。
19、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
20、为了节省能耗，本专利技术采用气升罐进行发酵工艺，在此基础上，为了获得与搅拌式发酵罐同样的发酵效果，改变了发酵的工艺参数及工艺条件，最终实现了无需搅拌即同搅拌式发酵罐同样的发酵效果甚至更好地效果。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，发酵过程中无搅拌，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，S2中，发酵培养进行到pH反弹时，连续补入30～60wt％葡萄糖溶液用于控制溶氧在20～30％。
3.根据权利要求2所述的，其特征在于，S2中，补入50wt％葡萄糖溶液到离发酵终点5～15h时，停止补入30～60wt％葡萄糖溶液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基包括：
5.根据权利要求1-3任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基包括：
6.根据权利要求1-5任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，S1中，苏云金芽孢杆菌种子液主要由以下步骤制成：
7.根据权利要求1-6任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，S11中，LB培养基成分为，每1000ml蒸馏水中，胰蛋白胨5～15g，酵母提取物2～8g，氯化钠5～15g，琼脂粉10～20g；
8.根据权利要求1-7任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，所述苏云金芽孢杆菌为苏云金芽孢杆菌kurstaki。
9.根据权利要求1-8任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，所述气升式发酵罐包括罐体，罐体上开设有进料口、出料口和补料及空气通过口，罐体围成罐体内腔，进料口开设在罐体顶部，出料口开设在罐体底部，补料及空气通过口位于罐体下部，补料及空气通过口连接有总管，总管穿过罐体，一部分位于罐体内腔内，其余部分位于罐体内腔外，总管位于罐体内腔外的端头连通有进气管和补料管，补料管上安装有补料阀和补料杯，进气管上安装有进气阀，罐体内腔内安装内筒，内筒的顶部开有上开口，底部开有下开口，内筒围成内筒内腔，总管位于罐体内腔的部分穿过内筒，位于内筒内腔内，其端头开口向下，与分布器连通，分布器底部下方设置有第一推动单元，分布器的侧壁上连接有3个以上水平分配管，该3个以上水平分配管沿圆周均布，每一水平分配管的上方设置有2个以上第二推动单元，第一推动单元位于内筒底部的下方，第二推动单元位于内筒内腔内，第一推动单元与分布器通过连接管连通，第二推动单元与水平分配管通过连接管连通，第一推动单元的推动进口在上，推动出口在下，第二推动单元的推动进口在下，推动出口在上。
...【技术特征摘要】
1.一种苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，发酵过程中无搅拌，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，s2中，发酵培养进行到ph反弹时，连续补入30～60wt％葡萄糖溶液用于控制溶氧在20～30％。
3.根据权利要求2所述的，其特征在于，s2中，补入50wt％葡萄糖溶液到离发酵终点5～15h时，停止补入30～60wt％葡萄糖溶液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基包括：
5.根据权利要求1-3任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基包括：
6.根据权利要求1-5任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，s1中，苏云金芽孢杆菌种子液主要由以下步骤制成：
7.根据权利要求1-6任一项所述的苏云金芽孢杆菌的气升式发酵方法，其特征在于，s11中，lb培养基成分为，每1000ml蒸馏水中，胰蛋白胨5～15g，酵母提取物2～8g，氯化钠5～15g，琼脂粉10～20g；s12中，摇瓶培养基成分为：胰蛋白胨0.5～1.5wt％，酵母提取物0.2～0.8wt％，氯化钠0.5～1.5wt％，余量为水；s13中，种子培养基成分为：酵母粉1～5wt％，葡萄糖1～3wt％，磷酸二氢钾0.1～0.3wt％，硫酸镁0....
【专利技术属性】
技术研发人员：黄浩，王敏，熊仁科，左建英，刘宝余，潘浪，王一硕，
申请(专利权)人：四川龙蟒福生科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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