【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，涉及干细胞制剂，具体涉及一种脐带间充质干细胞制剂及其在治疗肝脏疾病的用途。
技术介绍
1、肝纤维化(hepatic fibrosis)是指肝脏内弥漫性细胞外基质(特别是胶原)过度沉积。肝纤维化是肝脏疾病治疗领域的一大难题，它不是一个独立的疾病，而是许多慢性肝脏疾病均可引起肝纤维化，其病因大致可分为感染性(慢性乙型、丙型和丁型病毒性肝炎，血汲虫病等)，先天性代谢缺陷(肝豆状核变性、血色病、α1-抗胰蛋白酶缺乏症等)及化学代谢缺陷(慢性酒精性肝病、慢性药物性肝病)及自身免疫性肝炎、原发性肝汁性肝硬化和原发性硬化性胆管炎等。
2、肝纤维化的病理改变表现为肝脏细胞外基质合成增多，降解减少。如果治疗不当主要可通过两大危害形成肝硬化：一是由于肝组织结构的破坏，使肝内血管受压扭曲、闭锁或动脉与静脉之间出现“短路”吻合，造成门静脉系统血管阻力增大，形成门静脉高压，导致脾肿大、腹水生成和胃底食管静脉曲张，有上消化道曲张静脉破裂出血的潜在危险；二是正常肝细胞之间的血液微循环通道因纤维组织成分的沉积而造成循环障碍，影响肝细胞的血液供应，使因炎症受损的肝细胞不易修复甚至加重损伤，直至功能正常的肝细胞愈来愈少，最后导致肝功能衰竭。
3、间充质干细胞具有自我更新、多向分化和免疫调节的特性，在治疗肝脏疾病方面已表现出良好疗效，受到各国研究学者的重视。脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells，简称huc-mscs)是一类存在于新生儿脐带组织中的多能干细
4、抗肝纤维化的主流药物包括降低肝星状细胞(hepatic stellate cell，hsc)增殖与活化药物、作用于基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，mmp)/基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase，timp)的药物、抑制炎症反应与调节免疫反应的药物、氧化应激的药物、靶向抗纤维化药物、基因治疗、以及中药制剂等。虽然抗肝纤维化的药物种类繁多，但仍缺少特异性强、疗效佳的针对性药物，抗肝纤维化的药物研发之路仍然漫长。
5、g蛋白偶联受体55(gpr55)是近年来在肝脏疾病研究中逐渐受到关注的一个调节因子。有研究表明gpr55与非酒精性脂肪性肝病(nafld)的病理生理学机制有关(姜仲春,谢智钦,唐才喜,fondevila mf,fernandez u,gonzalez-rellan mj.l-α-溶血磷脂酰肌醇/gpr55系统诱导非酒精性脂肪变性和脂肪性肝炎的发生[j].临床肝胆病杂志,2020)。gpr55与肝脏脂质代谢、炎症反应和纤维化过程也关系密切。在治疗肝脏炎症和纤维化方面，科学家们发现了一种环肽p1-1，这种肽能拮抗gpr55，有效抑制肝星状细胞中的胶原蛋白分泌。p1-1通过减少活性氧(ros)的产生、缓解内质网(er)应激以及抑制线粒体相关的肝细胞凋亡，从而改善了急性肝脏炎症和纤维化(zihan shi etal.discovery of novel peptideantagonists targeting gpr55 for liver inflammation and fibrosis.journal ofmedicinal chemistry 2024)，这项研究验证了gpr55能够作为治疗肝纤维化的有效靶点。
6、基于此，本专利技术旨在提供一种有效的制剂，以脐带间充质干细胞和gpr55肽结合物作为有效成分，为肝纤维化的临床治疗提供有效保障。
技术实现思路
1、基于现有技术中存在的不足，本专利技术提供一种脐带间充质干细胞制剂及其在治疗肝脏疾病的用途，具体的，提供在治疗肝纤维化疾病中的用途。
2、为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：
3、第一方面，本专利技术提供一种脐带间充质干细胞组合物，包含以下活性组分：第3～6代的脐带间充质干细胞，以及gpr55肽结合物。
4、进一步的，所述脐带间充质干细胞与gpr55肽结合物的质量比为1:(1-3)。
5、进一步的，所述gpr55肽结合物的氨基酸序列选自ckknsptlc(seq id no.1)，ckkntptqc(seq id no.2)或ckknsptgc(seq id no.3)。
6、进一步的，所述脐带间充质干细胞的分离方法包括如下步骤：
7、s1、取新鲜的人脐带8-12cm，用pbs漂洗，除去残留血液和杂质；
8、s2、将脐带剪成2～3cm的小段，再次用pbs漂洗，纵行剖开脐带，剥离华通氏胶；
9、s3、将剥离的华通氏胶剪成1mm3的组织碎块，置于含有培养液的培养瓶中，于37℃、5％co2的培养箱中静置培养；所述培养瓶预先用多聚赖氨酸包被；所述培养液为添加了10～12％ fbs、100u/ml青霉素、100mg/l链霉素的dmem培养基；
10、s4、倒置显微镜每天观察细胞生长情况，5～7天后首次全换液，此后每2～3天进行半换液；待细胞生长至融合度为80～90％时，消化传代，并接种至含有培养液的培养瓶中，待细胞再次生长至融合度为80％时，即得第1代的脐带间充质干细胞。
11、将第1代的脐带间充质干细胞用0.25％胰蛋白酶消化传代，并接种至含有培养液的培养瓶中，待细胞再次生长至融合度为80％时，即得第2代的脐带间充质干细胞；采用前述相同的培养步骤即可依次得到第3～6代的脐带间充质干细胞。
12、第二方面，本专利技术提供一种脐带间充质干细胞组合物在制备治疗肝脏疾病的药物中的用途。
13、进一步的，所述脐带间充质干细胞组合物，包含以下活性组分：第3～6代的脐带间充质干细胞，以及gpr55肽结合物。
14、进一步的，所述脐带间充质干细胞与gpr55肽结合物的质量比为1:(1-3)。
15、进一步的，所述gpr55肽结合物的氨基酸序列选自ckknsptlc(seq id no.1)，ckkntptqc(seq id no.2)或ckknsptgc(seq id no.3)。
16、进一步的，所述肝脏疾病为肝纤维化。
17、第三方面，本专利技术提供一种脐带间充本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种脐带间充质干细胞组合物，包含以下活性组分：第3～6代的脐带间充质干细胞，以及GPR55肽结合物。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述脐带间充质干细胞与GPR55肽结合物的质量比为1:(1-3)。
3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述脐带间充质干细胞与GPR55肽结合物的质量比为1:2。
4.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述GPR55肽结合物的氨基酸序列选自CKKNSPTLC(SEQ ID NO.1)，CKKNTPTQC(SEQ ID NO.2)或CKKNSPTGC(SEQ ID NO.3)。
5.一种脐带间充质干细胞制剂，包括：第3～6代的脐带间充质干细胞，GPR55肽结合物，以及药学上可接受的辅料。
6.如权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述脐带间充质干细胞与GPR55肽结合物的质量比为1:(1-3)。
7.如权利要求6所述的制剂，其特征在于，所述GPR55肽结合物的氨基酸序列选自CKKNSPTLC(SEQ ID NO.1)，CKKNTPTQC(SEQ ID NO.
8.如权利要求1所述的脐带间充质干细胞组合物在制备治疗肝脏疾病的药物中的用途。
9.如权利要求5所述的脐带间充质干细胞制剂在制备治疗肝脏疾病的药物中的用途。
10.如权利要求8或9所述的应用，其特征在于，所述肝脏疾病为肝纤维化。
...【技术特征摘要】
1.一种脐带间充质干细胞组合物，包含以下活性组分：第3～6代的脐带间充质干细胞，以及gpr55肽结合物。
2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述脐带间充质干细胞与gpr55肽结合物的质量比为1:(1-3)。
3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述脐带间充质干细胞与gpr55肽结合物的质量比为1:2。
4.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述gpr55肽结合物的氨基酸序列选自ckknsptlc(seq id no.1)，ckkntptqc(seq id no.2)或ckknsptgc(seq id no.3)。
5.一种脐带间充质干细胞制剂，包括：第3～6代的脐带间充质干细胞，gp...
【专利技术属性】
技术研发人员：廖衍庆，廖其杰，刘建风，
申请(专利权)人：广州飞来爱生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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