【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于代谢组学，具体涉及一种椎间盘终板代谢组学样品前处理方法。
技术介绍
1、椎间盘的终板结构，起到连接椎体骨质与椎间盘软组织的桥梁作用，更是椎间盘营养供给的核心部件。终板由终板软骨细胞和细胞外基质构成，内有少量毛细血管分布，主要依靠孔隙渗透完成营养与代谢物的交换，其退变被认为是椎间盘退变的始动因素之一。
2、代谢组学是系统生物学的重要组成部分，主要研究代谢产物与生物体的生理或病理变化之间的关系。组织代谢组学是代谢组学的重要组成部分，与其他体液组学相比，更能清楚了解病变组织的病理生理变化。在基于液质联用的组织代谢组学分析中，样品前处理是影响分析结果质量的重要环节，但目前尚缺乏理想的椎间盘终板代谢组学样品前处理方法。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种椎间盘终板代谢组学样品前处理方法。本专利技术基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱联用(ultra-high performance liquid chromatography-quadrupoletime-of-flight massspectrometry，uplc-qtof-ms)技术建立椎间盘终板代谢组学样品前处理方法，可以从代谢角度发现椎间盘退变的生物标志物，能为其早期诊断提供有效的方法，并为临床靶向治疗奠定一定的基础。
2、为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：一种椎间盘终板代谢组学样品前处理方法，该方法包括以下步骤：
4、s2、将s1的研磨液在-80℃的条件下孵化沉淀蛋白2h，然后用冷藏离心机以14,000g、4℃离心20min，将上清液转移到新的ep管中，氮气吹干，剩余固体残余物；
5、s3、将s2得到的固体残余物用体积分数为70％的甲醇溶液复溶，涡旋混匀，然后以14,000g离心20min，收集上清液，即为处理后的椎间盘终板代谢组学研究样品；
6、s4、将s3得到的处理后的椎间盘终板代谢组学研究样品加入到进样瓶中，进行uplc-qtof-ms分析和数据处理。
7、优选地，s1所述椎间盘终板组织与体积分数为80％的甲醇溶液的比例为1mg：9μl。
8、优选地，s1所述研磨参数为1200rpm，运行50s，停止25s，共5个循环。
9、本专利技术由于采用了以上技术方案，具有显著的技术效果：
10、1、本专利技术基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱联用(uplc-qtof-ms)技术建立了非靶向椎间盘终板代谢组学样品前处理方法，为椎间盘终板样品前处理提供一种新的方法，该方法可以从代谢角度发现椎间盘退变的生物标志物，有助于后期生物标志物的验证及相应检测试剂盒的开发，能为椎间盘退变的早期诊断提供有效方法，并为临床靶向治疗奠定基础。
11、2、本专利技术的椎间盘终板代谢组学样品前处理方法操作简单易行，溶液多次经高速离心，去除了蛋白质等大颗粒物质对色谱柱的影响，不经滤膜过滤，可直接进行色谱分离和检测。
12、下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步详细说明。
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1.一种椎间盘终板代谢组学样品前处理方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种椎间盘终板代谢组学样品前处理方法，其特征在于，S1所述椎间盘终板组织与体积分数为80％的甲醇溶液的比例为1mg：9μL。
3.根据权利要求1所述的一种椎间盘终板代谢组学样品前处理方法，其特征在于，S1所述研磨参数为1200rpm，运行50s，停止25s，共5个循环。
【技术特征摘要】
1.一种椎间盘终板代谢组学样品前处理方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种椎间盘终板代谢组学样品前处理方法，其特征在于，s1所述椎间盘终板组织与体积分数为8...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡学昱，周洁，姚洲，梁卓文，赵文君，马阳光，黄培培，解放，叶斌，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：
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