【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于疾病模型的构建方法，具体涉及一种肾纤维化模型的构建方法及其应用。
技术介绍
1、肾纤维化是指肾脏组织中胶原纤维异常增生和沉积，导致肾脏结构和功能逐渐丧失的过程。这一过程通常是由于肾小管上皮细胞损伤和炎症反应，炎症因子刺激成纤维细胞活化，过度产生胶原蛋白和其他基质成分，从而引起肾脏间质和肾小管周围结缔组织增生。肾纤维化可能由多种因素引起，包括创伤、感染、炎症、血循环障碍，以及免疫反应等多种致病因素刺激，导致固有细胞受损，发展到后期出现大量胶原沉积和积聚，造成肾实质逐渐硬化，形成瘢痕，直至肾脏完全丧失脏器功能。
2、建立适当的肾纤维化模型是研发治疗方案的首要任务。目前肾纤维化造模的方式主要有：
3、①单侧输尿管梗阻模型(unilateral ureteral obstruction，uuo)，是通过结扎大鼠的一侧输尿管来阻止尿液流动，从而引起肾小管间质的损伤和纤维化。这种模型可以快速产生肾间质纤维化，适合研究肾纤维化的发病机制和治疗方法。
4、②环孢素a诱导模型：环孢素a(cyclosporine a，csa)是一种免疫抑制剂，长期使用会导致肾毒性和肾间质纤维化。通过皮下注射csa，可以在动物体内诱导出类似的肾纤维化过程。这种模型主要用于研究csa引起的肾纤维化的作用机制，以及寻找预防csa肾毒性的新药物。
5、③庆大霉素诱导模型：庆大霉素是一种抗生素，可以通过注射庆大霉素来诱导肾小管间质纤维化。这种模型可以模拟由于药物引起的肾损伤，用于研究药物肾病的机制。
7、上述这些模型各有优缺点，选择哪种模型取决于研究的目的和具体要求。例如，uuo模型虽然简单易行，但它是一种急性机械性损伤，可能不适用于所有类型的肾小管和间质损伤及其纤维化的情况。而环孢素a诱导模型虽然可以模拟真实的肾毒性过程，但成本较高，且存在肝脏毒性，限制了其应用范围。
8、而且，实验动物造模在医学研究中扮演着重要角色，但它也存在一些局限性包括：
9、①物种差异：尽管动物模型在人类疾病及药物的研究中起到了不可或缺的作用，但由于种属差异，动物模型的反应可能与人类疾病及证候的临床表现不尽相同。
10、②模型的可靠性：动物模型可能无法完全模拟人类疾病的复杂性，如人类疾病的遗传因素、病理生理机制以及疾病间的联系。
11、③伦理和道德问题：使用动物模型进行实验研究时，必须考虑动物福利和避免不必要的痛苦。这意味着在进行动物实验时，必须遵循伦理准则和动物保护法规，确保实验在道德和法律的范围内进行。
12、④实验结果的外推性：通过动物模型得到的结果外推到其他物种上可能不可靠，尤其是在药物和化学物质的安全性测试中。此外，通过动物实验证实生物医学中的某些理论也可能是不可靠的。
13、⑤实验的复杂性和成本：有些动物模型的构建过程复杂，需要大量的动物和资源，如慢性社交挫败模型就需要使用大量的动物，造成实验设施及人力资源的消耗。
14、⑥实验结果的误导性：在动物试验中观察到的一些异常现象可能是供试动物物种本身所特有的正常生物学特性反应，也可能是非自然手段所引起的变化，或是由于实验室环境的应激反应所致。这种异常性与人类的病理变化可能毫无关联。
15、⑦实验的重复性和一致性：动物模型的实验结果可能受到个体差异、实验条件、饲养管理等多种因素的影响，导致实验结果的重复性和一致性难以保证。
16、⑧实验的替代性：尽管动物模型在某些研究中不可或缺，但在可能的情况下，应当寻求替代方法，如使用体外细胞模型、计算机模拟等，以减少对动物的依赖。
17、肾脏类器官是由多种细胞类型组成的三维构建体，它们在结构和功能上模拟了人体真实的肾脏。这些模型不仅能够在体外环境中进行实验，避免了动物模型的伦理问题，还能够快速方便地被用于开展实验，加速了研究进程。近年来，肾脏类器官的研究取得了显著进展。研究者们已经能够在体外培养出具有一定肾脏功能的类器官，这些器官包含了类似肾单位的结构，如肾小球、肾小管、集合管等。这些类器官不仅在构建肾脏疾病模型中展现出潜力，还能用于药物筛选和评估药物的肾毒性。
技术实现思路
1、本专利技术第一方面的目的，在于提供trpm3激动剂在构建纤维化模型或制备构建纤维化模型的产品中的应用。
2、本专利技术第二方面的目的，在于提供trpm3激动剂在构建肾小管损伤模型或制备构建肾小管损伤模型的产品中的应用。
3、本专利技术第三方面的目的，在于提供一种肾纤维化和/或肾小管损伤模型的构建方法。
4、本专利技术第四方面的目的，在于一种肾纤维化和/或肾小管损伤模型。
5、本专利技术第五方面的目的，在于提供本专利技术第四方面的肾纤维化和/或肾小管损伤模型的应用。
6、本专利技术第六方面的目的，在于提供一种用于构建肾纤维化和/或肾小管损伤模型的产品。
7、本专利技术第七方面的目的，在于提供一种肾脏类器官的构建方法。
8、本专利技术所采取的技术方案是：
9、本专利技术的第一方面，提供trpm3激动剂在构建纤维化模型或制备构建纤维化模型的产品中的应用。
10、在本专利技术的一些实施方式中，所述纤维化为肾脏纤维化。
11、在本专利技术的一些实施方式中，所述trpm3激动剂包括cim0216或其药学上可接受的盐。
12、本专利技术的第二方面，提供trpm3激动剂在构建肾小管损伤模型或制备构建肾小管损伤模型的产品中的应用。
13、在本专利技术的一些实施方式中，所述肾小管损伤为肾脏类器官肾小管损伤
14、在本专利技术的一些实施方式中，所述trpm3激动剂包括cim0216或其药学上可接受的盐。
15、本专利技术的第三方面，提供一种肾纤维化和/或肾小管损伤模型的构建方法，包括以下步骤：使用促纤维化药物诱导肾脏类器官形成肾脏类器官纤维化和/或肾小管损伤。
16、在本专利技术的一些实施方式中，所述促纤维化药物为trpm3激动剂；所述trpm3激动剂包括cim0216或其药学上可接受的盐。
17、在本专利技术的一些实施方式中，所述trpm3激动剂的工作浓度为50～400μm。
18、在本专利技术的一些实施方式中，所述诱导的时间为24～72h。
19、在本专利技术的一些实施方式中，所述肾脏类器的构建方法包括以下步骤：
20、s1：将人多能干细胞置于第一培养基中培养3～6天；
21、s2：使用第二培养基替换第一培养基，培养1～3天；
22、s3：使用第一培养基替换第二培养基，培养0.5～2h；
23、s4：使用第二培养基替换第一培养基，培养4～6天；
24、s5：使用基础培养基替换第三本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.TRPM3激动剂在构建纤维化模型或制备构建纤维化模型的产品中的应用；优选地，所述纤维化为肾脏纤维化。
2.TRPM3激动剂在构建肾小管损伤模型或制备构建肾小管损伤模型的产品中的应用；
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述TRPM3激动剂包括CIM0216或其药学上可接受的盐。
4.一种肾纤维化和/或肾小管损伤模型的构建方法，包括以下步骤：使用促纤维化药物诱导肾脏类器官形成肾脏类器官纤维化和/或肾小管损伤。
5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述促纤维化药物为TRPM3激动剂；所述TRPM3激动剂包括CIM0216或其药学上可接受的盐；
6.一种肾纤维化和/或肾小管损伤模型，所述肾纤维化和/或肾小管模型由权利要求4或5所述的构建方法构建得到。
7.权利要求6所述的肾纤维化和/或肾小管损伤模型在研发和筛选治疗肾纤维化和/或肾小管疾病的药物中的应用。
8.一种产品，所述产品包括肾脏类器官培养基和促纤维化药物；所述促纤维化药物为TRPM3激动剂。
9.根据权利要求
10.一种肾脏类器官的构建方法，包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.trpm3激动剂在构建纤维化模型或制备构建纤维化模型的产品中的应用；优选地，所述纤维化为肾脏纤维化。
2.trpm3激动剂在构建肾小管损伤模型或制备构建肾小管损伤模型的产品中的应用；
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述trpm3激动剂包括cim0216或其药学上可接受的盐。
4.一种肾纤维化和/或肾小管损伤模型的构建方法，包括以下步骤：使用促纤维化药物诱导肾脏类器官形成肾脏类器官纤维化和/或肾小管损伤。
5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述促纤维化药物为trpm3激动剂；所述trpm3激动剂包括cim0216或其...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄健，吴子怡，郑立新，王恒，李珺，蓝艳淑，俞怡宁，
申请(专利权)人：深圳华津生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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