【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分子生物学检测领域，具体是涉及一种用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的试剂盒。
技术介绍
1、牛疱疹病毒1型(bhv-1)属于疱疹病毒科，甲疱疹病毒亚科，水痘病毒属，是导致传染性牛呼吸道疾病或流产的关键病原体，可引起牛的一系列疾病综合征，包括牛呼吸系统疾病(brd)、生殖道疾病外阴阴道炎和流产、结膜炎和严重新生儿疾病，对畜牧业造成威胁和重大经济损失。目前使用灭活或减毒疫苗对抗牛疱疹病毒1型(bhv-1)。然而，它们对野生型牛疱疹病毒1型(bhv-1)感染只有部分保护作用。
2、牛疱疹病毒1型(bhv-1)分为1.1和1.2型，不同基因型的bhv-1病毒感染后的症状类似，但流行病学数据表明牛疱疹病毒1型(bhv-1)1.1毒株和牛疱疹病毒1型(bhv-1)1.2毒株的临床效果不同，因此在进行疫苗免疫前，对bhv-1病毒基因型的鉴别尤为重要。现有技术中，商品化elisa试剂盒可用于确认bhv-1感染，但无法区分其为何种基因型感染，而采用限制性酶切和单克隆抗体(mab)结合进行区分的方法操作繁琐，成本高，因此亟需开发一种操作简便、快速、准确的鉴别牛疱疹病毒1型基因型的方法。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术创造旨在克服现有技术中的缺陷，提供一种鉴别牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的双重pcr检测方法。
2、为实现以上技术目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、一种用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的引物组，所述引物组包含以下引
4、引物ibrv-1.1-f的核苷酸序列如seq id no：1所示；
5、引物ibrv-1.1-r的核苷酸序列如seq id no：2所示；
6、引物ibrv-1.2-f的核苷酸序列如seq id no：3所示；
7、引物ibrv-1.2-r的核苷酸序列如seq id no：4所示。
8、一种用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的试剂盒，所述试剂盒包含如下组分：
9、引物ibrv-1.1-f的核苷酸序列如seq id no：1所示；
10、引物ibrv-1.1-r的核苷酸序列如seq id no：2所示；
11、引物ibrv-1.2-f的核苷酸序列如seq id no：3所示；
12、引物ibrv-1.2-r的核苷酸序列如seq id no：4所示；
13、pcr 10×ex taq bufferr(mg2+plus)、dntp mixture、dna模板、ddh2o。
14、进一步的，所述试剂盒的pcr扩增条件为：95℃预变性5min；95℃20s，56℃30s，72℃40s，共35个循环，最后72℃延伸10min。
15、所述用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的试剂盒，在鉴别牛疱疹病毒1.1和1.2基因型中的应用。
16、相对于现有技术，本专利技术具有以下优势：
17、本试剂盒检测灵敏度高，特异性好，通过对牛呼吸道合胞体病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、牛冠状病毒等核酸样品检测，只有牛疱疹病毒1型(bhv-1)阳性模板扩增出预期条带。本试剂盒检测重复性好，通过分别对3种混合和单一模板进行三次重复性检测，条带均得到一致性结果。
18、本专利技术提供的检测方法可进行定性检测，快速分型，方法流程简单，易于操作，可快速掌握，用该专利技术方法对牛疱疹病毒1型(bhv-1)的1.1型dna、牛疱疹病毒1型(bhv-1)的1.2型dna及混合其dna作为模板进行扩增来验证本方法的准确性，同时临床收集的60份鼻拭子和10份牛肺用该体系进行检测，均得到预期结果。
19、本方法能同时鉴别检测牛疱疹病毒1型(bhv-1)的1.1和1.2基因型，对相关病毒检验检疫技术的研究有实际的借鉴意义。通过此法可了解在家畜群里牛疱疹病毒1型的基因型信息，同时对部分地区饲养的奶牛进行病毒分子流行病学的研究，以此了解疾病流行情况，为预防和控制牛牛疱疹病毒病提供数据和技术支持。该方法能够广泛应用于出入境检验检疫部门、畜牧兽医部门和养殖单位，为疫病的有效防控具有重要意义。
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1.一种用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的引物组，其特征在于，所述引物组包含以下引物：
2.一种用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含如下组分：
3.根据权利要求2所述的用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的PCR扩增条件为：95℃预变性5min；95℃20s，56℃30s，72℃40s，共35个循环，最后72℃延伸10min。
4.一种如权利要求2所述用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的试剂盒，在鉴别牛疱疹病毒1.1和1.2基因型中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的引物组，其特征在于，所述引物组包含以下引物：
2.一种用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含如下组分：
3.根据权利要求2所述的用于检测牛疱疹病毒1.1和1.2基因型的试剂盒...
【专利技术属性】
技术研发人员：白悦，车艳杰，李守军，王显兵，蒋珊珊，吕茂杰，李睿，刘海霞，
申请(专利权)人：天津瑞普生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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