本发明专利技术公开了一种CXCR4靶向多肽及其制备方法和应用，所述CXCR4靶向多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术设计并合成了一系列靶向趋化因子受体4（CXCR4）的多肽，通过SPR测定了所发现多肽与CXCR4蛋白的亲和力。本发明专利技术所述多肽能和多种肿瘤细胞特异性结合，优选黑色素瘤、淋巴癌、乳腺癌、肺癌、结直肠癌、脑胶质瘤、前列腺癌等。本发明专利技术也涉及用于制备所述多肽的方法；利用所述多肽直接或者通过配体偶联荧光染料或放射性核素，实现对肿瘤的治疗或诊断的用途。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种cxcr4靶向多肽及其制备方法和应用，属于多肽领域。
技术介绍
1、恶性肿瘤已经是全世界人类非正常死亡主要原因之一，对人类健康造成极大威胁。传统的肿瘤治疗方法主要包括手术、化疗、放疗等，但传统的治疗方法通常会给患者带来很大的毒副作用，增加患者的负担。
2、肿瘤靶向治疗在细胞分子水平上通过干扰与肿瘤细胞发生、恶化和转移相关的分子标志物，进而达到抑制肿瘤的方法。
3、通过干扰参与肿瘤细胞发生、发展和扩散相关的特殊分子，进而抑制肿瘤进展的治疗方法。肿瘤靶向治疗相对于传统治疗手段，对于肿瘤细胞选择性高、疗效好、副作用小，在治疗肿瘤方面有良好前景。目前研究者也在开发各种肿瘤靶向疗法。在多种靶向疗法之中，利用靶向多肽治疗肿瘤是比较理想的手段，具有以下优势：1）具有良好的穿透性，容易被肿瘤细胞摄取；2）血浆清除速度快、选择性高、亲和力高。3）易于化学合成，且免疫原性低，可避免单克隆抗体治疗的不足。因此，特异性靶向多肽是医学研究、临床应用和分子成像的理想且有吸引力的目标。
4、趋化因子是属于细胞因子超家族的低相对分子质量(8 000～10 000)的蛋白，是细胞在发育、动态平衡和免疫监测中发生迁移的关键调节因子。趋化因子参与调节多种生物过程例如血管生成、形态发生、自体免疫性、肿瘤生长和转移，其也引导各类细胞的迁移。趋化因子12(chemokine12,cxcl12)又称基质细胞源性因子-1(stromal cell derivedfactor-1,sdf-1)，属于趋化因子蛋白家族。
5、4型趋化因子受体（cxcr4）也称为融合素或cd184，是一种七次跨膜g蛋白偶联受体（gpcr），胞外区与配体结合后被激活。cxcr4在20多种人类肿瘤类型中过表达，包括卵巢癌、前列腺癌、食管癌、肺癌、黑色素瘤、神经母细胞瘤、肾细胞癌等。
6、cxcr4(cxc motif chemokine receptor 4)是cxcl12的特异性受体，二者结合后参与胚胎造血、器官发生、血管发生等胚胎生长发育以及炎症、组织免疫监测等一系列生理病理。cxcl12/cxcr4信号通路激活，可导致肿瘤增殖、血管生成、侵袭与迁移以及肿瘤耐药等一系列生物学过程。
7、目前对于肿瘤诊断均需要进行免疫组织化学(ihc)检测，然而，由于肿瘤组织时间和空间异质性较高，活检组织取样不均一，导致无法对肿瘤进行精准的病理诊断。因此，迫切需要可以反应活体精准诊断的标志物检测方法。
技术实现思路
1、专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题是提供了一种提供cxcr4靶向多肽及其制备方法和应用。
2、技术方案：为解决上述技术问题，本专利技术提供一种cxcr4靶向多肽，其氨基酸序列如下：
3、gly—gly—x1—x2—x3—x4—x5—x6—x7—x8（seq id no.1），或其药学上可接受的盐，
4、其中：
5、所述多肽中x1选自ala、pro、dval、dpro、hyp、oic、α-me-pro其中的一种，x2选自tyr、dtyr、ala、n-me-tyr其中的一种，x3选自arg、har、n2-me-arg、ala其中的一种，x4选自dval、ala其中的一种，x5选自gly、ala、β-ala、sar其中的一种，x6选自arg、ala、d-2-nal、har、n2-me-arg、pro其中的一种，x7选自2-nal、d-2-nal、ala、arg其中的一种，x8选自ala、pro其中的一种。
6、其中，所述cxcr4靶向多肽的氨基酸序列如seq id no.2~28任一条所示。
7、本专利技术还提供一种制备所述cxcr4靶向多肽的方法，所述方法包括如下具体步骤：
8、（1）将氨基酸偶联至rink amide mbha树脂，用dmf溶解fmoc保护的氨基酸并且采用fastmoc化学的hctu/diea方案活化；之后使用20%哌啶/dmf溶液脱去n末端的fmoc；然后，使用tfa/h2o/tis/苯甲醚组成的溶液，在室温下处理多肽，同时去掉侧链保护并将多肽从树脂上切下；之后，使用氮气吹干体系，使用甲基叔丁基醚洗涤两次，离心得到沉淀；
9、（2）依次将氨基酸逐个偶联至rink amide mbha 树脂，在偶联过程中hctu和fmoc保护的氨基酸被溶解在含有dipea的dmf中，每次偶联时间>1h；后进行脱保护流程：使用含哌啶的dmf溶液脱去fmoc基团；后在强酸的作用下反应2-3h脱去侧链保护基团，以质量份计，所述强酸包括tfa 90-95%、h2o 2-5%、tis 2-5%、edt 2%-5%。
10、本专利技术还提供一种分子探针，所述分子探针由荧光标记或放射性核素偶联所述cxcr4靶向多肽而成。
11、其中，所述荧光标记包括irdye800、cy5、cy7、icg、罗丹明、fitc中的一种或多种。
12、其中，所述荧光标记可通过nhs、edc、mal等点击化学方式进行标记。
13、其中，所述放射性核素选自18f，68ga，64cu，99mtc，90y，111in，125i,131i或177lu。
14、其中，所述放射性核素的螯合剂包括hynic、dota，nota 或dtpa及它们的衍生物。
15、其中，所述的放射性核素的配体包括三(羟甲基)甲基甘氨酸或间磺酸钠基三苯基膦。
16、本专利技术还提供所述的cxcr4靶向多肽或所述的分子探针在制备诊断以cxcr4过表达为特征的癌症的试剂或药物中的应用。
17、其中，所述以cxcr4过表达为特征的癌症包括黑色素瘤、淋巴癌、乳腺癌、宫颈癌、肺癌、结直肠癌、脑胶质瘤、前列腺癌、胰腺癌中的一种或多种。
18、更进一步地，所述癌症为黑色素瘤、乳腺癌、宫颈癌、肺癌、前列腺癌中的一种或多种。
19、本专利技术还提供所述的cxcr4靶向多肽或所述的分子探针在制备荧光成像或放射性显像试剂中的应用。
20、其中，所述显像制剂为放射性核素、放射性核素标记物、磁共振造影剂或分子影像制剂中的一种或多种。
21、其中，所述显像制剂还包括其药学上可接受的载体。例如plga聚合物、dendrimer树状大分子、水凝胶、胶束、脂质体或无机纳米颗粒等。
22、本专利技术还保护前文所述显像制剂在制备用于cxcr4阳性肿瘤显像诊断或手术导航精准切除的检测的药物中的用途。
23、所述阳性肿瘤为以cxcr4过表达为特征的所有肿瘤，例如黑色素瘤、淋巴癌、乳腺癌、宫颈癌、肺癌、结直肠癌、脑胶质瘤、前列腺癌、胰腺癌中的一种或多种。
24、本专利技术设计出了一类新型的cxcr4靶向多肽，对cxcr4具有高选择性与亲和力，通过偶联荧光染料并利用分子影像手术导航设备可以在手术中实现肿瘤的精准切除；进一步地，cxcr4靶向多肽还可以通过偶联放射性核素本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种CXCR4靶向多肽，其特征在于，其氨基酸序列如下：
2.根据权利要求1所述CXCR4靶向多肽，其特征在于，所述CXCR4靶向多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2~28任一条所示。
3.一种制备权利要求1或2所述CXCR4靶向多肽的方法，其特征在于，所述方法包括如下具体步骤：
4.一种分子探针，其特征在于，所述分子探针由荧光标记或放射性核素偶联权利要求1或2所述CXCR4靶向多肽而成。
5.根据权利要求4所述的分子探针，其特征在于，所述荧光标记包括IRDye800、Cy5、Cy7、ICG、罗丹明、FITC中的一种或多种。
6.根据权利要求4所述的分子探针，其特征在于，所述放射性核素选自18F，68Ga，64Cu，99mTc，90Y，111In，125I,131I或177Lu。
7.根据权利要求4所述的分子探针，其特征在于，所述放射性核素的螯合剂包括HYNIC、DOTA、NOTA 或DTPA。
8.根据权利要求4所述的分子探针，其特征在于，所述的放射性核素的配体包括三(羟甲基)甲基甘氨酸或间磺酸钠基三苯基膦。
9.权利要求1或2所述的CXCR4靶向多肽或权利要求4-8任一项所述的分子探针在制备诊断以CXCR4过表达为特征的癌症的试剂或药物中的应用。
10.权利要求1或2所述的CXCR4靶向多肽或权利要求4-8任一项所述的分子探针在制备荧光成像或放射性显像试剂中的应用。
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【技术特征摘要】
1.一种cxcr4靶向多肽，其特征在于，其氨基酸序列如下：
2.根据权利要求1所述cxcr4靶向多肽，其特征在于，所述cxcr4靶向多肽的氨基酸序列如seq id no.2~28任一条所示。
3.一种制备权利要求1或2所述cxcr4靶向多肽的方法，其特征在于，所述方法包括如下具体步骤：
4.一种分子探针，其特征在于，所述分子探针由荧光标记或放射性核素偶联权利要求1或2所述cxcr4靶向多肽而成。
5.根据权利要求4所述的分子探针，其特征在于，所述荧光标记包括irdye800、cy5、cy7、icg、罗丹明、fitc中的一种或多种。
6.根据权利要求4所述的分子探针，其特征在于，所述放射...
【专利技术属性】
技术研发人员：顾月清，尹显锐，贾胜岚，陈鑫，李傲，王鑫，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：
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