【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农药风险评价，特别是涉及一种农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法。
技术介绍
1、蜜蜂是农业生产中重要的传粉者，对于维持生态系统的稳定和多样性至关重要，同时，蜜蜂还可用于生产众多有价值的蜂产品，如蜂蜜、蜂蜡、花粉、蜂胶等。然而，近年来，世界各地出现蜂群崩溃失调综合症(colony collapse disorder，ccd)现象，导致蜜蜂数量骤减，而引起这一现象的主要因素是农业生产中大量使用的化学农药，特别是一些高度杀虫剂的不合理使用，导致蜜蜂死亡以及幼虫无法正常生长发育。
2、雄蜂由未受精卵发育而来，雄蜂与蜂王遗传和经济性状对其后代存在较大影响，因此当雄蜂幼虫接触到药剂后，对雄蜂后续的生长发育可能产生不同程度的影响，进而影响蜂群的整体性能。目前农药对蜜蜂安全性的评价体系不够完善，评价对象主要集中在工蜂上，暂未进行农药对雄蜂毒性的研究。因此，亟需一种农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法。
技术实现思路
1、基于此，有必要针对上述问题，提供一种农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，揭示农药对雄蜂幼虫的不利影响，具有较强的实用性和扩展性，有利于完善农药对雄峰安全性评价体系。
2、一种农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，包括如下步骤：
3、将1日龄的雄蜂幼虫用基础日粮进行适应性饲养3天，选取健康的4日龄的雄蜂幼虫；
4、将4日龄的所述雄蜂幼虫进行急性毒性试验，分为溶剂对照组和至少5个处理组，所述处理组的饲料包括基础日粮和不同浓度的农药，饲养1天后更换为采用
5、将4日龄的所述雄蜂幼虫进行慢性毒性试验，分为溶剂对照组和3个处理组，所述处理组的饲料包括基础日粮和不同浓度的农药，且农药的浓度分别为lc5、lc10以及lc30，饲养4天后，观察所述雄蜂幼虫的死亡情况，并将健康的所述雄蜂幼虫转移至化蛹板中，观察所述雄蜂幼虫的化蛹以及羽化情况。
6、在其中一个实施例中，饲养1日龄～3日龄的所述雄蜂幼虫时，每只雄蜂幼虫的饲料添加量为20μl～30μl；
7、及/或，在所述急性毒性试验和所述慢性毒性试验中，饲养4日龄的所述雄蜂幼虫时，每只雄蜂幼虫的饲料添加量为50μl～70μl；
8、及/或，在所述急性毒性试验和所述慢性毒性试验中，饲养5日龄～7日龄的所述雄蜂幼虫时，每只雄蜂幼虫的饲料添加量为150μl～200μl。
9、在其中一个实施例中，饲养1日龄～3日龄的所述雄蜂幼虫时，采用的基础日粮中，蜂王浆与葡萄糖、果糖、灭菌水、酵母粉的质量比为(45～55):(5～7):(5～7):(32～42):(0.5～1.5)；
10、及/或，在所述急性毒性试验和所述慢性毒性试验中，饲养4日龄的所述雄蜂幼虫时，采用的基础日粮中，蜂王浆与葡萄糖、果糖、灭菌水、酵母粉的质量比为(50～60):(5～7):(5～7):(31.5～41.5):(1～2)；
11、及/或，在所述急性毒性试验和所述慢性毒性试验中，饲养5日龄～7日龄的所述雄蜂幼虫时，采用的基础日粮中，蜂王浆与葡萄糖、果糖、灭菌水、酵母粉的质量比为(55～65):(5～7):(5～7):(21～31):(1.5～2.5)。
12、在其中一个实施例中，饲养所述雄蜂幼虫时，在更换饲料前将孔细胞板进行预热处理，温度为32℃～36℃，时间为15min～25min。
13、在其中一个实施例中，饲养1日龄～7日龄的所述雄蜂幼虫时，饲养条件为：温度为33℃～35℃，湿度为85％～95％，黑暗环境；
14、饲养8日龄及以上的所述雄蜂幼虫时，饲养条件为：温度为33℃～35℃，湿度为65％～75％，黑暗环境。
15、在其中一个实施例中，饲养1日龄～7日龄的所述雄蜂幼虫时，通过保湿液调节湿度，所述保湿液包括80％～90％的丙三醇和10％～20％的无菌水；
16、及/或，饲养8日龄及以上的所述雄蜂幼虫时，通过饱和氯化钠溶液调节湿度。
17、在其中一个实施例中，1日龄的所述雄蜂幼虫的收集方法包括：将产卵期内的蜂王固定在雄蜂脾上产卵8h～16h后，将雄蜂脾置于孵育区，经孵育后选取1日龄的所述雄蜂幼虫。
18、在其中一个实施例中，在1日龄的所述雄蜂幼虫的收集方法中，经孵育后选取1日龄末期的所述雄蜂幼虫，且所述雄蜂幼虫呈c形。
19、在其中一个实施例中，在所述急性毒性试验以及慢性毒性试验中，所述溶剂对照组以及各浓度的处理组均设置5个重复，每个重复中采用24只所述雄蜂幼虫。
20、在其中一个实施例中，所述农药选自新烟碱类农药。
21、上述农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，通过农药对雄蜂幼虫的急性毒性和慢性毒性试验，揭示了新烟碱类杀虫剂对雄蜂的不利影响，具有较强的实用性和扩展性，有利于完善农药对雄峰安全性评价体系，同时也能为蜜蜂资源保护提供理论依据。
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1.一种农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，所述毒性评价方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，在饲养1日龄～3日龄的所述雄蜂幼虫时，每只雄蜂幼虫的饲料添加量为20μL～30μL；
3.根据权利要求1或2所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，饲养1日龄～3日龄的所述雄蜂幼虫时，采用的基础日粮中，蜂王浆与葡萄糖、果糖、灭菌水、酵母粉的质量比为(45～55):(5～7):(5～7):(32～42):(0.5～1.5)；
4.根据权利要求1所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，饲养所述雄蜂幼虫时，在更换饲料前将孔细胞板进行预热处理，温度为32℃～36℃，时间为15min～25min。
5.根据权利要求1所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，饲养1日龄～7日龄的所述雄蜂幼虫时，饲养条件为：温度为33℃～35℃，湿度为85％～95％，黑暗环境；
6.根据权利要求1或者5所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，饲养1日龄～7日龄的所述雄蜂幼虫时
7.根据权利要求1所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，1日龄的所述雄蜂幼虫的收集方法包括：将产卵期内的蜂王固定在雄蜂脾上产卵8h～16h后，将雄蜂脾置于孵育区，经孵育后选取1日龄的所述雄蜂幼虫。
8.根据权利要求7所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，在1日龄的所述雄蜂幼虫的收集方法中，经孵育后选取1日龄末期的所述雄蜂幼虫，且所述雄蜂幼虫呈C形。
9.根据权利要求1所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，在所述急性毒性试验以及慢性毒性试验中，所述溶剂对照组以及各浓度的处理组均设置5个重复，每个重复中采用24只所述雄蜂幼虫。
10.根据权利要求1所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，所述农药选自新烟碱类农药。
...【技术特征摘要】
1.一种农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，所述毒性评价方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，在饲养1日龄～3日龄的所述雄蜂幼虫时，每只雄蜂幼虫的饲料添加量为20μl～30μl；
3.根据权利要求1或2所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，饲养1日龄～3日龄的所述雄蜂幼虫时，采用的基础日粮中，蜂王浆与葡萄糖、果糖、灭菌水、酵母粉的质量比为(45～55):(5～7):(5～7):(32～42):(0.5～1.5)；
4.根据权利要求1所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，饲养所述雄蜂幼虫时，在更换饲料前将孔细胞板进行预热处理，温度为32℃～36℃，时间为15min～25min。
5.根据权利要求1所述的农药对雄蜂幼虫的毒性评价方法，其特征在于，饲养1日龄～7日龄的所述雄蜂幼虫时，饲养条件为：温度为33℃～35℃，湿度为85％～95％，黑暗环境；
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【专利技术属性】
技术研发人员：操海群，王耀辉，廖敏，何其宝，黄勇，高全，肖进京，余林生，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：
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