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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及纳豆激酶,具体为一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法。
技术介绍
1、纳豆激酶由食品纳豆中提取或纳豆菌生产,是一种分子量远远小于uk、sk、tpa的蛋白质,并可由肠道,吸收,纳豆激酶的体外、体内溶栓性质通过实验也已得到确定,同时得出纳豆激酶的体内溶栓活性为纤溶酶的四倍,在体内作用迅速、持续时间长,还能激活体内的tpa,使之温和、持续地提高血液的纤溶活性。
2、由于纳豆激酶具有目前市场上正在使用的溶栓药物所不具有的优点,那么提高纳豆激酶的单位产物的酶活力和生产效率对纳豆激酶的推广应用具有重要的意义。
3、基于此,本专利技术提供了一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,以解决上述所提出的技术问题!
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,本专利技术将菌种接入种子培养基中,制备种子活化液,再将种子活化液接入发酵培养基,发酵培养,最后将发酵后的产物浸提离心,得到高活性纳豆激酶。本专利技术所制备的高活性纳豆激酶的酶活高,发酵周期短、产物营养更丰富,工艺简便成本低,同时,有效地保证了其质量及品质。
2、为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:
3、本专利技术提供了一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,包括以下步骤:
4、s1、将菌种接入种子培养基中,制备种子活化液;
5、s2、将种子活化液接入发酵培养基,发酵培养;
6、s3、将发酵后的产物
7、本专利技术进一步的设置为:在所述步骤s1中,所述种子活化液的制备过程如下:
8、取一环菌种入10~12ml的种子培养基中,于36~37℃、170~180r/min的条件下振荡培养12h;
9、振荡培养结束后,转接至50~52ml的种子培养基中,继续于36~37℃、170~180r/min的条件下振荡培养12h,得到种子活化液。
10、本专利技术进一步的设置为:所述菌种选用纳豆芽孢杆菌bncc185324、地衣芽孢杆菌bncc132622中的任意一种。
11、本专利技术进一步的设置为:所述种子培养基包括如下浓度成分:
12、胰蛋白胨12~28g/l、牛肉膏3~5g/l、nacl 2~5g/l、酵母提取物5~8g/l、天冬氨酸0.1~0.3g/l,ph 7.0~7.5。
13、本专利技术进一步的设置为:在所述步骤s2中,所述将种子活化液接入发酵培养基,发酵培养的过程如下:
14、按0.05~0.08:1的质量比将适量的种子活化液接入发酵培养基;
15、然后于36~37℃的条件下培养48~49h。
16、本专利技术进一步的设置为:所述发酵培养基的制备过程如下:
17、按0.22~0.32g/ml的固液比将适量的复合发酵料置于水中,于50℃水浴温度下浸泡100~120min;
18、浸泡结束后,置于110~115℃的条件下,灭菌30~34min。
19、本专利技术进一步的设置为:所述复合发酵料由油莎豆粕和文冠果油粕按1:0.3~0.4的质量比混合而成。
20、本专利技术进一步的设置为:在所述步骤s3中,所述浸提离心的过程如下:
21、按1:5.2~10.2的质量比将适量的产物置于蒸馏水中浸提120~200min;
22、再于10000~12000r/min的条件下离心10~15min。
23、与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:
24、本专利技术通过将菌种接入种子培养基中,制备种子活化液,再将种子活化液接入发酵培养基,发酵培养,最后将发酵后的产物浸提离心,得到高活性纳豆激酶,其中,种子培养基包括如下浓度成分:胰蛋白胨12~28g/l、牛肉膏3~5g/l、nacl 2~5g/l、酵母提取物5~8g/l、天冬氨酸0.1~0.3g/l,ph7.0~7.5,发酵培养基的是将适量的复合发酵料置于水中浸泡、灭菌所得,复合发酵料由油莎豆粕和文冠果油粕按1:0.3~0.4的质量比混合而成。本专利技术所制备的高活性纳豆激酶的酶活高,发酵周期短、产物营养更丰富,工艺简便成本低,同时,有效地保证了其质量及品质。本专利技术所提供的以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,具有更广阔的市场前景,更适宜推广。
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1.一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,在所述步骤S1中,所述种子活化液的制备过程如下:
3.根据权利要求2所述的一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,所述菌种选用纳豆芽孢杆菌BNCC185324、地衣芽孢杆菌BNCC132622中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,所述种子培养基包括如下浓度成分:
5.根据权利要求1所述的一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,在所述步骤S2中,所述将种子活化液接入发酵培养基,发酵培养的过程如下:
6.根据权利要求5所述的一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,所述发酵培养基的制备过程如下:
7.根据权利要求6所述的一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,所述复合发酵料由油莎豆粕和文冠果油粕按1:0.3~0.4的质量比混合而成。
8.根据权
...【技术特征摘要】
1.一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,在所述步骤s1中,所述种子活化液的制备过程如下:
3.根据权利要求2所述的一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,所述菌种选用纳豆芽孢杆菌bncc185324、地衣芽孢杆菌bncc132622中的任意一种。
4.根据权利要求2所述的一种以豆类为原料制备高活性纳豆激酶的方法,其特征在于,所述种子培养基包括如下浓度成分:
5.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员:胡文祥,
申请(专利权)人:湖北祥鹄生物工程有限公司,
类型:发明
国别省市:
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