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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物的合成,具体涉及一种黄连素-维生素d3结肠靶向胶束的制备方法及其在制备治疗炎症性肠炎药物中的应用。
技术介绍
1、炎症性肠炎(inflammatory bowel disease,ibd)包括溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis, uc)和克罗恩病(crohn's disease, cd);是一种以肠道炎症、腹泻、便血等为临床特征的慢性消化道疾病。ibd 病程长,易反复发作、迁延不愈,严重减低患者的生活质量。
2、ibd 发病机制复杂,至今尚未完全阐明,除遗传和环境因素外,一般认为它与持续的肠道炎症、肠道微生物失调、肠黏膜免疫失衡导致的肠道屏障功能障碍密切相关。在ibd活动期,肠粘膜中活性氧(ros)的生成显著增加至10到100倍,导致脂质过氧化并触发促炎症信号级联反应,进而持续产生肿瘤坏死因子-α(tnf-α)、干扰素γ(inf-γ)、白细胞介素1β(il-1β)、il-6和il-17等促炎症因子;这些促炎症分子的释放会干扰肠粘膜的组织内稳态并引发肠道内免疫细胞的过度免疫反应,从而进一步诱导肠道损伤,如紧密连接(tj)结构的改变、细胞凋亡和细菌易位增加,肠道致病菌及其代谢产物通过模式识别受体(prrs)激活肠道免疫系统,通过激活stat3途径促进了th17细胞分化,进一步加速了炎症反应,最终导致了溃疡性结肠炎患者的肠道菌群失调、免疫稳态失衡和屏障功能障碍。由于体内长期的高水平炎症导致超过70%的ibd患者出现维生素d(vitamin d,vd)缺乏症, 10% ~ 30%患者甚至产生骨
3、目前的ibd治疗方案以控制炎症和缓解临床症状从而提高患者的生活质量为目标。治疗uc的一线药物为氨基水杨酸类,cd的一线药物为糖皮质激素类,它们在临床上均难以达到满意的效果,不仅对中重度患者无效,复发率高,还无法很好的解决患者结肠上皮/黏膜修复问题,甚至还可能会产生严重的副作用,因此有待研发安全有效的治疗ibd的新疗法。
4、研究表明ibd患者肠道通透性显著增加,促使肠道免疫细胞和巨噬细胞利用上皮的通透性和滞留效应(epr,类似于肿瘤血管的epr效应)优先积累和选择性吸收大分子物质或纳米颗粒,因此新型纳米颗粒载体给药系统在治疗ibd方面具有的巨大优势。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种黄连素-维生素d3结肠靶向胶束的制备方法及其在制备治疗炎症性肠炎药物中的应用。本专利技术结合结肠炎症微环境 ros 异常高的特异化学信号,制备了一种黄连素-维生素d3结肠靶向胶束,可将黄连素直接输送至炎症结肠病灶部位,不仅可提高药物的生物利用度,增强药物的治疗效果,还可以降低全身副作用;即利用结肠炎症微环境 ros显著升高的特点,将疏水的维生素d3和亲水的黄连素与ros响应降解的共价键连接,在进一步制备成带负电的纳米胶束,构建了一种基于ros响应的黄连素纳米结肠靶向递送体系。药物在结肠炎症部位高活性氧ros作用下,释放药物,从而降低结肠炎症因子,促进结肠微生态的恢复,从而达到治疗ibd的目的,在治疗炎症性肠炎中的应用具备良好的治疗效果。
2、本专利技术的目的是这样实现的:
3、一种黄连素-维生素d3结肠靶向胶束的制备方法,包括以下步骤:
4、步骤1:小檗红碱的制备:具体的过程如下:取设定量的盐酸小檗碱放入真空干燥箱中干燥一段时间,将干燥后的盐酸小檗碱放入烧瓶中,抽真空充氮气,在氮气保护条件下将反应瓶在油锅中反应一段时间,在此过程中产物颜色变化依次为黄→橙→红;将得到的反应产物过硅胶柱提取纯品,产物为红色,即为小檗红碱,将小檗红碱进行核磁共振氢谱;
5、步骤2:硫缩酮的制备:先将浓硫酸滴加到饱和食盐水中制备并收集hcl气体,再将3-巯基丙酸溶液和丙酮溶液按设定的比例混合加入到烧瓶中,通入hcl气体搅拌反应一段时间,反应后将反应产物加入到冰盐水中终止反应,得硫缩酮粗品,再将硫缩酮粗品用正己烷和冰水洗涤至少三次,最后真空干燥得最终产物硫缩酮,并进行硫缩酮连接键的核磁共振氢谱和质谱表征;
6、步骤3:化合物1的制备:将步骤1中设定量的质谱表征小檗红碱和k2co3的乙腈溶液在设定温度下反应一段时间得到混合溶液;再向混合溶液中添加一定量的2-溴乙醇,随后将反应温度逐渐加热至设定温度并反应一段时间;反应结束后,将温度缓慢降至25℃,并通过旋转蒸发法蒸发剩余的ch3cn溶液得化合物1粗品;将化合物1粗品过硅胶柱纯化,产物为黄色固体的纯化合物1;
7、步骤4:化合物2的制备:将步骤3中的设定化合物1在ch3oh溶液中回流一段时间,然后逐步分批次向溶液中添加设定量的硼氢化钠,并在设定温度下剧烈搅拌12小时;反应结束后通过旋转蒸发法蒸发剩余的ch3oh溶液得化合物2粗品;将化合物2粗品过硅胶柱纯化,产物为淡黄色固体的纯化合物2;
8、步骤5:化合物3的制备:将步骤4中的化合物2溶解在二氯甲烷溶液中,再将其添加到dmap、dcc、硫缩酮和二氯甲烷的混合体系中,在干燥n2条件下,将混合体系在设定温度下反应一段时间,采用旋转蒸发法蒸发剩余二氯甲烷溶液;然后通过硅胶柱纯化,产物为淡黄色固体的纯化合物3;
9、步骤6:化合物4的制备:将维生素d3溶解在二氯甲烷溶液中,并在干燥氮气的条件下将维生素d3的二氯甲烷溶液逐渐添加到dcc、步骤5中纯化合物3、dmap的二氯甲烷混合物系统中,并在设定温度下反应一段时间,采用旋转蒸发法蒸发残余二氯甲烷溶液;通过硅胶柱纯化,得纯化合物4,纯化合物4为淡黄色固体;
10、步骤7:化合物5的制备:将步骤6的化合物4溶解在氯仿溶液中,然后将n-溴代丁二酰亚胺溶液逐渐滴加到化合物4的氯仿溶液中,将此反应体系在设定温度下反应一段时间后将反应溶液温度降至25℃,过滤;过滤之后将滤液通过硅胶柱纯化,得纯化合物5,产物为黄色固体;即纯化合物5为bbr-tk-vd3偶联物;
11、步骤8:bbr-tk-vd3纳米胶束的制备:将bbr-tk-vd3与tpgs按照不同质量比例混合,即得到混合溶液1、混合溶液2、混合溶液3的三种混合溶液,分别取不同量的三种混合溶液滴入3ml水中,轻轻摇匀得到含有不同质量比例bbr-tk-vd3和tpgs的纳米颗粒,使用粒径仪测量过水膜前后三种比例下得到纳米颗粒的粒径与电势,筛选出最佳条件是bbr-tk-vd3和tpgs比例为5:1的混合溶液,取50μl混合溶液滴入3ml水中。
12、所述步骤1中,盐酸小檗碱放入60℃真空干燥箱中干燥2h,在氮气保护条件下将反应瓶在190℃的油锅中反应15~45 min,过硅胶柱流动相中纯乙醇与二氯甲烷的体积比为1:4~10。
13、所述步骤2中,3-巯基丙酸溶液和丙酮溶液按摩尔比为2:1~2的比例混合加入到烧瓶中,通入hcl气体搅拌反应4 h。
14、所述步骤3中,取步骤1中本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种黄连素-维生素D3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的黄连素-维生素D3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤1中,盐酸小檗碱放入60℃真空干燥箱中干燥2h,在氮气保护条件下将反应瓶在190℃的油锅中反应15~45 min,过硅胶柱流动相中纯乙醇与二氯甲烷的体积比为1:4~10。
3.根据权利要求1所述的黄连素-维生素D3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤2中,3-巯基丙酸溶液和丙酮溶液按摩尔比为2:1~2的比例混合加入到烧瓶中,通入HCl气体搅拌反应4h。
4.根据权利要求1所述的黄连素-维生素D3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤3中,取步骤1中1mol小檗红碱和1 mol K2CO3的乙腈溶液在50℃条件下反应30 min得到混合溶液,向混合溶液中添加2-4 mol的2-溴乙醇溶液,随后将反应温度逐渐加热至约82℃并持续24~48 h。
5.根据权利要求1所述的黄连素-维生素D3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤4中,将步骤3中的1mol化合物
6.根据权利要求1所述的黄连素-维生素D3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤5中,将步骤4中的1mol化合物2溶解在二氯甲烷溶液中,再将其添加到含DMAP、DCC、硫缩酮的二氯甲烷的混合体系中,在干燥氮气条件下,将混合体系在温度为 0℃下反应至少48 h,DMAP、DCC、硫缩酮的摩尔比为0.2~0.4:1~2:0.8~1.5。
7.根据权利要求1所述的黄连素-维生素D3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤6中,将1 mol的维生素D3固体溶解在20mL二氯甲烷溶液中,并在干燥氮气的条件下将含有维生素D3的二氯甲烷溶液逐渐添加到含有DCC、纯化合物3、DMAP的二氯甲烷混合物系统中,并在温度为0℃下反应48 h;DCC、纯化合物3、DMAP的摩尔比为0.8~2.5:1~1.5:0.2~0.5。
8.根据权利要求1所述的黄连素-维生素D3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤7中,将1mol化合物4溶解在氯仿溶液中,然后将1~2 mol N-溴代丁二酰亚胺溶液逐渐滴加到含化合物4的氯仿溶液中,将此反应体系在50℃下反应6 h后将反应溶液温度降至25℃。
9.根据权利要求1所述的黄连素-维生素D3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤8中,将BBR-TK-VD3固体与TPGS固体按照不同质量比例混合,称取制备的BBR-TK-VD3偶联物5mg溶于1 mLDMSO溶液中,再分别向其加入1mg、2mg、5mg TPGS固体得到三种混合溶液1、混合溶液2、混合溶液3,分别取50μL、100μL、150μL三种混合溶液滴入3mL水中,轻轻摇匀,得到含有质量不同比例BBR-TK-VD3和TPGS的纳米颗粒,BBR-TK-VD3与TPGS的比例为5:1、5:2、1:1。
10.一种权利要求1-9任一项所述的制备方法制备的黄连素-维生素D3 结肠靶向胶束的应用,其特征在于:应用于制备治疗炎症性肠炎药物中。
...【技术特征摘要】
1.一种黄连素-维生素d3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的黄连素-维生素d3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤1中,盐酸小檗碱放入60℃真空干燥箱中干燥2h,在氮气保护条件下将反应瓶在190℃的油锅中反应15~45 min,过硅胶柱流动相中纯乙醇与二氯甲烷的体积比为1:4~10。
3.根据权利要求1所述的黄连素-维生素d3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤2中,3-巯基丙酸溶液和丙酮溶液按摩尔比为2:1~2的比例混合加入到烧瓶中,通入hcl气体搅拌反应4h。
4.根据权利要求1所述的黄连素-维生素d3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤3中,取步骤1中1mol小檗红碱和1 mol k2co3的乙腈溶液在50℃条件下反应30 min得到混合溶液,向混合溶液中添加2-4 mol的2-溴乙醇溶液,随后将反应温度逐渐加热至约82℃并持续24~48 h。
5.根据权利要求1所述的黄连素-维生素d3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤4中,将步骤3中的1mol化合物1在ch3oh溶液中回流15 min,然后逐步分批次向溶液中添加2 ~ 6 mol的硼氢化钠固体,并在温度为0℃下搅拌12小时。
6.根据权利要求1所述的黄连素-维生素d3结肠靶向胶束的制备方法,其特征在于:所述步骤5中,将步骤4中的1mol化合物2溶解在二氯甲烷溶液中,再将其添加到含dmap、dcc、硫缩酮的二氯甲烷的混合体系中,在干燥氮气条件下,将混合体系在温度为 0℃下反应至少48 h,dmap、d...
【专利技术属性】
技术研发人员:曹明卓,高勇,王媛,李婉琪,
申请(专利权)人:河南中医药大学,
类型:发明
国别省市:
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