【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及物质检测，具体涉及一种同时在线检测肝素钠混合物中蛋白质含量及氯化钠含量的方法。
技术介绍
1、肝素钠是一种提取自猪小肠黏膜的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，具有延迟血凝时间的作用。以肝素钠为原料制成的注射制剂作为经典的抗凝血药物，被广泛用于预防血栓形成和栓塞，及其他体内外抗凝血场景。
2、目前肝素钠的提取工艺多采用“酶解法”—将猪小肠黏膜收集于酶解罐内、添加蛋白酶进行水解，然后添加树脂将肝素钠从酶解液中吸收、富集出来。在此过程中，有两个关键参数直接影响产品收率及纯度—黏膜添加量和酶解液含盐量。其中，黏膜添加量即原料添加量，后续蛋白酶及树脂添加量都将以此为基础进行计算，但实际生产中小肠黏膜均采用灌水刮制来收集，原料为固液混合物，含水量受加工过程影响，波动很大，目前肝素钠生产企业均以刮肠进度来推算黏膜添加量，但该方法以小肠根数为计量单位，未充分考虑不同猪小肠根均重量的差异，不能反映真实的酶解底物总量。其次，采用树脂吸附时需要添加氯化钠、设定一定的离子浓度“门槛”来阻止大量的杂质蛋白与肝素钠形成竞争吸附，从而保证肝素钠的吸附效果和富集纯度。目前肝素钠生产企业均采用波美度计作为盐度检测方法，但该方法实际测定的是酶解液密度，不但受料液取样温度影响大，还受酶解液中非盐溶质的干扰，并不能真实反映料液含盐量。且上述两种指标的记录均人工完成，缺少追溯性。
3、近红外技术作为近年来发展迅速的在线检测技术，因其快捷、无损样品等优点被广泛应用于粮油、乳品、化工等领域，但其检测对象均为质地均一的固体或液体样品，尚无类似于肝素钠
4、目前尚无关于通过近红外来实现肝素钠酶解液和待酶解前的固液混合物料中有机物、无机物的同时在线检测的报道。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本专利技术的一个目的在于提供一种同时在线检测肝素钠混合物(肝素钠酶解液和固液混合状态的肝素钠待酶解液)中蛋白质含量及氯化钠含量的方法，通过本专利技术的方法，通过引入密度指标，建立“光谱→蛋白质含量预测”和“蛋白质含量预测值+密度→氯化钠含量预测”的双层模型，有效解决近红外在无机物定量方面的短板，实现了肝素钠混合物蛋白质含量、氯化钠含量两个指标的同时在线监测，为行业自动化生产提供了技术基础。
2、为此，本专利技术第一方面提供一种同时在线检测肝素钠混合物蛋白质含量及氯化钠含量的方法。根据本专利技术的实施方案，所述方法包括：
3、(1)获取多组待测肝素钠混合物的近红外光谱数据、密度、蛋白质含量、氯化钠含量；
4、(2)建立所述近红外光谱数据与蛋白质含量的预测模型1；
5、(3)建立所述蛋白质含量、密度与氯化钠含量的预测模型2；
6、(4)利用所述预测模型1，基于所述待测肝素钠混合物的近红外光谱数据，获得预测蛋白质含量；
7、(5)基于(4)获得的所述预测蛋白质含量和所述待测肝素钠混合物的密度实测值，利用所述预测模型2，以便获得所述待测肝素钠混合物的预测氯化钠含量。
8、目前肝素钠的提取工艺多采用“酶解法”—将猪小肠黏膜收集于酶解罐内、添加蛋白酶进行水解，然后添加树脂将肝素钠从酶解液中吸收、富集出来。在此过程中，有两个关键参数直接影响产品收率及纯度—黏膜添加量和酶解液含盐量(酶解液氯化钠含量)，这两个参数最准确的检测方法是采用试验室理化分析，但该方法属于离线检测、用时较长，不能实时指导车间生产。
9、近红外技术虽广泛应用于粮油、乳品、化工等领域，但其检测对象一般都是质地均一的固体或液体样品，尚无类似于肝素钠待酶解液(酶解前的混合物)这种固液混合物的检测案例。专利技术人经过实验研究发现，本专利技术的方法完全可以用于小肠黏膜酶解前的固液混合状态的肝素钠待酶解液以及质地均一的肝素钠酶解液。另外，近红外光谱在线分析物料蛋白质含量较为常用，但近红外光谱记录的是含氢基团x-h(x可为c、n、o)振动的倍频和合频吸收，理论上对于氯化钠含量无法直接检测；虽然氯化钠离子浓度会影响水的吸收峰的改变，亦有可能直接通过近红外光谱进行含盐量预测；但由于水的强背景吸收本身就是近红外定量分析的主要干扰因素，根据本专利技术的研究发现，直接使用近红外对含盐量进行定量的预测模型抗干扰能力差，仅在相对窄的区间内有效，当酶解液组分变化，尤其是物料浓度较低时，预测误差明显增大。
10、为解决上述问题，专利技术人首次使用近红外技术对肝素钠待酶解液这种固液混合物的近红外光谱进行采集，通过引入密度指标，建立“光谱→蛋白质含量预测”和“蛋白质含量预测值+密度→氯化钠含量预测”的双层模型，有效解决近红外在无机物定量方面的短板，实现了肝素钠混合物蛋白质含量、氯化钠含量两个指标的同时在线监测，为行业自控生产提供了技术基础。
11、根据本专利技术的实施方案，所述多组肝素钠混合物至少包括80组。本领域技术人员可以理解，当检测的肝素钠混合物数量越多时，获得的预测值更加准确。
12、根据本专利技术的实施方案，步骤(1)中所述蛋白质含量通过凯氏定氮法检测。
13、根据本专利技术的实施方案，步骤(1)中所述氯化钠含量通过硝酸银滴定法检测。
14、根据本专利技术的实施方案，步骤(1)中所述近红外光谱数据通过在线近红外分析仪采集。
15、根据本专利技术的实施方案，步骤(1)中所述密度指标通过在线密度计采集。
16、根据本专利技术的实施方案，所述方法进一步包括：
17、在构建预测模型1之前，对所述近红外光谱数据进行预处理。
18、根据本专利技术的实施方案，所述预处理包括对所述近红外光谱数据进行savitzky-golay卷积求导、snv、去趋势算法中的至少之一的处理。
19、根据本专利技术的实施方案，所述模型1和模型2是通过偏最小二乘回归分析建立的。
20、根据本专利技术的实施方案，在建立模型1和模型2时，根据校正集内交叉验证结果对异常数据进行剔除。
21、根据本专利技术的实施方案，所述肝素钠混合物包括小肠黏膜酶解前的肝素钠待酶解液和/或小肠黏膜酶解后的肝素钠酶解液，其中，所述肝素钠待酶解液为固液混合状态。
22、根据本专利技术的实施方案，所述酶包括蛋白酶和/或胰酶。
23、根据本专利技术的实施方案，所述小肠黏膜来自于猪。
24、本专利技术第二方面提供一种在肝素钠的生产过程中进行肝素钠混合物蛋白质含量及氯化钠含量质控的方法。根据本专利技术的实施方案，所述方法包括：
25、利用第一方面所述的同时在线检测肝素钠混合物蛋白质含量及氯化钠含量的方法对源自所述生产过程中的肝素钠混合物样本进行蛋白质含量及氯化钠含量预测，将所预测的蛋白质含量及氯化钠含量值与蛋白质含量目标值及氯化钠含量目标值进行比较，以便确定所述肝素钠混合物样本是否达符合预期。...
【技术保护点】
1.一种同时在线检测肝素钠混合物中蛋白质含量及氯化钠含量的方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述多组待测肝素钠混合物至少包括80组。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述蛋白质含量通过凯氏定氮法检测。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括：
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述模型1和模型2是通过偏最小二乘回归分析建立的。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在建立模型1和模型2时，根据校正集内交叉验证结果对异常数据进行剔除。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肝素钠混合物包括小肠黏膜酶解前的肝素钠待酶解液和/或小肠黏膜酶解后的肝素钠酶解液，其中，所述肝素钠待酶解液为固液混合状态。
8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述预处理包括对所述近红外光谱数据进行Savitzky-Golay卷积求导、SNV、去趋势算法中的至少之一的处理。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，
10.一种在肝素钠的生产过程中进行肝素钠混合物中蛋白质含量及氯化钠含量质控的方法，其特征在于，所述方法包括：
11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述肝素钠混合物包括小肠黏膜酶解前的肝素钠待酶解液和/或小肠黏膜酶解后的肝素钠酶解液，其中，所述肝素钠待酶解液为固液混合状态。
...【技术特征摘要】
1.一种同时在线检测肝素钠混合物中蛋白质含量及氯化钠含量的方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述多组待测肝素钠混合物至少包括80组。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述蛋白质含量通过凯氏定氮法检测。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法进一步包括：
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述模型1和模型2是通过偏最小二乘回归分析建立的。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在建立模型1和模型2时，根据校正集内交叉验证结果对异常数据进行剔除。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肝素钠混合物包括小肠...
【专利技术属性】
技术研发人员：王贞，谢华，李稳强，张军辉，臧凯，于永涛，
申请(专利权)人：河南双汇投资发展股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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