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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医疗诊断仪器试剂,具体涉及一种线性宽范围血球仪试剂及其制备方法。
技术介绍
1、血液分析是现代医学诊断中不可或缺的一部分,广泛应用于临床诊断、疾病监测和健康检查。血球仪作为一种重要的血液分析工具,能够快速、准确地检测血液中的各种细胞成分,如红细胞、白细胞和血小板等。然而,现有的血球仪试剂在检测范围和准确性等方面存在一定的局限性。
2、现有的血球仪试剂制备过程复杂,不利于大规模生产和应用,且部分试剂为进口试剂,不仅周期长且价格高。同时,许多现有的血球仪试剂只能覆盖有限的检测范围,无法满足临床对广泛血液参数的需求,例如,某些试剂在检测低浓度或高浓度血液样本时,可能会出现误差或无法检测。此外,传统试剂在储存和使用过程中容易受到环境因素的影响,导致检测结果不稳定。
3、中国专利cn 104698157 b涉及一种血细胞分析仪用试剂,所述试剂由稀释液、eoi溶血剂、lh溶血剂、eoii染色液和清洗液组成,此试剂使用范围广,适用机型多,检测结果准确,与原装血球试剂的线性回归后相关系数r值达到0.99以上,体现为较好的相关性,而且试剂原材料无毒无害,有利于该血细胞分析仪用试剂的推广和应用。然而,此试剂不涉及抗凝性的研究,而抗凝剂不仅涉及到采血后样本的处理和保存,且其选择对于血细胞的计数和分类至关重要。
4、因此,亟需开发一种线性宽范围血球仪试剂,使得试剂检测结果稳定、准确。
技术实现思路
1、针对现有的技术问题,本专利技术的目的在于提供一种线性宽
2、为了实现上述目的,本专利技术采用的技术方案如下:
3、本专利技术一方面提供了一种线性宽范围血球仪试剂,所述血球仪试剂由稀释液、溶血剂、染色剂和清洗液组成;其中,
4、所述稀释液的组分及含量为:渗透压调节剂5-8g/l,缓冲剂1-2g/l,抗凝剂0.3-0.6g/l,防腐剂0.2-0.4g/l;
5、所述溶血剂的组分及含量为:渗透压调节剂1.6-2.4g/l,季铵盐表面活性剂2.8-4.2g/l,非离子表面活性剂4-6.5g/l,稳定剂1.6-2.4g/l,edtak20.1-0.3g/l,triton x-1001-1.5g/l,4-羟乙基哌嗪乙磺酸3-6g/l,丁二酸0.6-1g/l;
6、所述染色剂的组分及含量为:聚次甲基染料0.015-0.035g/l,甲醇25-35g/l,乙二醇900-1000g/l;
7、所述清洗液的组分及含量为:渗透压调节剂5-10g/l,壬基酚聚氧乙烯醚2-4.5g/l,缓冲剂1-2.5g/l,防腐剂0.1-0.3g/l,复合酶6-12g/l。
8、本专利技术的反应机理和作用如下:
9、1.生物医用材料由于其特殊的应用,需要具有良好的生物相容性,这是决定材料能否作为血液接触类医用材料的关键。本专利技术合成了一种具有超支化结构的抗凝剂,通过分子设计与合成,制备具有良好抗凝血性能的超支化材料,可以拓宽其在生物医用材料领域的应用。
10、本专利技术合成的抗凝剂经过修饰后其表面与血液组分之间存在静电排斥作用,具有良好的抗凝血性。本申请选取2,2-二异戊基-1,3-丙二醇、2-羟基-4-戊烯酸为单体合成支化结构,然而其溶解性较差,可能是由于酯基和羟基形成的分子间氢键以及不饱和双键的存在。申请人通过2-氯丙酸引入羧酸基团来改善物质的血液相容性,这是因为羧酸基团不仅可以使材料表面带有一定的负电荷,还破坏了不饱和双键的存在。进一步地,引入1,3-丙烷磺内酯,其结构中的磺酸基具有较好的水溶性,会破坏羟基间的氢键作用,进而提升超支化物质的溶解性,充分发挥其优异的抗凝血性,也为超支化物质在生物医药领域的应用提供了更多可能。
11、2.本专利技术在苯并噻唑的分子骨架上,通过加入2-苯乙硫醇来引入巯酯基,合成苯并杂环的巯酯类稳定剂。一方面,新型的稳定剂结构利用硫原子的孤对电子降低了苯基苯并噻唑类的刚性结构,使得分子结构更加柔韧,增强了紫外吸收强度,提高了稳定性。另一方面,通过稳定剂可以使阳离子表面活性剂与血红蛋白形成的复合物,在仪器检测时间内保持特定波长的吸光度值不变,显著提高血红蛋白浓度测定的准确性和稳定性。
12、在一些实施方式中,所述渗透压调节剂为氯化钠、氯化钾和硫酸钠中的任意一种或多种。
13、在一些实施方式中,所述季铵盐表面活性剂为十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵和十六烷基四甲基氯化铵中的任意一种或多种。
14、在一些实施方式中,所述非离子表面活性剂为聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯硬脂酸酯和烷基酚聚氧乙烯醚中的任意一种或多种。
15、优选地,所述防腐剂为proclin 300。
16、优选地,所述缓冲剂为硼砂和/或硼酸。
17、优选地,所述复合酶为碱性蛋白酶和丝氨酸蛋白酶。
18、进一步优选地,所述碱性蛋白酶和丝氨酸蛋白酶的含量比为1:(2-3)。
19、在一些实施方式中,所述抗凝剂的制备方法,包含如下步骤:
20、s1.将2,2-二异戊基-1,3-丙二醇、2-羟基-4-戊烯酸加入至反应釜中,通入惰性气体,加热至120-140℃,加入催化剂,保温反应3-4h,减压继续反应3-4h,降温至45-55℃,加入丙酮,搅拌,再加入正己烷,过滤,得到沉淀产物;
21、s2.将步骤s1得到的沉淀产物、丙酮混合,搅拌,加入2-氯丙酸,通入惰性气体,加热至50-70℃,加入路易斯酸催化剂,保温反应2-4h,冷却,得到中间产物;
22、s3.将氢化钠分散于四氢呋喃中,得到氢化钠溶液,备用;将氢化钠溶液滴入步骤s2得到的中间产物中,反应10-12h,加入1,3-丙烷磺内酯,继续搅拌反应10-12h,过滤,得到的固体溶于二甲基亚砜中,再加入四氢呋喃沉淀,将沉淀得到的粗产物真空干燥,用二次水透析,透析产物再真空干燥,得到抗凝剂。
23、在一些实施方式中,步骤s1中所述2,2-二异戊基-1,3-丙二醇和2-羟基-4-戊烯酸的摩尔比为1:(8.2-8.6)。
24、在一些实施方式中,步骤s3中所述中间产物和1,3-丙烷磺内酯的摩尔比为1:(2-2.4)。
25、优选地,步骤s2中所述沉淀产物和2-氯丙酸的摩尔比为1:(8.1-8.4)。
26、在一些实施方式中,所述稳定剂的制备方法,包含如下步骤:
27、将1,3-苯并噻唑-2-羰酰氯、四氢呋喃加入至反应釜中,搅拌溶解,加入三乙胺,通入惰性气体,搅拌10-20min,-4-2℃的冰水浴下滴加2-苯乙硫醇,加热至50-本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述血球仪试剂由稀释液、溶血剂、染色剂和清洗液组成;其中,
2.根据权利要求1所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述渗透压调节剂为氯化钠、氯化钾和硫酸钠中的任意一种或多种。
3.根据权利要求1所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述季铵盐表面活性剂为十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵和十六烷基四甲基氯化铵中的任意一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述非离子表面活性剂为聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯硬脂酸酯和烷基酚聚氧乙烯醚中的任意一种或多种。
5.根据权利要求1所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述抗凝剂的制备方法,包含如下步骤:
6.根据权利要求5所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,步骤S1中所述2,2-二异戊基-1,3-丙二醇和2-羟基-4-戊烯酸的摩尔比为1:(8.2-8.6)。
7.根据权利
8.根据权利要求1所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述稳定剂的制备方法,包含如下步骤:
9.根据权利要求8所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述1,3-苯并噻唑-2-羰酰氯和2-苯乙硫醇的摩尔比为1:(1.6-1.9)。
10.一种权利要求1-9任一项所述的线性宽范围血球仪试剂的制备方法,其特征在于,包含如下步骤:
...【技术特征摘要】
1.一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述血球仪试剂由稀释液、溶血剂、染色剂和清洗液组成;其中,
2.根据权利要求1所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述渗透压调节剂为氯化钠、氯化钾和硫酸钠中的任意一种或多种。
3.根据权利要求1所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述季铵盐表面活性剂为十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵和十六烷基四甲基氯化铵中的任意一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特征在于,所述非离子表面活性剂为聚氧乙烯月桂醚、聚氧乙烯硬脂酸酯和烷基酚聚氧乙烯醚中的任意一种或多种。
5.根据权利要求1所述的一种线性宽范围血球仪试剂,其特...
【专利技术属性】
技术研发人员:高飞,赵军理,
申请(专利权)人:江苏荣盛嘉美生物试剂有限公司,
类型:发明
国别省市:
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