本发明专利技术提供了一种AIE纳米颗粒及其制备方法、应用、相关产品，属于纳米传感技术领域。本发明专利技术提供的AIE纳米颗粒由AIE<subgt;515</subgt;和凝血因子Xa底物S‑2765制成。本发明专利技术AIE纳米颗粒的制备方法简单，反应条件温和，且成本低廉、易于批量制备。将本发明专利技术制备的传感器加入到水溶液中可瞬时得到荧光信号，该方法与传统的中药活性物质的筛选和现有的Xa的检测相比，可同时实现快速检测和筛选。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于纳米传感，涉及一种aie纳米颗粒及其制备方法、应用、相关产品，具体涉及一种基于凝血因子xa的荧光传感器的制备方法以及在凝血因子xa的监测和川芎中抗xa抑制剂的筛选中的应用。
技术介绍
1、凝血功能障碍是重症患者严重且常见的并发症，可导致多器官功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome，mods），并伴有预后恶化。凝血功能障碍可以被定义为由于多种原因导致出血、凝血或两者兼而有之的任何止血改变或紊乱。例如脓毒症诱发的凝血病（sic）和创伤诱发的凝血病（tic）。严重情况下，这些凝血病会发展为弥散性血管内凝血（dic），导致mods。
2、凝血酶原是凝血过程的关键酶原，可通过凝血酶原酶复合物转化为凝血酶，该复合物由凝血因子xa(fxa)、辅因子va(fva)和磷脂组成。凝血因子xa是维生素k依赖性丝氨酸蛋白酶，也是血液凝固的关键因素之一。凝血因子xa的主要形式分子量约为43kda，包含两条由二硫键相连的27kda和16kda的肽链，在激活复杂的凝血级联反应中起着中心作用，因此被认为是抗血栓形成剂的靶标。
3、中国专利申请202311349277.0提供了一种组合物、检测试剂、检测试剂盒以及在制备检测凝血因子x活性中的应用。该组合物包括：不含凝血因子x的血浆和缓冲体系。该技术提供了一种凝固法检测因子x活性的试剂盒，具有操作简单、灵敏度高、重复性好、稳定性好的特点，市场竞争优势强。然而，该技术未能提供一种聚集诱导荧光纳米颗粒用于检测凝血因子x的方法。
4、中国专利申请202210662738.9提供了一种外源添加抗凝血酶的抗xa活性测定试剂盒。所述测定试剂盒为全液态试剂，其包括第一试剂、第二试剂和第三试剂；所述第一试剂以其总体积为1l计，包括以下组分：10-30g第一盐离子、56-130g第一稳定剂、0.1-1g第一防腐剂、含量为50-100mmol的第一缓冲液、含量为3000-5000iu的抗凝血酶；且所述第一试剂的ph值为7.2-7.6；所述第一稳定剂包括多羟基醇、糖类、第一表面活性剂和蛋白质；多羟基醇：糖类：第一表面活性剂：蛋白质的质量比为：（3.5-6.5）：（1-3）：（0.1-0.5）：（1-3）；所述第一表面活性剂为tween-20；所述第二试剂以其总体积为1l计，包括以下组分：5-15g第二盐离子、67-165g第二稳定剂、0.1-1g第二防腐剂、含量为50-100mmol的第二缓冲液、含量为1000-5000iu的凝血因子；且所述第二缓冲液的ph值为7.8-8.2；所述第二稳定剂包括多羟基醇、第二糖类、氨基酸、第二表面活性剂和蛋白质；多羟基醇：第二糖类：氨基酸：第二表面活性剂：蛋白质的质量比为：（3.5-6.5）：（1.1-3.5）：（1-3）：（0.1-0.5）：（1-3）；所述第二表面活性剂为tween-20；所述第二糖类包括蔗糖和硫酸葡聚糖；所述第三试剂以其总体积为1l计，包括以下组分：5-15g第三盐离子、46-100g第三稳定剂、0.1-1g第三防腐剂、含量为50-100mmol的第三缓冲液、含量为0.5-1.5mmol的发色底物；且所述第三缓冲液的ph值为7.8-8.2；所述第三稳定剂包括多羟基、糖类和第三表面活性剂；多羟基醇：糖类：第三表面活性剂的质量比为：（3-5）：（1-3）：（0.6-2）；所述第三表面活性剂包括tween-20和pvp。然而，该技术未能提供一种聚集诱导荧光纳米颗粒用于检测凝血因子x的方法。
5、中国专利申请202311037568.6提供了一种共价连接d-型肝素钠结合肽的aie探针935，并用于肝素钠的检测。935由d-型氨基酸通过助溶基团aeea与tpe-cooh（四苯乙烯-羧基）共价连接而得。肝素钠能诱导935产生aie效应，935与0-6 .1 μg/ml的肝素钠有良好的线性关系（r2=0 .9917），最低检测限为17 .7 ng/ml。935具有稳定性高、水溶性好、灵敏度高、成本低、操作简单等优点。与l-型tpe-1（l-型肝素钠结合肽ag73与tpe-cooh共价结合而成）相比，d-型935的水溶性及蛋白酶稳定性显著增强，值得用于肝素钠含量测定方面的推广。然而，该技术未能实现一种双功能“开-关-开”传感器的制备方法以及在凝血因子xa的监测和川芎中抗xa抑制剂的筛选中的应用。
6、然而，现有技术尚不能给出一种双功能“开-关-开”的传感器、制备方法以及在凝血因子xa的监测和川芎中抗xa抑制剂的筛选中的应用。
技术实现思路
7、有鉴于此，针对现有技术尚不能给出一种双功能“开-关-开”传感器的制备方法以及在凝血因子xa的监测和川芎中抗xa抑制剂的筛选中的应用的问题，本专利技术的目的是提供一种传感纳米颗粒及其制备方法、应用、相关产品。
8、本专利技术的专利技术思路为：将aie515和凝血因子xa底物s-2765使用戊二醛进行键合并自组装，合成一种聚集诱导荧光纳米颗粒（aie纳米颗粒）。凝血因子xa底物s-2765的端基具有响应凝血因子xa的基团。当无凝血因子存在时，aie纳米颗粒聚集诱导荧光（开状态）；当凝血因子xa存在且有活性时，aie纳米颗粒上响应凝血因子xa的基团脱落，使纳米颗粒的聚集态变得分散，聚集诱导的荧光强度降低（关状态）；此时若加入凝血因子xa的抑制剂，凝血因子xa活性降低，aie纳米颗粒上响应凝血因子xa的基团脱落情况减少，聚集诱导的荧光强度提高（开状态）。利用上述原理可以实现对凝血因子xa抑制剂的筛选和抑制力评价。
9、为实现上述专利技术目的，一方面，本专利技术提供了一种aie纳米颗粒，所述aie纳米颗粒由aie515和凝血因子xa底物s-2765制成。
10、所述aie515的分子式如下：
11、
12、优选地，所述aie纳米颗粒由aie515和凝血因子xa底物s-2765经键合、自组装制成。
13、另一方面，本专利技术提供了上述aie纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤：
14、将水与凝血因子xa底物s-2765混合，再加入四氢呋喃、戊二醛，最后加入aie515，得混合溶液，搅拌反应，避光静置，得aie纳米颗粒。
15、优选地，所述搅拌反应的转速为100-400rpm，所述搅拌反应的时间为0.25-1.5h；所述凝血因子xa底物s-2765与所述aie515的质量比为0.1：0.25-2。
16、更优选地，所述搅拌反应的转速为100-250rpm，所述搅拌反应的时间为0.25-0.75h；所述凝血因子xa底物s-2765与所述aie515的质量比为0.1：0.25-1。
17、再优选地，所述搅拌反应的转速为250rpm，所述凝血因子xa底物s-2765与所述aie515的质量比为0.1：0.25。
18、再一方面，本专利技术提供了一种凝血因子xa检测试剂，包括上述的aie纳米颗粒或上述的制备方法制得的aie纳米颗粒。
19、再一方面，本专利技术提供了一种凝血因子x本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种AIE纳米颗粒，其特征在于，所述AIE纳米颗粒由AIE515和凝血因子Xa底物S-2765制成。
2.权利要求1所述的AIE纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述搅拌反应的转速为100-400rpm，所述搅拌反应的时间为0.25-1.5h；所述凝血因子Xa底物S-2765与所述AIE515的质量比为0.1：0.25-2。
4.一种凝血因子Xa检测试剂，其特征在于，包括权利要求1所述的AIE纳米颗粒或权利要求2-3中任意一项所述的制备方法制得的AIE纳米颗粒。
5.一种凝血因子Xa检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求4所述的凝血因子Xa检测试剂。
6.一种抗凝血因子Xa成分筛选试剂，其特征在于，包括权利要求1所述的AIE纳米颗粒或权利要求2-3中任意一项所述的制备方法制得的AIE纳米颗粒。
7.一种抗凝血因子Xa成分筛选试剂盒，其特征在于，包括权利要求6所述的抗凝血因子Xa成分筛选试剂。
8.权利要求1所述的AIE纳米颗粒或权利要求2-3中任意一项所述的制备方法制得的AIE纳米颗粒在凝血因子Xa检测中的应用。
9.权利要求1所述的AIE纳米颗粒或权利要求2-3中任意一项所述的制备方法制得的AIE纳米颗粒在抗凝血因子Xa成分筛选中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
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【技术特征摘要】
1.一种aie纳米颗粒，其特征在于，所述aie纳米颗粒由aie515和凝血因子xa底物s-2765制成。
2.权利要求1所述的aie纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述搅拌反应的转速为100-400rpm，所述搅拌反应的时间为0.25-1.5h；所述凝血因子xa底物s-2765与所述aie515的质量比为0.1：0.25-2。
4.一种凝血因子xa检测试剂，其特征在于，包括权利要求1所述的aie纳米颗粒或权利要求2-3中任意一项所述的制备方法制得的aie纳米颗粒。
5.一种凝血因子xa检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求4所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：晏一淇，孙锟辉，刘欣旸，李玉红，杨剑，张俊华，张晗，张鹏，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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