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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术总体上涉及shc/hac酶及其变体。本专利技术还涉及shc/hac酶及其变体的各种用途,例如将(3e,7e)-高法呢醇(homofarnesol)(eeh)酶促转化为(-)-降龙涎香醚(ambrox)或将e,e-双高法呢醇(biseeh)酶促转化为龙涎香氧化物(ambra oxide)及其类似物。本专利技术还涉及酶促反应的产物,例如使用shc/hac酶及其变体制备的(-)-降龙涎香醚或龙涎香氧化物,以及所述产物的各种用途。
技术介绍
1、角鲨烯何帕烯环化酶(squalene hopene cyclase)(shc)是一种膜结合酶,其作为生物催化剂将线性三萜类角鲨烯环化为何帕烯和何帕醇。
2、来自多种细菌的许多野生型和变体shc酶已被证明可用于将(3e,7e)-高法呢醇转化为(-)-降龙涎香醚(参见,例如,wo 2016/170099;wo 2018/157021;neumann&simon1986,biol chem hoppe-seyler367,723-729;jp2009060799;seckler&poralla 1986,biochem biophys act 356-363;ochs等人1990,j bacteriol 174,298-302;wo 2010/139719;us 8759043;wo 2012/066059;seitz等人2012,jmolecular catalysis b:enzymatic 84,72-77;和seitz 2012博士论文(http://el
技术实现思路
1、第一方面,提供了一种制备(-)-降龙涎香醚或包含(-)-降龙涎香醚的混合物的方法,所述方法包括使用shc/hac酶变体将(3e,7e)-高法呢醇(eeh)或包含eeh的高法呢醇异构体混合物酶促转化为(-)-降龙涎香醚或包含(-)-降龙涎香醚的混合物,其中所述shc/hac酶变体具有与seq id no:1、2、3、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、307、308、309、310、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382或383具有至少30.0%同一性或相似性的氨基酸序列,并且其中shc/hac酶变体氨基酸序列相对于以下序列在对应于seq id no:1、2或3的位置w169、a306和/或g600的位置处、或在野生型shc/hac酶的氨基酸序列中对应于seq id no:1、2或3的w169、a306和/或g600的位置处具有氨基酸改变:seq id no:1、2、3、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、21本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种制备(-)-降龙涎香醚或包含(-)-降龙涎香醚的混合物的方法,所述方法包括使用SHC/HAC酶变体将(3E,7E)-高法呢醇(EEH)或包含EEH的高法呢醇异构体混合物酶促转化为(-)-降龙涎香醚或包含(-)-降龙涎香醚的混合物,其中所述SHC/HAC酶变体具有与SEQID NO:1、2、3、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、47、48、49、50、51、52、53、54、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382或383、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、1
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种制备(-)-降龙涎香醚或包含(-)-降龙涎香醚的混合物的方法,所述方法包括使用shc/hac酶变体将(3e,7e)-高法呢醇(eeh)或包含eeh的高法呢醇异构体混合物酶促转化为(-)-降龙涎香醚或包含(-)-降龙涎香醚的混合物,其中所述shc/hac酶变体具有与seqid no:1、2、3、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、47、48、49、50、51、52、53、54、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382或383、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137,138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、307、308、309或310具有至少30.0%同一性或相似性的氨基酸序列,并且其中所述shc/hac酶变体氨基酸序列相对于以下序列在对应于seq id no:1、2或3的位置w169、a306和/或g600的位置处、或在野生型shc/hac酶的氨基酸序列中对应于seq id no:1、2或3的w169、a306和/或g600的位置处具有氨基酸改变:seq id no:1、2、3、47、48、49、50、51、52、53、54、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382或383、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190,191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255,256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、307、308、309或310。
2.一种制备(-)-降龙涎香醚或包含(-)-降龙涎香醚的混合物的方法,所述方法包括使用shc/hac酶变体将(3e,7e)-高法呢醇(eeh)或包含eeh的高法呢醇异构体混合物酶促转化为(-)-降龙涎香醚或包含(-)-降龙涎香醚的混合物,其中所述shc/hac酶变体具有与seqid no:1、13、15、23、32具有至少30.0%同一性或相似性的氨基酸序列,并且其中所述shc/hac酶变体氨基酸序列相对于seq id no:1在对应于seq id no:1的位置w169、a306和/或g600的位置处、或在野生型shc/hac酶的氨基酸序列中对应于seq id no:1的w169、a306和/或g600的位置处具有氨基酸改变。
3.一种制备龙涎香氧化物或包含龙涎香氧化物的混合物的方法,所述方法包括使用shc/hac酶变体将(2,e)-双高法呢醇(biseeh)或包含biseeh的双高法呢醇异构体混合物酶促转化为龙涎香氧化物或包含龙涎香氧化物的混合物,其中所述shc/hac酶变体具有与seqid no:1、2、3、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、47、48、49、50、51、52、53、54、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382或383、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94,95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134,135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283,284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、307、308、309或310具有至少30.0%同一性或相似性的氨基酸序列,并且其中所述shc/hac酶变体氨基酸序列相对于以下序列在对应于seq id no:1、2或3的位置w169、a306和/或g600的位置处、或在野生型shc/hac酶的氨基酸序列中对应于seq id no:1、2或3的w169、a306和/或g600的位置处具有氨基酸改变:seq id no:1、2、3、47、48、49、50、51、52、53、54、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382或383、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112,113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187 188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252,253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、307、308、309或310。
4.一种制备龙涎香氧化物或包含龙涎香氧化物的混合物的方法,所述方法包括使用shc/hac酶变体将(2,e)-双高法呢醇(biseeh)或包含biseeh的双高法呢醇异构体混合物酶促转化为龙涎香氧化物或包含龙涎香氧化物的混合物,其中所述shc/hac酶变体具有与seqid no:1、13、15、23、32具有至少30.0%同一性或相似性的氨基酸序列,并且其中所述shc/hac酶变体氨基酸序列相对于seq id no:1在对应于seq id no:1的位置w169、a306和/或g600的位置处、或在野生型shc/hac酶的氨基酸序列中对应于seq id no:1的w169、a306和/或g600的位置处具有氨基酸改变。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中:
6.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中:
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中:
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中:
9.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中:
10.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中在seq id no:1、...
【专利技术属性】
技术研发人员:E·艾克霍恩,B·豪尔,A·施奈德,
申请(专利权)人:奇华顿股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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