【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析，具体涉及一种d-(+)-葡萄糖酸δ-内酯中有关物质的柱前衍生-气相色谱检测。
技术介绍
1、d-(+)-葡萄糖酸-δ-内酯(glucono-δ-lactone)(简称葡萄糖酸内酯，gdl)，外观为白色晶体或结晶性粉末，极易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。其水溶液在室温或较低温度下缓慢水解生成葡糖糖酸，温度升高，水解加快。gdl作为凝固剂、酸化剂、改良剂等添加剂广泛应用于食品领域，此外，还广泛用作合成列净类降糖药的起始物料。
2、列净类降糖药是一种钠-葡萄糖共转运蛋白2(sglt2)抑制剂，用于治疗2型糖尿病，典型的有达格列净、恩格列净和卡格列净等。gdl为制备列净原料药的关键起始物料(cas号：90-80-2)，结构式如下：
3、
4、工业上制备gdl多以葡萄糖氧化为葡萄糖酸，葡萄糖酸通过酸化过程转化得到。在gdl制备过程中，可能有以下杂质残留：
5、
6、这些杂质可能残留或衍生传递至原料药中，对药品安全性造成影响。为了保证列净列净类原料药临床使用的安全性和有效性，针对gdl中的杂质，需要建立一种灵敏度高、选择性好的gdl有关物质的测定的方法。
7、目前，已公开的gdl有关物质检测主要方法有以下几种：
8、国标方法gb7657-2020，公开了一种还原糖的检测方法，但是该方法灵敏度低，专属性差，不满足当前质量研究要求。
9、中国专利cn 117147736 a，提供了一种d-葡萄糖-δ-内酯有关物质的检测方法，
10、中国专利cn 116242951 a公开了一种测定葡萄糖酸内酯有关物质的分析方法，(1)制备供试品溶液：取供试品加入稀释液溶解，定量稀释至设定浓度后获得供试品溶液；(2)设置色谱条件：采用三键键合酰胺基键合硅胶为填充剂的色谱柱，采用hilic分离模式，以酸性水溶液为流动相a，有机溶剂为流动相b，进行等度洗脱，检测波长为205nm-220nm；(3)测定分析：取供试品溶液10μl-50μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按面积归一化法计算葡萄糖酸-δ-内酯及其有关物质葡萄糖酸-γ-内酯与葡萄糖酸的含量。该方法可以检测多种有关物质，但方法溶液稳定性差，使用cad检测器价格昂贵，不利于一般实验室实行。
11、综上所述，gdl有关物质研究主要以高效液相色谱法使用紫外和cad等检测器分析。现有技术仍有诸多缺陷，难以满足一般实验室的质量研究工作需求。开发一种灵敏度高、适用性强能够同时检测d-(+)-葡萄糖酸δ-内酯中有关物质检测方法是本领域研究人员的研究重点。
技术实现思路
1、本专利技术针对上述问题，提供了一种d-(+)-葡萄糖酸δ-内酯中有关物质的气相色谱检测方法，为柱前衍生-气相色谱法，通过优化稀释剂、衍生条件、色谱条件等，实现了对d-(+)-葡萄糖酸δ-内酯中d-葡萄糖、d-葡萄糖酸、蔗糖、d-葡萄糖酸-1,4-内酯等杂质的含量检测，操作简单，灵敏度高。
2、为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
3、一方面，本专利技术提供了一种d-(+)-葡萄糖酸δ-内酯中有关物质的检测方法，为柱前衍生-气相色谱检测，包含以下步骤：
4、s1：杂质贮备溶液配制：取d-葡萄糖、d-葡萄糖酸、蔗糖、d-葡萄糖酸-1,4-内酯加溶剂溶解，制成杂质贮备溶液；
5、s2：对照溶液的配制：取杂质贮备溶液，加衍生试剂，反应10-50min，得对照溶液；
6、s3：分离度溶液的配制：取d-(+)-葡萄糖酸δ-内酯待测样品和杂质贮备溶液混合，加衍生试剂，反应10-50min，得分离度溶液；
7、s4：供试品溶液的配制：取d-(+)-葡萄糖酸δ-内酯待测样品与溶剂混合，
8、加衍生试剂，反应10-50min，得供试品溶液；
9、s5：取对照溶液、分离度溶液和供试品溶液，分别采用gc-fid进行检测分析，记录色谱图；
10、色谱条件为：
11、色谱柱：100％二甲基聚硅氧烷做固定液的毛细管色谱柱；
12、进样口温度：230-300℃；
13、载气：氦气，流速为1.3-1.7ml/min；
14、fid温度：280-350℃；
15、进样量：1-2μl；
16、分流比为50-100：1；
17、升温程序：
18、初始温度：150-165℃，保持0-3min；
19、以1-5℃/min的升温速率升至170-190℃，保持0-5min；
20、以15-30℃/min的升温速率升至280-320℃，保持1-10min。
21、优选地，s1和s4中，所述的溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、乙腈和二氯甲烷中的至少一种；进一步优选地，s1和s4中，所述的溶剂为n,n-二甲基甲酰胺。
22、优选地，s2和s3中，所述的杂质贮备溶液体积为1-3ml；进一步优选地，s2和s3中，所述的杂质贮备溶液体积为1ml；
23、优选地，s4中，所述的溶剂的体积为1-3ml；进一步优选地，s4中，所述的溶剂的体积为1ml；
24、优选地，s2-s4中，所述的衍生试剂为n,o-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺(bstfa)、三甲基氯硅烷(tmcs)和吡啶的混合物；
25、优选地，所述的n,o-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺(bstfa)、三甲基氯硅烷(tmcs)和吡啶的体积比为6-9：0.5-1.5：0.1-0.5；进一步优选地，所述的n,o-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺(bstfa)、三甲基氯硅烷(tmcs)和吡啶的体积比为7-9：0.5-1.0：0.3-0.5；更优选地，所述的n,o-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺(bstfa)、三甲基氯硅烷(tmcs)和吡啶的体积比为9：1：0.5。
26、优选地，s2-s4中，所述的衍生试剂的体积为1-3ml；进一步优选地，s2-s4中，所述的衍生试剂的体积为1ml；
27、优选地，s2-s4中，所述的反应为超声，所述的超声的时间为10-40min，功率为35-45khz；进一步优选地，s2-s4中，所述的反应为超声，所述的超声的时间为10-30min，功率为35-40khz；更优选地，s2-s4中，所述的反应为超声，所述的超声的时间为30min，功率为40khz。
28、优选地，s2-s4中，所述的衍生反应在20ml顶空瓶中进行，且顶空瓶加盖。
29、优选地，s1中，所述的杂质贮备溶液每1ml含有d-葡萄糖和蔗糖各0.02-0.04mg，d-葡萄糖酸-1,4-内酯和d-葡萄糖酸各0.12-0.17mg；
30、进一步优选地，s1中，所述的杂质贮备溶液每1ml含有d-葡萄糖和蔗糖本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种D-(+)-葡萄糖酸δ-内酯中有关物质的检测方法，其特征在于，为柱前衍生-气相色谱检测方法，包含以下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，S1和S4中，所述的溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、乙腈和二氯甲烷中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，S2和S4中，所述的衍生试剂为N,O-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺、三甲基氯硅烷和吡啶的混合物。
4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述的N,O-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺、三甲基氯硅烷和吡啶的体积比为6-9：0.5-1.5：0.1-0.5。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述的N,O-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺、三甲基氯硅烷和吡啶的体积比为7-9：0.5-1.0：0.3-0.5。
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，S2-S4中，所述的反应为超声，所述的超声的时间为10-40min，功率为35-45KHz。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，S2-S4中，所述的反应为超声，所述
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，S1中，所述的杂质贮备溶液每1mL含有D-葡萄糖和蔗糖各0.02-0.04mg，D-葡萄糖酸-1,4-内酯和葡萄糖酸各0.12-0.17mg。
9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，S5中，色谱条件为：
10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，S5中，色谱条件为：
...【技术特征摘要】
1.一种d-(+)-葡萄糖酸δ-内酯中有关物质的检测方法，其特征在于，为柱前衍生-气相色谱检测方法，包含以下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，s1和s4中，所述的溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、乙腈和二氯甲烷中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，s2和s4中，所述的衍生试剂为n,o-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺、三甲基氯硅烷和吡啶的混合物。
4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述的n,o-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺、三甲基氯硅烷和吡啶的体积比为6-9：0.5-1.5：0.1-0.5。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述的n,o-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺、三甲基氯硅烷和吡啶的体积比为7...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈将，何匡，黄正伟，齐加奎，曾华燕，
申请(专利权)人：杭州永太生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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