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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物检测,具体涉及一种检测心脏病毒感染的装置及其应用。
技术介绍
1、心肌炎是一种常见的炎症性心脏疾病,其在青壮年心脏性猝死中的占比约为8.6%-12%。在临床实践中,新型冠状病毒2019(covid-19)患者往往会出现心脏损伤,其中心肌炎的发生率约为1%-7%。心肌炎的独特之处在于其初期症状并不显著。然而,随着炎症的逐步加剧,可能引发急性、致命的心血管事件,如心力衰竭、心源性休克,乃至猝死。因此,对心肌炎的早期精准检测至关重要,以便实施及时、积极的治疗,从而降低致命心血管事件的发生率。
2、病毒感染被认为是心肌炎的主要诱因,其中某些病毒与心肌炎的关系尤为紧密。首当其冲的是柯萨奇病毒(coxsackievirus),尤其是b组病毒,其与心肌炎的关联程度较高。b组病毒是一种肠道病毒,在人群中广泛存在,儿童感染率尤为较高。感染b组病毒后,患者可能出现发热、皮疹、肌肉疼痛等症状,严重时甚至可能导致心肌炎。其次,腺病毒(adenovirus)也是一种常见病毒,既可引发心肌炎,还可导致呼吸道感染等疾病。腺病毒广泛分布于自然界和人群中,主要通过飞沫传播。感染腺病毒后,患者可能出现发热、咳嗽、喉咙痛等症状,严重时可导致心肌炎。风疹病毒(rubella virus)虽较罕见引发心肌炎,但仍属潜在病因之一。风疹病毒主要通过飞沫传播,感染后表现为皮疹、发热、关节疼痛等症状。孕妇感染风疹病毒可能导致先天性畸形,严重时可能引发心肌炎。流感病毒(influenzavirus)同样是引发心肌炎的常见病毒,尤其在重症流感病例中可能
3、病毒性心肌炎的诊断主要尝试通过检测体液中的病毒,如血液或唾液。然而,现有的检测方法在诊断精度上尚存在一定的局限性。值得注意的是,病毒性心肌炎在早期治疗干预下具有恢复心脏功能的潜力。因此,及时准确的诊断对于采取早期治疗以预防慢性纤维化、避免心功能永久丧失,乃至预防心衰发生具有至关重要的作用。尽管病毒感染在淋巴细胞性心肌炎的发病过程中扮演着重要角色,但多数病例的pcr检测结果为阴性,仅细小病毒b19检测结果为阳性。在慢性心衰患者中,通过pcr分析,67%的心内膜活检样本中可检测到病毒(主要为pvb19),其中27%的样本显示由不同病原体引发的心肌感染。这些病毒的存在可能与心肌炎的慢性进程及持续性心肌损伤有关。因此,针对这些病毒的治疗策略或许能改善慢性心衰患者的病情。
4、感染心脏的病毒为噬心病毒,可以分成整合病毒和非整合病毒,目前临床和研究中使用的检测策略为使用单一的pcr技术对心肌组织进行某几种病毒的检测。该技术存在明显的技术漏洞,难以全面检测心脏中潜在的病毒感染序列,因此实现更全面地检测心脏病毒,需要构建新的心脏病毒感染检测策略。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足,本专利技术的目的在于提供一种检测心脏病毒感染的装置及其应用。本专利技术针对rna病毒,采用pan-pcr策略对已知的8大类rna病毒进行了全面检测,确保覆盖了所有已知的rna病毒。实现了分步检测心脏病毒感染,提升了检测的准确率和效率。
2、为达到此专利技术目的,本专利技术采用以下技术方案:
3、第一方面,本专利技术提供一种检测心脏病毒感染的装置,所述装置包括:
4、rna病毒检测模块,采用pan-pcr策略对已知的8大类rna病毒进行扩增检测,所述rna病毒包括冠状病毒(coronavirus)、丝状病毒(filamentous virus)、博卡病毒(bocavirus)、逆转录病毒(astrovirus)、流感病毒(influenza virus)、戊型肝炎病毒(hepatitis e virus)、埃博病毒71(eeterovirus 71)和副粘病毒(paramyxovirus);
5、dna病毒检测模块,采用捕获探针对dna病毒进行检测,所述捕获探针基于捕获测序检测的病毒及序列设计,所述dna病毒包括人类免疫缺陷病毒-1(humanimmunodeficiency virus-1)、人类t淋巴细胞病毒-1(human t-lymphotropic virus 1)、乙型肝炎病毒-a(hepatitis b virus-a)、疱疹病毒-6a(herpes virus-6a)、天花-巴氏病毒(epstein-barr virus)、腺相关病毒-2(adeno-associated virus-2)、人类乳头瘤病毒-16型(human papillomavirus type-16)、马里克氏病病毒(marek’s disease virus)、腺病毒(adenovirus)、梅克尔细胞多瘤病毒(merkel cell polyomavirus)、淋巴细胞绒毛膜病毒(lymphocytic choriomeningitis virus)、博纳病毒1(bornavirus 1)、丙型肝炎病毒(hepatitis c virus)、柯萨奇病毒b3(coxsackievirus b3)、甲型流感病毒(influenza avirus)和巨细胞病毒(cytomegalovirus);
6、宏基因组测序模块,对rna病毒检测模块和dna病毒检测模块结果均为阴性的样本进行病毒宏基因组测序。
7、目前感染心脏的病毒种类可以分成整合型(dna病毒)和非整合型(rna病毒)。对于rna病毒,目前的检测策略是pcr检测特定种类的病毒,并且临床上缺乏针对dna病毒的检测策略,虽然存在检测体液的方式,但是该方式的最大的缺陷是特异性差,无法确定感染位置。
8、本专利技术通过分步检测的策略实现对心脏组织进行病毒检测,是目前检测手段中最为全面的检测方法。首先对已知的rna病毒进行检测,通过8种已知的病毒属(可以涵盖目前所有的rna病毒种类),随后对dna病毒进行检测,候选的病毒是所有目前已知可以整合到心脏中的噬心病毒。当没有检测到已知的病毒类型时,进行宏基因检测实现全面的病毒筛选。
9、本专利技术中,所述pan-pcr策略是指:对病毒种属进行pcr检测。
10、优选地,扩增冠状病毒(coronavirus)的引物包括cov-fwd2和cov-rvs2;
11、cov-fwd2:ggcwccwcchggngarcaatt,seq id no.1;
12、cov-rvs2:ggwawccccaytgytgwayrtc,seq本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种检测心脏病毒感染的装置,其特征在于,所述装置包括:
2.根据权利要求1所述的检测心脏病毒感染的装置,其特征在于,扩增冠状病毒的引物包括CoV-FWD2和CoV-RVS2;
3.根据权利要求1或2所述的检测心脏病毒感染的装置,其特征在于,扩增流感病毒的引物包括FLUAPB1-R和FLUAPB1-NF;
4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测心脏病毒感染的装置,其特征在于,所述捕获探针覆盖DNA病毒的全部基因组。
5.一种检测心脏病毒感染的引物和探针组合,其特征在于,包括检测RNA病毒的引物和检测DNA病毒的捕获探针;
6.根据权利要求5所述的检测心脏病毒感染的引物和探针组合,其特征在于,扩增冠状病毒的引物包括CoV-FWD2和CoV-RVS2;
7.根据权利要求5或6所述的检测心脏病毒感染的引物和探针组合,其特征在于,所述捕获探针覆盖DNA病毒的全部基因组。
8.一种检测心脏病毒感染的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求5-7中任一项所述的检测心脏病毒感染的引物和探针组合。
< ...【技术特征摘要】
1.一种检测心脏病毒感染的装置,其特征在于,所述装置包括:
2.根据权利要求1所述的检测心脏病毒感染的装置,其特征在于,扩增冠状病毒的引物包括cov-fwd2和cov-rvs2;
3.根据权利要求1或2所述的检测心脏病毒感染的装置,其特征在于,扩增流感病毒的引物包括fluapb1-r和fluapb1-nf;
4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测心脏病毒感染的装置,其特征在于,所述捕获探针覆盖dna病毒的全部基因组。
5.一种检测心脏病毒感染的引物和探针组合,其特征在于,包括检测rna病毒的引物和检测dna病毒的捕获探针;
6.根据权利要求5所述的检测心脏病毒感染的引物和探针组合,其特征在于,扩增冠状病毒的引...
【专利技术属性】
技术研发人员:宋江平,花秀猛,孙哲,
申请(专利权)人:中国医学科学院阜外医院深圳医院深圳市孙逸仙心血管医院,
类型:发明
国别省市:
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