【技术实现步骤摘要】
本公开属于生物医药领域，涉及fxii/fxiia结合蛋白，编码fxii/fxiia结合蛋白的多核苷酸、载体，药物组合物及其医药用途。
技术介绍
1、凝血因子fxii是分子量约为80kda的血清糖蛋白，通过暴露于带负电荷的表面进行自激活(autoactivation)或者被激肽释放酶水解切割形成α-因子xiia，随后α-因子xiia通过胰蛋白酶进一步转化为β-fxiia而被激活。α-fxiia由n末端重链(约50kda)和c末端轻链(约28kda)组成，n末端重链包含接触结合结构域，c末端轻链包含催化中心。重链和轻链通过二硫键连接。β-fxiia是fxii的活性形式，分子量大约30kda,由完整轻链和2000da的重链片段通过二硫键链接组成(weidmann h,et al.2017，bba-mol cell res.1864:2118–2127；davoine c，et al.2020，eur j med chem.208:112753.)。
2、在凝血级联反应中，fxii驱动内源性凝血途径(接触途径)的凝血过程，对该凝血途径至关重要。在内源性凝血途径中，fxii将fxi活化成fxia，随后fxia激fix。fviiia与fxia的复合物随后激活fx，参与共同凝血途径。除了参与内源性凝血途径外，β-fxiia促进血浆前激肽释放酶的裂解，并作为激肽释放酶-激肽系统的一部分切割辅因子hk以释放缓激肽，来驱动炎症和调节血管通透性。β-fxiia也可以激活补体系统的组分，因此fxii参与血栓形成、血管调节和促炎症的过程(sc
3、驼科动物(如骆驼和羊驼)会产生一种独特的缺失轻链的重链抗体(hcab)，源于这种抗体的可变区片段(vhh)称为单域抗体(singledomain antibody，sdab)。单域抗体的分子量只有12-15kda，是传统抗体(包含四条链)的十分之一，其结构直径2.5nm、长4nm，是目前已知的最小的具有完整抗原结合活性的抗体。单域抗体同样含有3个cdr，其中cdr3对亲合力起到主要作用。与人抗体vh相比，单域抗体的cdr3更长，可以形成凸环(bulge loop)结构，能够深入抗原内部，从而更好地结合抗原。因而，vhh具有高亲合力和高特异性的特点。此外，单域抗体中fr2的疏水残基被亲水残基取代，水溶性更好，不易形成聚集体。与传统抗体相比，单域抗体具有高结合力、高特异性、高溶解度、高稳定性和高表达量等诸多优点。
4、目前，全球范围内尚没有靶向fxii的单域抗体药物上市。因此，开发能够提供低免疫原性、有效抑制血栓形成而不增加出血风险的抗fxii/fxiia的单域抗体药物，用于预防血栓及相关疾病治疗，是本领域亟需解决的重要问题。
技术实现思路
1、本公开提供一种fxii/fxiia结合蛋白，编码fxii/fxiia结合蛋白的多核苷酸、载体，药物组合物及其医药用途。
2、血清白蛋白结合蛋白
3、本公开提供血清白蛋白结合蛋白，其包含至少一个特异性结合血清白蛋白的免疫球蛋白单一可变结构域。
4、在一些实施方案中，血清白蛋白结合蛋白中的免疫球蛋白单一可变结构域包含如seq id no：25、32-41任一所示氨基酸序列中的cdr1、cdr2和cdr3，所述cdr是根据kabat、imgt、chothia、abm或contact编号系统定义的。
5、一些具体的实施方案中，所述cdr是根据kabat编号系统定义的。
6、在一些实施方案中，血清白蛋白结合蛋白中的免疫球蛋白单一可变结构域包含如seq id no：26所示的cdr1，和/或如seq id no：27所示的cdr2，和/或如seq id no：28所示的cdr3。
7、在一些实施方案中，血清白蛋白结合蛋白中的免疫球蛋白单一可变结构域包含如seq id no：26-28所示的cdr1、cdr2和cdr3。
8、在一些实施方案中，提供血清白蛋白结合蛋白，其免疫球蛋白单一可变结构域包含的cdr1与前述任一cdr1相比，具有0、1、2、3、4或5个氨基酸突变；和/或，免疫球蛋白单一可变结构域包含的cdr2与前述任一cdr2相比，具有0、1、2、3、4或5个氨基酸突变；和/或，免疫球蛋白单一可变结构域包含的cdr3与前述任一cdr3相比，具有0、1、2、3、4或5个氨基酸突变的cdr3。
9、在一些具体的实施方案中，上述氨基酸突变为保守的替换、取代或修饰，和/或不影响功能的缺失和/或添加。
10、在一些实施方案中，本血清白蛋白结合蛋白中的免疫球蛋白单一可变结构域，包括前述cdr1、cdr2和cdr3中的任意1个或任意组合(例如，任意2个或任意3个的组合)。
11、在一些实施方案中，前述免疫球蛋白单一可变结构域为骆驼源的。
12、在一些实施方案中，前述免疫球蛋白单一可变结构域为经过以下任一项改造的：人源化、亲合力成熟、去除t细胞表位、降低抗体脱酰胺、降低抗体聚集、降低抗体异构化、或其组合。
13、在一些实施方案中，免疫球蛋白单一可变结构域是人源化改造的。一些具体的实施方案中，人源化改造使用的重链可变区种系基因ighv3-23和/或ighv3-66。
14、在一些实施方案中，人源化的免疫球蛋白单一可变结构域在以下位置中的至少一处包含氨基酸突变：第20、23、27、28、29、30、37、44、45、47、49、74、78、83和84位。
15、一些具体的实施方案中，人源化的免疫球蛋白单一可变结构域包含至少一种如下所示突变：
16、20v，23v，27l、27y或27n，28p、28i、28s或28a，29y、29f、29p、本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.FXII/FXIIa结合蛋白，其包含特异性结合FXII/FXIIa的免疫球蛋白单一可变结构域，所述免疫球蛋白单一可变结构域包含选自1)-4)任一项的CDR1、CDR2和CDR3：
2.根据权利要求1所述的FXII/FXIIa结合蛋白，其中，所述免疫球蛋白单一可变结构域为人源化、亲合力成熟、去除T细胞表位、降低抗体脱酰胺和/或降低抗体异构化改造的；
3.根据权利要求1或2所述的FXII/FXIIa结合蛋白，其中，所述特异性结合FXII/FXIIa的免疫球蛋白单一可变结构域包含如SEQ ID NO：3-5、17-23任一所示或与之具有至少80％、至少90％同一性的氨基酸序列；
4.FXII/FXIIa结合蛋白，其包含第一结构域和第二结构域；
5.根据权利要求4所述的FXII/FXIIa结合蛋白，其中，所述FXII/FXIIa结合蛋白包含人免疫球蛋白Fc区；优选地，所述人免疫球蛋白Fc区是来源于人IgG1、IgG2或IgG4的Fc区。
6.根据权利要求4-5任一项所述的FXII/FXIIa结合蛋白，其中，所述第二结构域包括
7.根据权利要求6所述的FXII/FXIIa结合蛋白，其中，所述特异性结合HSA的免疫球蛋白单一可变结构域包含如SEQ ID NO：25、32-41任一所示或与之具有至少80％、至少90％同一性的氨基酸序列。
8.根据权利要求4-7任一项所述的FXII/FXIIa结合蛋白，其中：
9.如权利要求4-8任一项所述的FXII/FXIIa结合蛋白，其包含如SEQ ID NO：14-16、24、47-50任一项所示或与之具有至少80％、至少90％同一性的氨基酸序列。
10.多核苷酸，其编码权利要求1-9任一项所述的FXII/FXIIa结合蛋白。
11.载体，其包含权利要求10所述的多核苷酸。
12.宿主细胞，其包含或表达权利要求10所述的多核苷酸，或权利要求11所述的载体。
13.药物组合物，其包含权利要求1-9任一项所述的FXII/FXIIa结合蛋白，权利要求10所述的多核苷酸，或权利要求11所述的载体；
14.制备FXII/FXIIa结合蛋白的方法，包括：
15.权利要求1-9任一项所述的FXII/FXIIa结合蛋白，权利要求10所述的多核苷酸，权利要求11所述的载体，或权利要求13所述的药物组合物在如下(1)-(5)至少一项中的用途：
...【技术特征摘要】
1.fxii/fxiia结合蛋白，其包含特异性结合fxii/fxiia的免疫球蛋白单一可变结构域，所述免疫球蛋白单一可变结构域包含选自1)-4)任一项的cdr1、cdr2和cdr3：
2.根据权利要求1所述的fxii/fxiia结合蛋白，其中，所述免疫球蛋白单一可变结构域为人源化、亲合力成熟、去除t细胞表位、降低抗体脱酰胺和/或降低抗体异构化改造的；
3.根据权利要求1或2所述的fxii/fxiia结合蛋白，其中，所述特异性结合fxii/fxiia的免疫球蛋白单一可变结构域包含如seq id no：3-5、17-23任一所示或与之具有至少80％、至少90％同一性的氨基酸序列；
4.fxii/fxiia结合蛋白，其包含第一结构域和第二结构域；
5.根据权利要求4所述的fxii/fxiia结合蛋白，其中，所述fxii/fxiia结合蛋白包含人免疫球蛋白fc区；优选地，所述人免疫球蛋白fc区是来源于人igg1、igg2或igg4的fc区。
6.根据权利要求4-5任一项所述的fxii/fxiia结合蛋白，其中，所述第二结构域包括如下至少一种：hsa、hsa结合结构域、免疫球蛋白fc区、特异性结合fxii/fxiia的免疫球蛋白单一可变结构域；
7.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：王雷，申晨曦，孔冰洁，刘潇，
申请(专利权)人：北京拓界生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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