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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学检测,特别涉及一种动物血清中虾青素含量的检测方法。
技术介绍
1、虾青素化学名为:3,3’-二羟基-4,4’二酮基-β,β’胡萝卜素,红色固体粉末,具有脂溶性,不溶于水,但溶于有机溶剂。虾青素广泛存在于生物界中,尤其是水生动物如虾、蟹、鱼及鸟类的羽毛中;也可以从藻类和微生物中获得。
2、虾青素的分子结构:共轭双键体系使得它在可见光下呈现出鲜艳的红色;羟基与酮基赋予虾青素一定的水溶性和独特的化学性质;虾青素的分子结构在两个末端β-酮基团的3和3’位上由两个手性碳,可以产生三种旋光异构体:3s,3’s、3r,3’s、(3r,3’r)-ax。
3、虾青素的分子结构使其能够稳定地捕获自由基,从而防止氧化应激对细胞造成损害。除了抗氧化外,虾青素还具有抗炎、抗癌、抗疲劳等多种生物活性,在保健品、化妆品、饲料等领域有着广泛的应用。
4、通过分光光度法可实现对虾青素含量的精确定量分析;高效液相色谱法具有分离速度快,在线检测灵敏度高等优点,是美国nfia(美国饲料协会)规定的测定方法。由于虾青素的优异功效,目前已经广泛应用,也包括畜牧行业,因此,本专利技术旨在建立一种更简单、快速有效的动物血清中虾青素含量的检测方法。
技术实现思路
1、基于上述内容,本专利技术目的在于提供一种动物血清中虾青素含量的检测方法,本专利技术提供的方法可以快速、简单、准确的测定动物血清中虾青素的含量。
2、为了实现上述目的,本专利技术提供以下技术方案:一种动物
3、将动物血清与有机溶剂混合后,振荡、离心,之后将离心所得上清液浓缩、过滤,得到待测液;
4、采用lc-ms/ms对所述待测液进行检测;
5、所述有机溶剂为体积比1:4的甲醇和二氯甲烷的混合溶液。
6、在本专利技术中,甲醇和二氯甲烷的体积比为1:4时样品溶解性和提取纯度会较高,若比例发生变化,提取样品浓度会降低,溶解不完全。
7、在本专利技术一些实施方式中,所述动物血清为肉鸡血清。
8、在本专利技术一些实施方式中,所述动物血清与有机溶剂的体积比为0.1:(1-1.5)。
9、在本专利技术一些实施方式中,所述振荡为在振荡器中进行振荡或者超声振荡;当所述振荡为在振荡器中进行振荡时,所述振荡的频率为30-60hz,优选为30hz,时间为1-2min,优选为1min;在所述振荡器中进行振荡时,还包括在动物血清与有机溶剂的混合溶液中加入钢珠。
10、当所述振荡为超声振荡时,所述超声的频率为50hz,时间为10min。
11、超声振荡的作用是通过震荡溶解,提高反应效率和效果。
12、在本专利技术一些实施方式中,所述离心的条件为:在4℃以14000r/min的转速离心5min。
13、本专利技术在4℃低温离心保证提取样品不会因为高温而失活。
14、在本专利技术一些实施方式中,所述浓缩为:将所述上清液氮吹吹干后,用甲醇复溶。
15、在本专利技术一些实施方式中,所述过滤为用0.22μm的滤膜过滤。
16、在本专利技术一些实施方式中,所述lc-ms/ms的参数为:流动相a为体积比1:99的甲酸和水的混合溶液,流动相b为体积比1:99的甲酸和乙腈的混合溶液,流动相a和流动相b的流速均为0.3μl/min,洗脱方式为等度洗脱,色谱柱为hss t3,色谱柱的柱温为40℃,进样量为2μl。
17、在本专利技术一些实施方式中,所述色谱柱的规格为:1.8μm,2.1×100mm。
18、本专利技术公开了以下技术效果:
19、本专利技术用甲烷和二氯甲烷溶解动物组织样品中的虾青素,提高了提取液对样品中虾青素的提取效果,从而提高了虾青素含量检测的准确度。
20、本专利技术提供的方法简单、节省时间,同时也保证了准确性。试验证明,本专利技术对动物组织虾青素含量检测结果良好,同时节省时间,操作步骤简便。
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1.一种动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,所述动物血清为肉鸡血清。
3.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,所述动物血清与有机溶剂的体积比为0.1:(1-1.5)。
4.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,所述离心的条件为:在4℃以14000r/min的转速离心5min。
5.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,所述浓缩为:将所述上清液氮吹吹干后,用甲醇复溶。
6.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,所述过滤为用0.22μm的滤膜过滤。
7.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,所述LC-MS/MS的参数为:流动相A为体积比1:99的甲酸和水的混合溶液,流动相B为体积比1:99的甲酸和乙腈的混合溶液,流动相A和流动相B的流速均为0.3μL/min,洗脱方式为等度洗脱,色谱柱为HSS
...【技术特征摘要】
1.一种动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,所述动物血清为肉鸡血清。
3.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,所述动物血清与有机溶剂的体积比为0.1:(1-1.5)。
4.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检测方法,其特征在于,所述离心的条件为:在4℃以14000r/min的转速离心5min。
5.根据权利要求1所述的动物血清中虾青素含量的检...
【专利技术属性】
技术研发人员:郝月,毛瑞宵,陈亮,张宏福,张连华,
申请(专利权)人:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,
类型:发明
国别省市:
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