【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于兽用生物制品领域，具体涉及一种重组多肽en-tdlv及其疫苗与应用。
技术介绍
1、毒害艾美耳球虫(eimeria necatrix,e.necatrix)是一种专性细胞内寄生的顶复门原虫，可引起严重危害集约化养鸡业生产的鸡球虫病。在无预防措施或预防失败(如因抗药性问题致药物无效)的情况下，鸡发病率可达30％-100％，致死率可高达80％。全球每年因鸡球虫病引起的经济损失超过30亿美元以上。目前对鸡球虫病的防控仍主要是执行“在饲料中添加各种抗球虫药进行药物防控”和“活卵囊疫苗进行疫苗防控”的技术方法。但鸡球虫广泛而严重的抗药性，以及活卵囊疫苗存在的潜在散毒风险使鸡球虫病的防控面临严峻挑战，新的抗球虫药物及疫苗研制成为亟待解决的问题。然而，人们至今对球虫与宿主细胞的详细互作机制尚无系统认识，造成新型抗球虫药物及分子疫苗的研制面临巨大困难。
技术实现思路
1、本专利技术第一方面的目的，在于提供一种重组多肽。
2、本专利技术第二方面的目的，在于提供一种核酸分子。
3、本专利技术第三方面的目的，在于提供一种重组载体。
4、本专利技术第四方面的目的，在于提供一种重组细胞。
5、本专利技术第五方面的目的，在于提供本专利技术第一方面重组多肽的制备方法。
6、本专利技术第六方面的目的，在于提供一种疫苗。
7、本专利技术第七方面的目的，在于提供一种试剂盒。
8、本专利技术第八方面的目的，在于提供一种应用
9、为了实现本专利技术上述的目的，本专利技术采取的技术方案是：
10、本专利技术的第一个方面，提供一种重组多肽，包括毒害艾美耳球虫的cdc50蛋白和主要协同转运蛋白。
11、优选地，所述重组多肽从n端到c端可以为cdc50蛋白、主要协同转运蛋白，或主要协同转运蛋白、cdc50蛋白。
12、在本专利技术的一个实施例中，所述重组多肽从n端到c端为cdc50蛋白、主要协同转运蛋白。
13、优选地，所述重组多肽包括连接肽、标签中的至少一种。
14、优选地，所述重组多肽的氨基酸序列如seq id no：3所示。
15、优选地，所述重组多肽的氨基酸序列还可以为与选自seq id no：3的氨基酸序列实质上相似的序列。
16、优选地，所述“实质上相似”意指给定氨基酸序列与参比序列共有至少95％的同一性，例如，96％、97％、98％、98.5％、99％、99.5％。或者，意指给定氨基酸序列与参比序列具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10个氨基酸的区别，对于多肽，这种区别优选为氨基酸的置换或者缺失。
17、优选地，实质上相似的序列亦保留多肽的能够检测内源性抗体效率高的独特活性。通常置换视为保守置换，例如在脂肪族氨基酸ala、val、leu和ile中的彼此置换、羟基残基ser和thr的互换、酸性残基asp和glu的交换、酰胺残基asn和gln之间的置换、碱性残基lys和arg的交换以及芳香残基phe、tyr间的置换。
18、本专利技术的第二个方面，提供一种核酸分子，编码本专利技术第一个方面的重组多肽。
19、优选地，所述核酸可以为dna或rna。
20、优选地，所述核酸针对宿主进行密码子的优化。
21、在本专利技术的一些实施方式中，所述核酸的核苷酸序列如seq id no：1或seq idno：2所示。
22、优选地，所述重组多肽的核苷酸序列还可以为与选自seq id no：1或seq id no：2的核苷酸序列实质上相似的序列。
23、优选地，所述“实质上相似”意指给定核苷酸序列与参比序列共有至少95％的同一性，例如，96％、97％、98％、98.5％、99％、99.5％。或者，意指给定核苷酸序列与参比序列具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10个核酸的区别。
24、本专利技术第三个方面，提供一种重组载体，包含本专利技术第二个方面的核酸分子。
25、优选地，所述“载体(vector)”是指，可将多聚核苷酸插入其中的一种核酸运载工具。当载体能使插入的多核苷酸编码的蛋白获得表达时，载体称为表达载体。载体可以通过转化，转导或者转染导入宿主细胞，使其携带的遗传物质元件在宿主细胞中获得表达。载体是本领域技术人员公知的，包括但不限于：质粒；噬菌粒；柯斯质粒；人工染色体，例如酵母人工染色体(yac)、细菌人工染色体(bac)或p1来源的人工染色体(pac)；噬菌体如λ噬菌体或m13噬菌体及动物病毒等。可用作载体的动物病毒包括但不限于，逆转录酶病毒(包括慢病毒)、腺病毒、腺相关病毒、疱疹病毒(如单纯疱疹病毒)、痘病毒、杆状病毒、乳头瘤病毒、乳头多瘤空泡病毒(如sv40)。在一些实施方式中，本专利技术所述载体中包含基因工程中常用的调控元件，例如增强子、启动子、内部核糖体进入位点(ires)和其他表达控制元件(例如转录终止信号，或者多腺苷酸化信号和多聚u序列等)。
26、本专利技术的第四个方面，提供一种重组细胞，包含本专利技术第二个方面的核酸分子、和/或本专利技术第三个方面的重组载体。
27、优选地，所述“重组细胞”是指，可用于导入载体的细胞，其包括但不限于，如大肠杆菌或枯草菌等的原核细胞，如酵母细胞或曲霉菌等的真菌细胞，如s2果蝇细胞或sf9等的昆虫细胞，或者如纤维原细胞，cho细胞，cos细胞，nso细胞，hela细胞，bhk细胞，hek 293细胞或鸡细胞等动物细胞。重组细胞优选为真核细胞，更优选为禽类动物细胞。重组细胞通常不具有全能性的动物细胞(优选禽类细胞，例如鸡细胞)，例如不包括受精卵、胚胎、生殖干细胞、胚胎干细胞等。
28、本专利技术的第五个方面，提供本专利技术第一个方面的重组多肽的制备方法，包括以下步骤：
29、培养本专利技术第四个方面所述的重组细胞，分离纯化，得到。
30、本专利技术的第六个方面，提供一种疫苗，包括本专利技术第一个方面的重组多肽、和/或本专利技术第二个方面的核酸分子、和/或本专利技术第三个方面的重组载体。
31、在一些实施方式中，所述的疫苗进一步包含佐剂和/或药学上可接受的载体。
32、优选地，“佐剂”是这样的物质，其能够有利于或放大免疫学事件级联，最终导致更好的免疫应答，即针对抗原的整合的身体应答。佐剂通常不是免疫应答发生所需的，但有利于或放大该应答。
33、优选地，佐剂还可以为铝盐、脂质体、不完全弗氏佐剂、完全弗氏佐剂、明矾佐剂、mf59、单磷酰脂质a、鞭毛蛋白、cpg-odn以及poly(i：c)中的至少一种。在一些实施方案中，所述铝盐选自磷酸铝、磷酸铝钾和氢氧化铝。其他众所周知的佐剂包括烃油、聚合物、皂苷类和/或由水中的丙烯酸钠的凝胶颗粒构成的佐剂，例如，montanidetm pet gel atm(seppic,paris france)。一种低分子量共聚物佐剂可以在溶液中形成交联以变成高分子量凝胶，例如polygentm(mvpla本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种重组多肽，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的重组多肽，其特征在于：
3.编码权利要求1或2任一项所述的重组多肽的核酸分子。
4.根据权利要求3所述的核酸分子，其特征在于：
5.一种重组载体，包含权利要求3或4任一项所述的核酸分子。
6.一种重组细胞，包含权利要求3或4任一项所述的核酸分子、和/或权利要求5所述的重组载体；
7.权利要求1所述的重组多肽的制备方法，包括以下步骤：
8.一种疫苗，包括权利要求1或2任一项所述的重组多肽、权利要求3或4任一项所述的核酸分子、和/或权利要求5所述的重组载体；
9.一种试剂盒，包括权利要求8所述的疫苗，和用于接种所述疫苗的容器。
10.权利要求1或2任一项所述的重组多肽、权利要求3或4任一项所述的核酸分子、权利要求5所述的重组载体、和/或权利要求6所述的重组细胞、和/或权利要求8所述的疫苗在制备防治毒害艾美耳球虫的产品中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种重组多肽，其特征在于：
2.根据权利要求1所述的重组多肽，其特征在于：
3.编码权利要求1或2任一项所述的重组多肽的核酸分子。
4.根据权利要求3所述的核酸分子，其特征在于：
5.一种重组载体，包含权利要求3或4任一项所述的核酸分子。
6.一种重组细胞，包含权利要求3或4任一项所述的核酸分子、和/或权利要求5所述的重组载体；
7.权利要求1所述的重组多肽的制备方法，...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱易斌，陈祥杰，孙铭飞，廖申权，戚南山，李娟，吕敏娜，蔡海明，宋勇乐，林栩慧，吴汝森，张小慧，张健騑，
申请(专利权)人：广东省农业科学院动物卫生研究所，
类型：发明
国别省市：
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