【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测，更具体地说，它涉及一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡app的男性骨质健康检测试剂盒。
技术介绍
1、
2、
3、目前临床常用筛查骨质疏松的方法主要有以下几种：1.骨密度测定，常用方法有双能x线吸收测定法、q-ct法等，但这类方法只测量骨密度，并没有考虑骨质量和骨微结构，且因为骨密度流失非常缓慢，故无法检测骨质疏松的早期变化，另外该方法不适用于所有人群，例如肥胖患者或患有其他疾病的患者。2.检验方法常用的有骨转化标志物，包括骨形成标志物、骨吸收标志物，虽然不能直接用于骨质疏松症的诊断，但有助于分型、判断骨转换类型、预测骨丢失速率、评估骨折风险和监测药物疗效，另外，性腺激素、甲状腺功能、电解质等也可以用于寻找骨质疏松的致病因素并有助于鉴别继发性骨质疏松，但这些筛选方法存在着灵敏度低、不能直接诊断骨质疏松等局限性。
4、血清来源细胞外囊泡已被报道与骨代谢调控密切相关，细胞外囊泡中的非编码rna可以作为骨质疏松早期诊断的生物标志物，有助于早期诊断和干预；现有骨质疏松缺乏有效的早期筛查与诊断指标，通用的骨密度测定对早期筛查阳性率仅为30％-40％，会有大量患者忽视骨质疏松问题，直至出现骨折等危险的并发症，因此目前亟待一种诊断效能更高，或者辅助骨密度测定的生物标志物和联合检测手段。
5、因此，本专利技术旨在提供一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡app的男性骨质健康检测试剂盒，用以解决上述问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是
2、本专利技术的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡app的男性骨质健康检测试剂盒，所述试剂盒采用血清细胞外囊泡app作为骨质疏松早期筛查血清生物标志物。
3、本专利技术进一步设置为：所述试剂盒通过血清细胞外囊泡app和雄激素测定联合，用于调高骨质疏松的诊断效能。
4、本专利技术进一步设置为：所述血清细胞外囊泡app的测定方法包括以下步骤：
5、s1、将板子、试剂和血清样本平衡至室温；
6、s2、使用bca法对血清细胞外囊泡进行蛋白定量，取蛋白总量33.6μg细胞外囊泡，用1×cell extractionbufferptr补齐体积至60μl；
7、s3、从铝箔袋中取出酶标板，设置标准品孔和样本孔，分别加标准品或定量后的血清细胞外囊泡样本50μl；
8、s4、每孔加50μlantibody cocktail试剂；
9、s5、覆上板贴，室温，400rpm振荡孵育60min；
10、s6、弃去孔内液体，在实验台上铺垫吸水纸，酶标板朝下拍，甩干孔内剩余液体，每孔加350μlwash bufferpt，静置10s后甩干，共洗3次；
11、s7、每孔加100μl tmb development solution，室温避光，400rpm振荡孵育10min；
12、s8、每孔加100μl stop solution，振荡孵育1min；
13、s9、用酶标仪在450nm波长依序测量各孔的od值；
14、s10、将所有孔的od值都减去浓度为0的标准品od值，对标准曲线使用四次曲线进行拟合，将每孔减去空白孔后的od值代入方程中，计算血清细胞外囊泡中app浓度。
15、本专利技术还提供一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡app的男性骨质健康检测试剂盒在制备检测男性骨质健康产品中的应用。
16、综上所述，本专利技术具有以下有益效果：
17、1、本专利技术中通过血清细胞外囊泡app单独作为骨密度的标志物，在骨质减少患者和骨质疏松患者血清细胞外囊泡中表达逐步升高，可用于骨质疏松早期诊断；
18、2、本专利技术中通过将血清细胞外囊泡app作为骨质疏松早期筛查血清生物标志物，并且将其与雄激素(tes)测定联合，能够有效的调高骨质疏松的诊断效能；
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡APP的男性骨质健康检测试剂盒，其特征是：所述试剂盒采用血清细胞外囊泡APP作为骨质疏松早期筛查血清生物标志物。
2.根据权利要求1所述的一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡APP的男性骨质健康检测试剂盒，其特征是：所述试剂盒通过血清细胞外囊泡APP和雄激素测定联合，用于调高骨质疏松的诊断效能。
3.根据权利要求2任意一项所述的一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡APP的男性骨质健康检测试剂盒，其特征是：所述血清细胞外囊泡APP的测定方法包括以下步骤：
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡APP的男性骨质健康检测试剂盒在制备检测男性骨质健康产品中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡app的男性骨质健康检测试剂盒，其特征是：所述试剂盒采用血清细胞外囊泡app作为骨质疏松早期筛查血清生物标志物。
2.根据权利要求1所述的一种基于血清睾酮联合细胞外囊泡app的男性骨质健康检测试剂盒，其特征是：所述试剂盒通过血清细胞外囊泡app和雄激素测定联合，用于调高骨质疏松...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢雍，潘蒙，张泽源，杨焱，曹富铭，张里程，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院第四医学中心，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。