【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于检测meiob基因突变的引物组及其应用、靶向meiob基因转录产物mrna的反义寡核苷酸分子及其应用、靶向meiob蛋白的小分子及其应用的，具体涉及一种meiob基因的突变检测引物组、靶向其mrna的反义寡核苷酸以及针对meiob蛋白的小分子药物及应用。
技术介绍
1、减数分裂的精准完成对遗传信息的稳定传递至关重要。2013年，通过对小鼠模型的减数分裂蛋白组学研究，专利技术人(罗孟成)率先发现一种参与减数分裂i期前期同源染色体重组的单链dna结合蛋白meiob(meiosis specific with ob domain)。通过研究其功能发现meiob异常会导致雄性精子发育停滞在减数分裂i期前期和雌性卵泡早期凋亡；随着对人源减数分裂相关蛋白研究的进展，2014年发现meiob因具有癌症高表达特性而被提名为新型癌症抗原并有可能作为免疫治疗的靶标；2016年通过对19名睾丸癌患者的睾丸组织进行转录组分析，证实meiob属于极端高表达睾丸癌相关基因(extremely highly expressedct genes,eectgs)；2017年通过对患有无精症的同一家系中成员进行全基因组测序，首次发现meiob突变作为遗传致病因素；2019年有学者发现家族性原发卵巢功能不全与人源meiob异常相关；2020年，通过对25人特发性少精症或非梗阻性无精症的队列进行ngs(next-generation sequencing)分析，发现，多数人存在hmeiob基因序列异常；同年另一研究中，通过对147人的精子发生阻滞
2、综上，通过检测不孕不育患者meiob基因序列对明确特发性不孕不育的病因及靶向治疗具有重要的临床意义；通过靶向抑制meiob基因表达或蛋白功能可阻断精子发生进程，达到避孕效果。
技术实现思路
1、本专利技术的目的之一在于提供一种用于检测meiob基因突变的引物组及其应用，可检测已发现的hmeiob基因突变位点和hmeiob基因中潜在的突变位点。
2、本专利技术的目的之二在于提供一种靶向meiob基因转录产物mrna的反义寡核苷酸分子及其应用，可靶向结合hmeiob基因的转录产物而抑制其表达，其全硫代修饰提高了分子的稳定性和半衰期，且分子本身无毒并可降解。
3、本专利技术的目的之三在于提供一种靶向meiob蛋白的小分子及其类似物及其应用，可以用于阻断meiob功能及精子形成，实现避孕效果，同时可用于降低肿瘤细胞中meiob蛋白的表达水平和细胞增殖能力，实现靶向治疗。
4、本专利技术实现目的之一所采用的方案是：一方面，提供一种用于检测meiob基因突变的引物组，可检测已发现的hmeiob(人源meiob基因)基因突变位点和hmeiob基因中潜在的突变位点，包括以下引物对：
5、针对外显子1的引物组的核苷酸序列如seq id no.1和seq id no.2所示；
6、针对外显子2的引物组的核苷酸序列如seq id no.3和seq id no.4所示；
7、针对外显子3的引物组的核苷酸序列如seq id no.5和seq id no.6所示；
8、针对外显子4的引物组的核苷酸序列如seq id no.7和seq id no.8所示；
9、针对外显子5的引物组的核苷酸序列如seq id no.9和seq id no.10所示；
10、针对外显子6的引物组的核苷酸序列如seq id no.11和seq id no.12所示；
11、针对外显子7的引物组的核苷酸序列如seq id no.13和seq id no.14所示；
12、针对外显子8、9的引物组的核苷酸序列如seq id no.15和seq id no.16所示；
13、针对外显子10的引物组的核苷酸序列如seq id no.17和seq id no.18所示；
14、针对外显子11的引物组的核苷酸序列如seq id no.19和seq id no.20所示；
15、针对外显子12的引物组的核苷酸序列如seq id no.21和seq id no.22所示；
16、针对外显子13的引物组的核苷酸序列如seq id no.23和seq id no.24所示。
17、优选地，所述引物组可以覆盖人源meiob基因的整个外显子及外显子末端的内含子。
18、所述引物组可以用于pcr反应来扩增hmeiob的不同外显子序列，不同序列可以覆盖hmeiob基因的整个外显子及每个外显子末端的内含子。
19、另一方面，提供一种含有所述的引物组的检测人源meiob基因突变的试剂盒。
20、具体的，提供一种含有所述的引物组的检测非梗阻性无精症或早发性卵巢功能不全的试剂盒。
21、本专利技术实现目的之二所采用的方案是：一方面，提供一种靶向meiob基因转录产物mrna的反义寡核苷酸分子，其为单链dna，核苷酸序列为：atttatcgtgcagcccaaagt，序列长度为21bp，两端各有3个锁核酸，修饰方式为全硫代修饰。
22、优选地，所述反义寡核苷酸分子通过碱基互补识别mrna，抑制meiob蛋白的表达。
23、另一方面，提供一种所述的靶向meiob基因转录产物mrna的反义寡核苷酸分子的应用，通过将所述反义寡核苷酸分子与培养基共孵育的方式降低细胞中meiob基因的mrna含量，或通过睾丸注射所述反义寡核苷酸分子的方式来降低睾丸中meiob基因的mrna含量。
24、具体的，提供一种所述的靶向meiob基因转录产物mrna的反义寡核苷酸分子的应用，通过将所述反义寡核苷酸分子与培养基共孵育的方式降低细胞中hmeiob基因的mrna含量。
25、或者，提供另一种所述的靶向meiob基因转录产物mrna的反义寡核苷酸分子的应用，通过睾丸注射所述反义寡核苷酸分子的方式来降低小鼠睾丸中mmeiob基因(小鼠meiob基因)的mrna含量，给药方式为阴囊局部注射，给药剂量为0.33nmol/g，观察时长为72小时。
26、具体的，用于制备抑制meiob基因转录产物mrna的表达或抑制meiob蛋白的表达的产品。
27、本专利技术实现目的之三所采用的方案是：一种靶向meiob蛋白的小分子及其类似物，其分子结构如下所示的至少一种，
28、
29、优选地，所述靶向meiob蛋白的小分子可以通过结合meiob蛋白来抑制meiob与spata22的结合。
30、优选地，所述靶向meiob蛋白的小分子及其类似物与meiob蛋白结合是可逆的，随着浓度降低可迅速本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于检测MEIOB基因突变的引物组，其特征在于，可检测已发现的hMEIOB基因突变位点和hMEIOB基因中潜在的突变位点，包括以下引物对：
2.一种用于检测MEIOB基因突变的引物组的应用，其特征在于，应用于制备诊断非梗阻性无精症或早发性卵巢功能不全的产品。
3.一种靶向MEIOB基因转录产物mRNA的反义寡核苷酸分子，其特征在于，其为单链DNA，核苷酸序列为：ATTTATCGTGCAGCCCAAAGT，序列长度为21bp，两端各有3个锁核酸，修饰方式为全硫代修饰。
4.根据权利要求3所述的靶向MEIOB基因转录产物mRNA的反义寡核苷酸分子，其特征在于，所述反义寡核苷酸分子通过碱基互补识别mRNA，抑制MEIOB蛋白的表达或抑制MEIOB基因转录产物mRNA的表达。
5.一种根据权利要求3或4所述的靶向MEIOB基因转录产物mRNA的反义寡核苷酸分子的应用，其特征在于：用于制备抑制MEIOB基因转录产物mRNA的表达或抑制MEIOB蛋白的表达的产品。
6.一种根据权利要求3或4所述的靶向MEIOB基因转录产物m
7.一种靶向MEIOB蛋白的小分子及其类似物，其特征在于，其分子结构为如下所示中的至少一种，
8.根据权利要求7所述的靶向MEIOB蛋白的小分子及其类似物，其特征在于，所述靶向MEIOB蛋白的小分子及其类似物可以通过结合MEIOB蛋白来抑制MEIOB与SPATA22的结合，所述靶向MEIOB蛋白的小分子及其类似物与MEIOB蛋白结合是可逆的，随着浓度降低可迅速从MEIOB蛋白表面解离。
9.一种根据权利要求7或8中所述的靶向MEIOB蛋白的小分子及其类似物的应用，其特征在于，用于制备抑制细胞中MEIOB与SPATA22的结合或抑制睾丸中精子的产生的产品。
10.一种根据权利要求7或8中所述的靶向MEIOB蛋白的小分子及其类似物的应用，其特征在于，用于制备避孕药物。
11.一种根据权利要求7或8中所述的靶向MEIOB蛋白的小分子及其类似物的应用，其特征在于，用于制备抗MEIOB高表达肿瘤药物。
...【技术特征摘要】
1.一种用于检测meiob基因突变的引物组，其特征在于，可检测已发现的hmeiob基因突变位点和hmeiob基因中潜在的突变位点，包括以下引物对：
2.一种用于检测meiob基因突变的引物组的应用，其特征在于，应用于制备诊断非梗阻性无精症或早发性卵巢功能不全的产品。
3.一种靶向meiob基因转录产物mrna的反义寡核苷酸分子，其特征在于，其为单链dna，核苷酸序列为：atttatcgtgcagcccaaagt，序列长度为21bp，两端各有3个锁核酸，修饰方式为全硫代修饰。
4.根据权利要求3所述的靶向meiob基因转录产物mrna的反义寡核苷酸分子，其特征在于，所述反义寡核苷酸分子通过碱基互补识别mrna，抑制meiob蛋白的表达或抑制meiob基因转录产物mrna的表达。
5.一种根据权利要求3或4所述的靶向meiob基因转录产物mrna的反义寡核苷酸分子的应用，其特征在于：用于制备抑制meiob基因转录产物mrna的表达或抑制meiob蛋白的表达的产品。
6.一种根据权利要求3或4...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗孟成，徐亚廷，苗林，许磊，吴月蓉，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：
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