【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种嵌合启动子及其用途，特别是涉及一种由两个彼此异源的dna分子嵌合构成的新型组成型启动子及其用途。
技术介绍
1、应用转基因技术可在植物物种中引入农学上希望的性状或特征。通常，希望的性状包括改善营养价值品质、增加产量、赋予有害生物抗性或疾病抗性、增加干旱和胁迫耐受性、改善园艺品质(例如，色素沉着和生长)、赋予除草剂耐受性、使得能够由植物产生工业上有用的化合物和/或材料和/或使得能够产生药物。众所周知，合适的调控元件的存在才能在植物细胞中获得异源基因的高效表达。
2、调控元件包括增强子、启动子、前导序列、内含子和3’非翻译区域，并且可用于植物分子生物学和植物遗传工程领域中。启动子在控制基因表达方面起关键作用，其可以决定异源dna序列在生物体内表达的时间和位置。植物基因工程中常用的启动子按其作用方式和功能可分为三类，例如，在某些物理或化学信号的刺激下可提高基因转录水平的诱导型启动子、或仅在植物特定组织中表达基因的组织特异性启动子、或对整个植物组织进行组成型表达的组成型启动子。因此可以在转化载体的构建体中包含核心启动子序列，以便引起异源dna序列在转基因植物中以不同方式表达。
3、通过使用基因工程技术从基因方面改变植物并且因此产生具有特定有用性状的植物产品需要获得多种启动子。启动子数目的积累将使植物基因产品开发过程中能够以所需水平和在所期望细胞位置表达重组dna分子，进而使作物获得预期性状。例如，通过植物转化技术产生包含堆叠在单个基因组基因座的多个异源基因的转基因植物物种的方法被称为基因堆积方法
4、为了满足上述需要，本专利技术提供了新型嵌合启动子，所述嵌合启动子可在植物中启动异源基因组成型表达从而赋予植物所需的性状或特征。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种新颖的嵌合启动子及其用途，所述嵌合启动子可将目的异源核苷酸序列在植物中组成型表达。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了一种嵌合启动子，所述嵌合启动子的核苷酸序列包括：(1)与seq id no:1所示的核苷酸序列具有至少95％序列同一性的核苷酸序列；(2)具有seq id no:1所示的核苷酸序列。
3、为实现上述目的，本专利技术还提供了一种表达盒，其包含与目的异源核苷酸序列有效连接的所述嵌合启动子。
4、为实现上述目的，本专利技术还提供了一种dna构建体，其包含所述表达盒。
5、为实现上述目的，本专利技术还提供了一种或重组载体，其包含所述dna构建体。
6、为实现上述目的，本专利技术还提供了一种在植物中表达目的异源核苷酸序列的方法，包括：将所述表达盒或所述dna构建体稳定的整合进植物细胞中，使得所述目的异源核苷酸序列在所述植物中表达。
7、优选地，所述目的异源核苷酸序列编码非生物应激抗性蛋白质或生物应激抗性蛋白质。
8、进一步地，所述非生物应激抗性蛋白质为除草剂耐受性蛋白质。所述生物应激抗性蛋白质为昆虫抗性蛋白质。
9、为实现上述目的，本专利技术还提供了一种所述嵌合启动子用于在植物组织中组成型表达目的异源核苷酸序列的用途。
10、进一步地，所述目的异源核苷酸序列编码目的蛋白质。
11、在上述技术方案的基础上，所述植物包括单子叶植物和双子叶植物。进一步优选地，所述双子叶植物包括但不限于苜蓿、菜豆、花椰菜、甘蓝、胡萝卜、芹菜、棉花、黄瓜、茄子、莴苣、甜瓜、豌豆、胡椒、西葫芦、萝卜、油菜、菠菜、大豆、南瓜、番茄、拟南芥、花生或西瓜；优选地，所述双子叶植物是指黄瓜、大豆、拟南芥、烟草、棉花、花生或油菜。所述单子叶植物包括但不限于玉米、水稻、高粱、小麦、大麦、黑麦、粟、甘蔗、燕麦或草坪草；优选地，所述单子叶植物是指玉米、水稻、高粱、小麦、大麦、粟、甘蔗或燕麦。
12、提供以下描述和定义是为了更好地限定本专利技术以及指导本领域普通技术人员实践本专利技术。除非另有说明，术语应根据相关领域的普通技术人员的常规用法来理解。
13、本专利技术中术语“核酸(序列)”或“dna分子”是指基因组或合成来源的双链dna分子，即从5’(上游)末端读取到3’(下游)末端的脱氧核苷酸碱基的聚合物或dna分子。术语“dna序列”是指dna分子的核苷酸序列。
14、本专利技术中术语“启动子”通常是指参与识别和结合rna聚合酶ii和其他蛋白质(诸如反式作用转录因子)以启动转录的dna分子。启动子可最初从基因的基因组拷贝的5’非翻译区(5′utr)中分离。可替代地，启动子可以是合成产生的或操纵的dna分子。启动子可以是嵌合的。
15、本专利技术中术语“嵌合”是指通过将第一dna分子融合至第二dna分子而产生的单个dna分子，其中无论所述第一dna分子还是所述第二dna分子通常都不会以所述构型存在，即彼此融合。因此，嵌合dna分子是通常不以其他方式存在于自然界中的新的dna分子。术语“嵌合启动子”是指通过两个或更多个异源dna分子的融合产生的新的启动子，例如通过在具有其自身部分或完全调节序列的活性启动子上添加异源调节序列，也可以通过在无活性的截短启动子的5’上游区添加异源调节序列，发展出嵌合启动子，所述无活性的截短启动子即仅包括核心tata并任选包括ccaat元件的启动子。
16、本专利技术中术语“组成型启动子”是指在该类启动子的控制下，目的异源核苷酸序列的表达大体恒定在一定水平上，在植物的不同组织和/或不同生长发育阶段表达水平没有明显差异。所述组织为植物体中由来源相同和执行同一功能的一种或多种类型细胞集合而成的结构单位，例如保护组织、输导组织、营养组织、机械组织、分生组织，几种不同的组织有机配合、紧密联系，形成不同的器官，不同的器官之间互相配合，更有效地完成有机体的整个生命活动过程。所述生长发育阶段可根据植物形态、机能的差异划分为胚胎阶段、幼苗阶段、成熟阶段和衰老阶段。本专利技术中术语“组成型表达”是指目的异源核苷酸序列在植物的不同组织和/或不同生长发育阶段都以大体上一致的水平进行表达。
17、本专利技术中，“序列同一性”指两个最佳比对的dna或氨基酸序列在组分(例如核苷酸或氨基酸)的比对窗口整个范围内不变的程度。测试序列和参考序列(本专利技术seq id no:1)的已比对区段的“同一性分数”是由两个比对序列所共有的相同组分的数目除以参考序列区段(即完整的参考序列或参考序列的更小限定的部分)中组分的总数目。“同一性％”是同一性分数乘以100。例如可从national center for biotechnology information；www.ncbi.nlm.nih.gov/获得本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种嵌合启动子，其特征在于，其核苷酸序列包括：
2.一种表达盒，其特征在于，包含与目的异源核苷酸序列有效连接的权利要求1所述嵌合启动子。
3.一种DNA构建体，其特征在于，包含权利要求2所述表达盒。
4.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求3所述DNA构建体。
5.一种在植物中表达目的异源核苷酸序列的方法，其特征在于，包括：将权利要求2所述表达盒或权利要求3所述DNA构建体稳定的整合进植物细胞中，使得所述目的异源核苷酸序列在所述植物中表达。
6.根据权利要求5所述在植物中表达目的异源核苷酸序列的方法，其特征在于，所述目的异源核苷酸序列编码非生物应激抗性蛋白质或生物应激抗性蛋白质。
7.根据权利要求6所述在植物中表达目的异源核苷酸序列的方法，其特征在于，所述非生物应激抗性蛋白质为除草剂耐受性蛋白质。
8.根据权利要求6或7所述在植物中表达目的异源核苷酸序列的方法，其特征在于，所述生物应激抗性蛋白质为昆虫抗性蛋白质。
9.一种权利要求1所述嵌合启动子用于在植物组织中组成型表达目的异源
10.根据权利要求9所述用途，所述目的异源核苷酸序列编码目的蛋白质。
...【技术特征摘要】
1.一种嵌合启动子，其特征在于，其核苷酸序列包括：
2.一种表达盒，其特征在于，包含与目的异源核苷酸序列有效连接的权利要求1所述嵌合启动子。
3.一种dna构建体，其特征在于，包含权利要求2所述表达盒。
4.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求3所述dna构建体。
5.一种在植物中表达目的异源核苷酸序列的方法，其特征在于，包括：将权利要求2所述表达盒或权利要求3所述dna构建体稳定的整合进植物细胞中，使得所述目的异源核苷酸序列在所述植物中表达。
6.根据权利要求5所述在植物中表达目...
【专利技术属性】
技术研发人员：冯婷婷，王依萍，
申请(专利权)人：北京国锐生科有限公司，
类型：发明
国别省市：
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