【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种以一步法制备的羧基磁珠及其制备方法。
技术介绍
1、磁性微球是一类直径在纳米或微米级的球形复合材料。磁性微球的核芯由四氧化三铁或三氧化二铁等超顺磁性材料构成，外围包覆高分子材料。该核芯具有超顺磁性，使磁珠可以在外加磁场作用下向磁场方向移动，达到分离的目的。外围高分子材料可以通过物理或化学方法活化产生氨基(nh2—)、羧基(cooh—)或环氧基(—ch(o))等基团，可以与蛋白等生物活性分子偶联。偶联后的磁珠广泛应用于生物标记、生物分子的分离、蛋白的纯化、抗体纯化、分子诊断等领域。
2、例如公开号为cn106215821a，公开日为2016年12月14日，名称为“一种磁微粒化学发光免疫分析试剂用羧基磁珠的制备方法”的中国专利文献公开了一种羧基磁珠的制备方法。在该专利文献所公开的技术方案中，其包括以下步骤：s1、制备fe3o4纳米磁性微球；s2、二氧化硅磁性微球的制备；s3、磁性微球的氨基化；s4、羧基磁珠制备；s5、对制备好的羧基磁珠进行磁场响应筛选。
3、再例如公开号为cn116643042a，公开日为2023年8月25日，名称为“血栓调节蛋白化学发光检测试剂盒”的中国专利文献公开了一种测试试剂盒。在该测试试剂盒的制备方法中其采用了将可溶性三价铁离子盐制成纳米微粒内核，内核用二氧化硅包被后与羧基化硅烷反应，磁分离后得到羧基磁珠。
4、由上述专利文献可以看出，现有技术在制备羧基磁珠的制备方法中其主要是将fe3o4磁性纳米粒子以二氧化硅包被后与羧基化硅烷反应，经磁分
技术实现思路
1、鉴于现有技术的不足，本专利技术提供了一种一步法制备羧基磁珠的制备方法、羧基磁珠及试剂盒，该方法工艺流程简单、操作简便、结果可重复性高。
2、为了实现上述目的，本专利技术提出了一种一步法制备羧基磁珠的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
3、步骤s1：混合制备获得甲基丙烯酸与fe2+、fe3+配位复合体；
4、步骤s2：基于甲基丙烯酸与fe2+、fe3+配位复合体制备获得fe3o4磁性纳米粒子；
5、步骤s3：基于fe3o4磁性纳米粒子制备得到fe3o4羧基磁珠。
6、优选地，在所述步骤s1中，所述甲基丙烯酸与fe2+、fe3+配位复合体采用以下方式配置获得：
7、将feso4、甲基丙烯酸以及fecl3依次加入，混匀，形成甲基丙烯酸与fe2+、fe3+配位复合体，其中，feso4、甲基丙烯酸以及fecl3的摩尔比为：12～14:1:12～14。
8、优选地，在所述步骤s2中，将碱性溶液与甲基丙烯酸与fe2+、fe3+配位复合体混合，获得fe3o4磁性纳米粒子。
9、优选地，所述碱性溶液为naoh溶液。
10、优选地，所述碱性溶液中的oh-与fe2+的摩尔比为1:8。
11、优选地，在所述步骤s3中，反应条件为：ph为7.0～8.5。
12、优选地，制备时采用水浴，水浴温度为70～75℃，水浴时间为40～45分钟。
13、第二方面，本专利技术提出了一种羧基磁珠，所述羧基磁珠采用上述的制备方法制备获得。
14、优选地，所述羧基磁珠包括fe3o4核芯和外部含有羧基的功能单体，所述功能单体通过与核芯形成fe-c键，固定于磁珠表面。
15、需要说明的是，所述功能单体为甲基丙烯酸
16、第三方面，本专利技术提出了一种试剂盒，所述试剂盒包括上述的羧基磁珠，以及可接受的助剂或载体。
17、需要说明的是，本专利技术所述的技术方案首先将功能单体甲基丙烯酸(maa)与fe2+、fe3+作用形成配位复合体，再加入naoh，以沉淀法制备fe3o4磁性纳米粒子，然后直接在70～75℃水浴反应，形成羧基磁珠。
18、通过本专利技术所述的技术方案所制得的羧基磁珠磁场响应性均一、产品质量稳定，并且磁性微球的制备原料价廉易得、设备简单、操作安全可靠。
19、此外，需要说明的是，本案所制备获得的羧基磁珠可以在2～8℃保存留用。
20、与现有技术相比，本专利技术所述的一步法制备羧基磁珠的制备方法、羧基磁珠及试剂盒具有如下所述的优点以及有益效果：
21、(1)通过本专利技术所述的制备方法所制得的羧基磁珠具有良好的磁性、磁场响应性均一、产品质量稳定，并且羧基磁珠的制备原料价廉易得、设备简单、操作安全可靠。
22、(2)在实际应用中，本专利技术方法所制得的羧基磁珠能够替代现有技术的试剂盒中的磁珠，通过该磁珠与自配试剂结合提取植物核酸样品，可以得到高质量的dna产物。
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1.一种一步法制备羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤S1中，所述甲基丙烯酸与Fe2+、Fe3+配位复合体采用以下方式配置获得：
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤S2中，将碱性溶液与甲基丙烯酸与Fe2+、Fe3+配位复合体混合，获得Fe3O4磁性纳米粒子。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述碱性溶液为NaOH溶液。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述碱性溶液中的OH-与Fe2+的摩尔比为1:8。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤S3中，反应条件为：pH为7.0～8.5。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，制备时采用水浴，水浴温度为70～75℃，水浴时间为40～45分钟。
8.一种羧基磁珠，其特征在于，所述羧基磁珠采用如权利要求1～7中任意一项所述的制备方法制备获得。
9.根据权利要求8所述的羧基磁珠，其特征在于，所述
10.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求8或9所述的羧基磁珠，以及可接受的助剂或载体。
...【技术特征摘要】
1.一种一步法制备羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤s1中，所述甲基丙烯酸与fe2+、fe3+配位复合体采用以下方式配置获得：
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤s2中，将碱性溶液与甲基丙烯酸与fe2+、fe3+配位复合体混合，获得fe3o4磁性纳米粒子。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述碱性溶液为naoh溶液。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述碱性溶液中的oh-与fe2+的摩尔比为1:8。
6.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：张文荟，钟诚，刘涛，石垚，
申请(专利权)人：上海国龙生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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