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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药领域,特别涉及一种促进肿瘤细胞衰老的基因递送体系及其制备方法和应用。
技术介绍
1、肿瘤细胞具有无限增殖的潜能,其生长调控紊乱。细胞衰老的一个特征是细胞不可逆性地进入了细胞生长阻滞的状态,因此诱导肿瘤细胞衰老可以发挥抗肿瘤效应。目前诱导肿瘤细胞发生衰老的技术方法主要是利用化疗药物。化疗药物通常通过诱导dna发生损伤而诱导p53的高表达从而激活p21(cdkn1a,cyclin-dependent kinase inhibitor 1)的表达而诱导肿瘤细胞的衰老。另外,通过过表达或者激活促癌基因kras与braf的表达能促进p16(cdkn2a,cyclin-dependent kinase inhibitor 2a)的表达而诱导肿瘤细胞发生衰老。
2、化疗药物所诱导的肿瘤细胞衰老会引起dna损伤,引发严重的副作用,这是该方法的一个主要缺点。虽然激活或过表达kras、braf基因能引起部分肿瘤细胞发生衰老,但是由于kras、braf属于促癌基因,因此其可能促进肿瘤的进展。因此目前亟需一种不会引起dna损伤、不促进肿瘤进展的新型治疗肿瘤的药物。
技术实现思路
1、针对现有技术中的缺陷,本专利技术提出了一种促进肿瘤细胞衰老的基因递送体系及其制备方法和应用。本专利技术的主要目的是通过高效的沉默cttn的表达诱导肿瘤细胞发生衰老并发挥抗肿瘤生长与转移效应。
2、本专利技术提供一种抑制cttn表达的shrna,所述shrna包含rnai分子的正义链与r
3、进一步的,所述shrna中包含的所述rnai分子中的正义链的核苷酸序列为seq idno.1或seq id no.2中的任意一种。
4、本专利技术还提供一种含有所述的shrna序列的基因递送体系。
5、进一步的,所述基因递送体系包括但不限于病毒载体、脂质体、纳米颗粒。
6、进一步的,所述病毒载体为慢病毒载体plko-tet-on。
7、本专利技术还提供所述的shrna或所述的基因递送体系在制备治疗肿瘤的药物中的应用。
8、本专利技术还提供所述的shrna或所述的基因递送体系在制备诱导肿瘤细胞衰老的药物中的应用。
9、本专利技术还提供所述的shrna或所述的基因递送体系在制备激活p53的药物中的应用。
10、本专利技术还提供所述的基因递送体系的制备方法,包括如下步骤:将所述的shrna转入基因递送体系中。
11、进一步的,所述基因递送体系包括但不限于病毒载体、脂质体、纳米颗粒。
12、综上,与现有技术相比,本专利技术达到了以下技术效果:
13、本专利技术的基因递送体系利用rna干扰技术沉默cttn mrna的表达,不会引起dna损伤。另外,目前的研究表明cttn具有促进肿瘤细胞运动、迁移的能力,沉默cttn mrna的表达并不会促进肿瘤细胞的进展。因此通过沉默cttn mrna表达而诱导肿瘤细胞衰老的方法可能优于利用化疗药物以及利用高表达或激活kras、braf来诱导肿瘤细胞衰老。本专利技术通过沉默cttn mrna的表达所诱导的肿瘤细胞衰老依赖于p53的激活,因此与化疗药物所诱导的细胞衰老有一定的相似性,但是沉默cttn mrna所诱导的肿瘤细胞衰老可能比化疗药物更具有特异性。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种抑制CTTN表达的shRNA,其特征在于,所述shRNA包含RNAi分子的正义链与RNAi分子的反义链,其中RNAi分子的反义链与CTTN基因mRNA上的靶序列杂交,所述shRNA的核苷酸序列为CCGG-RNAi分子的正义链-CTCGAG-该RNAi分子的反义链-TTTTTG。
2.根据权利要求1所述的shRNA,其特征在于,所述shRNA中包含的所述RNAi分子中的正义链的核苷酸序列为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2中的任意一种。
3.一种含有权利要求1或2中所述的shRNA序列的基因递送体系。
4.根据权利要求3所述的基因递送体系,其特征在于,所述基因递送体系包括但不限于病毒载体、脂质体、纳米颗粒。
5.根据权利要求3所述的基因递送体系,其特征在于,所述病毒载体为慢病毒载体pLKO-tet-on。
6.权利要求1-2任一项所述的shRNA或权利要求3-5任一项所述的基因递送体系在制备治疗肿瘤的药物中的应用。
7.权利要求1-2任一项所述的shRNA或权利要求3-5任一项所述的基因递送
8.权利要求1-2任一项所述的shRNA或权利要求3-5任一项所述的基因递送体系在制备激活p53的药物中的应用。
9.权利要求3-5任一项所述的基因递送体系的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将所述的shRNA转入基因递送体系中。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述基因递送体系包括但不限于病毒载体、脂质体、纳米颗粒。
...【技术特征摘要】
1.一种抑制cttn表达的shrna,其特征在于,所述shrna包含rnai分子的正义链与rnai分子的反义链,其中rnai分子的反义链与cttn基因mrna上的靶序列杂交,所述shrna的核苷酸序列为ccgg-rnai分子的正义链-ctcgag-该rnai分子的反义链-tttttg。
2.根据权利要求1所述的shrna,其特征在于,所述shrna中包含的所述rnai分子中的正义链的核苷酸序列为seq id no.1或seq id no.2中的任意一种。
3.一种含有权利要求1或2中所述的shrna序列的基因递送体系。
4.根据权利要求3所述的基因递送体系,其特征在于,所述基因递送体系包括但不限于病毒载体、脂质体、纳米颗粒。
5.根据权利要求3所述的...
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