【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于细胞培养，具体涉及一种对培养板灭菌并表面改性的方法。
技术介绍
1、灭菌是采用外来手段将一切微生物永远丧失生长繁殖能力的措施。目前，主要的灭菌方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌。化学试剂灭菌主要指环氧乙烷灭菌，射线灭菌主要指辐照灭菌，干热灭菌主要指用烘箱加热灭菌，湿热灭菌主要用灭菌锅灭菌，过滤灭菌主要指用微孔滤膜过滤灭菌。环氧乙烷灭菌是通过其与微生物蛋白质分子上的特定基团发生烷基化反应，导致蛋白质失去反应基团，阻碍蛋白质的正常生化反应和新陈代谢，从而达到灭菌效果。辐射灭菌一般采用紫外照射灭菌，该灭菌时间长，效率低下，需要长时间照射。干热灭菌是在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。湿热灭菌是在饱和蒸汽、沸水或流通蒸汽中进行灭菌的方法。过滤除菌是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去，以达到无菌目的。上述灭菌方法虽然能够达到良好的灭菌效果，但是灭菌时间比较长，且灭菌后菌种尸体残留存在清理麻烦的问题。培养板是一种较为常用细胞培养装置，在使用前需要进行严格的灭菌处理，并有效减少细菌的二次沉积，因此，上述简单的灭菌处理无法满足严格的培养板使用要求。
技术实现思路
1、针对现有技术中的问题，本专利技术提供一种对培养板灭菌并表面改性的方法，解决了灭菌效果不佳的问题，利用混合溶剂、环氧乙烷和双氧水形成不同功能化的三梯度灭菌处理，大大提高了培养板表面的灭菌效果，同时以双氧水为氧化材料，配合过碳酸钠作为稳定剂与催化剂保证了氧气的释放与稳定，提高了表面亲水化
2、为实现以上技术目的，本专利技术的技术方案是：
3、一种对培养板灭菌并表面改性的方法，包括如下步骤：
4、步骤1，将培养板放入混合溶剂中浸泡20-30min，超声振荡5-10min，取出烘干得到表面洁净的培养板，所述培养板的材质为聚苯乙烯，所述混合溶剂采用乙醇和乙醚的混合溶剂，且乙醇和乙醚的体积比为2-3:2，浸泡的温度为20-30℃，所述超声振荡的超声频率为80-100khz，温度为5-10℃；所述烘干的温度为70-80℃；该步骤利用乙醇和乙醚的溶解特性与渗透特性，形成均质的混合溶剂，当培养板放入该混合溶剂中，超声振荡能够将表面的浮尘去除，并乙醇的杀菌作用、乙醚的渗透作用和乙醇-乙醚的溶解性，达到初步的灭菌效果；超声振荡能够加快乙醚的渗透作用，也加快了乙醇的渗透性，从而达到不错的初步灭菌作用和表面清洗作用；经超声振荡后将表面杂质去除，取出烘干过程中，乙醚和乙醇完全蒸发去除，得到初步清洁的培养板；
5、步骤2，将环氧乙烷通入至乙醚中搅拌均匀形成溶解液，然后将洁净的培养板浸泡至溶解液中静置0.5-2h，密封升温静置2-4h，冷却后取出，烘干得到二次灭菌培养板，所述环氧乙烷在乙醚中的浓度为0.8-1.2g/l，搅拌速度为100-200r/min，所述静置的温度为5-10℃，所述密封升温静置的温度为40-50℃；所述冷却的温度为0-5℃；所述烘干的温度为40-50℃，且烘干的气体吹扫至乙醇中；该步骤利用环氧乙烷在乙醚中的溶解性，形成溶解液，并将培养浸泡在环氧乙烷乙醚液中起到优异的细菌灭杀效果；在密封升温静置中，乙醚与环氧乙烷形成蒸汽状态，形成双渗透体系，从而提高优异的渗透灭菌效果；冷却过程中，乙醚和环氧乙烷均转化为液态，形成溶解液，直接将培养板取出，实现了固液分离；
6、步骤3，将二次灭菌培养板放入蒸馏水中超声处理20-30min，取出后烘干得到干燥的培养板，然后将双氧水喷雾在培养板表面静置1-3h，最后将过碳酸钠溶液喷雾至双氧水表面，恒温静置经乙醇洗涤后烘干得到已灭菌且表面亲水改性的培养板，所述超声处理的超声频率为80-90khz，温度为10-20℃，所述烘干的温度为50-60℃，时间为2-3h，所述双氧水的质量浓度为10-15%，喷雾量为5-7ml/cm2，所述过碳酸钠溶液的浓度为0.1-0.2g/l，喷雾量为2-3ml/cm2，所述恒温静置的温度为60-70℃；该步骤利用超声的方式将二次灭菌培养板的细菌尸体完全分散且剥离，起到良好的分离效果，得到干净且干燥的培养板；将双氧水喷雾在培养板上形成表面液膜，双氧水会缓慢分解分解形成氧气，不仅能够将残留的细菌完全灭杀，还能够对聚苯乙烯材质形成表面氧化；过碳酸钠溶液能够与双氧水液膜形成叠合与互溶，将过碳酸钠侵入至双氧水中，且自身会分解产生过氧化氢和碳酸钠，保证了双氧水的含量稳定，其次，碳酸钠能够在水中水解产生氢氧根，该氢氧根能够促进双氧水分解形成氧气和水，从而保证了氧气浓度，实现了聚苯乙烯的稳定氧化，大幅度提高了聚苯乙烯表面的氧化面积与氧化程度，实现了聚苯乙烯表面亲水性能的稳定。
7、从以上描述可以看出，本专利技术具备以下优点：
8、1.本专利技术解决了灭菌效果不佳的问题，利用混合溶剂、环氧乙烷和双氧水形成不同功能化的三梯度灭菌处理，大大提高了培养板表面的灭菌效果，同时以双氧水为氧化材料，配合过碳酸钠作为稳定剂与催化剂保证了氧气的释放与稳定，提高了表面亲水化效果。
9、2.本专利技术利用乙醇和乙醚形成混合溶剂，利用乙醇的清洗作用和灭菌作用，形成表面清洗效果，减少表面浮尘杂质的影响。
10、3.本专利技术利用乙醚和环氧乙烷的低沸点体系，形成液相浸泡灭菌和蒸汽渗透灭菌相结合的高效灭菌作用，大大提高了灭菌效率，减少灭菌死角，满足培养板的使用需求。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤1中的培养板的材质为聚苯乙烯。
3.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤1中的混合溶剂采用乙醇和乙醚的混合溶剂，且乙醇和乙醚的体积比为2-3:2，浸泡的温度为20-30℃。
4.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤1中的超声振荡的超声频率为80-100kHz，温度为5-10℃；所述烘干的温度为70-80℃。
5.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤2中的环氧乙烷在乙醚中的浓度为0.8-1.2g/L，搅拌速度为100-200r/min。
6.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤2中的静置的温度为5-10℃，所述密封升温静置的温度为40-50℃；所述冷却的温度为0-5℃。
7.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述
8.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤3中的，所述超声处理的超声频率为80-90kHz，温度为10-20℃，所述烘干的温度为50-60℃，时间为2-3h。
9.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤3中的双氧水的质量浓度为10-15%，喷雾量为5-7mL/cm2。
10.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤3中的过碳酸钠溶液的浓度为0.1-0.2g/L，喷雾量为2-3mL/cm2，所述恒温静置的温度为60-70℃。
...【技术特征摘要】
1.一种对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤1中的培养板的材质为聚苯乙烯。
3.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤1中的混合溶剂采用乙醇和乙醚的混合溶剂，且乙醇和乙醚的体积比为2-3:2，浸泡的温度为20-30℃。
4.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤1中的超声振荡的超声频率为80-100khz，温度为5-10℃；所述烘干的温度为70-80℃。
5.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：所述步骤2中的环氧乙烷在乙醚中的浓度为0.8-1.2g/l，搅拌速度为100-200r/min。
6.根据权利要求1所述的对培养板灭菌并表面改性的方法，其特征在于：...
【专利技术属性】
技术研发人员：柯瑞君，傅瑾雯，陈佳玉，段加逸，贾铮，
申请(专利权)人：绍兴文理学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。