【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及抗hpv-18型e蛋白的特异性抗体及其用途。
技术介绍
1、人乳头瘤病毒(hpv)是隶属于乳多空病毒科乳头瘤病毒属的一组球形、微小、无包膜的环状双链dna病毒。具有嗜上皮性，主要引起人类皮肤、黏膜的增生性病变，分为高危型、中危型和低危型三大类。症状表现为寻常疣、生殖器疣(尖锐湿疣)等。随着性病中尖锐湿疣的发病率急速上升和宫颈癌、肛门癌等的增多，人乳头瘤病毒(hpv)感染越来越引起人们的关注。
2、单克隆抗体(monoclonal antibody,mab)是由单一b细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。单克隆抗体在生物医学研究、疾病诊断和某些疾病治疗(如传染病和癌症)中是十分重要的工具。当前常见的单克隆抗体制备技术主要有杂交瘤、噬菌体抗体库和单个b细胞技术。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的技术问题，本专利技术提供了以下的技术方案：
2、本专利技术提供了一种抗hpv-18型e蛋白的单克隆抗体，所述单克隆抗体包括seq idno：1所示的重链可变区cdr1、seq id no：2所示的重链可变区cdr2、seq id no：3所示的重链可变区cdr3、seq id no：9所示的轻链可变区cdr1、lts所示的轻链可变区cdr2、seq idno：10所示的轻链可变区cdr3。
3、可选的，所述单克隆抗体还包含具有与seq id no：4、5、6、7所示氨基酸序列至少90％序列一致性的重链可变区框架
4、可选的，所述单克隆抗体重链可变区具有与seq id no：8所示的氨基酸序列至少90％序列一致性，优选95％序列一致性的重链可变区，所述轻链可变区具有与seq id no：15所示的氨基酸序列至少90％序列一致性，优选95％序列一致性的轻链可变区。
5、可选的，所述单克隆抗体进一步包含重链恒定区和轻链恒定区。
6、可选的，所述单克隆抗体来源于人或非人哺乳动物。
7、可选的，所述单克隆抗体是人源化的。
8、本专利技术提供了核酸分子，所述核酸分子编码前面所述的单克隆抗体或其功能片段。
9、可选的，所述核酸分子包括编码seq id no:1-15任一项氨基酸序列的核苷酸序列。
10、可选的，所述核酸分子编码的核苷酸序列经过密码子简并性处理。
11、本专利技术提供了一种生产前面所述的单克隆抗体的方法，该方法包括如下步骤：
12、a)提供前面所述的核酸分子；
13、b)用步骤a)所述的物质转化宿主细胞；
14、c)在适合条件下培养步骤b)所得的宿主细胞；
15、d)在宿主细胞培养液中分离纯化获得前面所述的单克隆抗体。
16、本专利技术提供了前面所述的单克隆抗体的如下任一用途：
17、1)在制备检测乳头瘤病毒的产品中的用途；
18、2)在制备检查e蛋白的产品中的用途；
19、3)在制备诊断乳头瘤病毒的产品中的用途；
20、4)在制备调节e蛋白的药物中的用途；
21、5)在制备预防或治疗乳头瘤病毒的药物中的用途；
22、可选的，所述乳头瘤病毒包括上皮型hpv与黏膜型hpv；
23、可选的，所述上皮型hpv包括hpv-1、hpv-5、hpv-8、hpv-14、hpv-20、hpv-21、hpv-25、hpv-47型；
24、可选的，所述黏膜型hpv包括hpv-6、hpv-11、hpv-16、hpv-18、hpv-31、hpv-33、hpv-35、hpv-39、hpv-41、hpv-45、hpv-51、hpv-52、hpv-56、hpv-58、hpv-59、hpv-68、hpv-70、hpv-72型；
25、可选的，所述乳头瘤病毒为hpv-18；
26、可选的，所述e蛋白包括hpv病毒e蛋白；
27、可选的，所述hpv病毒e蛋白包括hpv病毒e1、e2、e3、e4、e5、e6、e7、e8蛋白。
28、可选的，所述药物包括各种本领域药学上可接受的载体。药学上可接受的载体在所采用的剂量和浓度对接受者是无毒的，具体可以是包括但不限于：缓冲剂，如乙酸盐、tris、磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂(如氯化十八烷基二甲基苄基铵；氯己双铵；苯扎氯铵、苄索氯铵；酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烃基酯，如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；邻苯二酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；蛋白质，如血清蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，如edta；张力调节剂，诸如海藻糖和氯化钠；糖类，诸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；表面活性剂，如聚山梨醇酯；成盐抗衡离子，如钠；金属复合物(如zn-蛋白质复合物)；和/或非离子表面活性剂，如或聚乙二醇(peg)。用于体内施用的药物制剂一般是无菌的，实现药物制剂无菌的方法对于本领域技术人员来说应该是已知的，例如，可以通过无菌滤膜过滤等方法来实现。本领域技术人员还可以根据药物组合物所需的剂型选择合适的药学上可接受的载体，以将其制备成不同的剂型，例如，本专利技术的药物组合物可以是包括但不限于片剂、注射剂、冻干剂等各种剂型。
29、本专利技术提供了一种重组载体，所述重组载体包含前面所述的核酸分子；
30、可选的，所述重组载体包括慢病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、逆转录病毒载体、质粒、dna载体、mrna载体、基于转座子的载体或人工染色体；
31、可选的，所述重组载体为质粒。
32、本专利技术提供了一种细胞，所述细胞包括前面所述的单克隆抗体，前面所述的核酸分子或前面所述的重组载体。
33、可选的，所述细胞包括原核细胞或真核细胞。
34、可选的，所述原核细胞包括细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、衣原体、立克次氏体。
35、可选的，所述细菌包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌。
36、可选的，所述真核细胞包括哺乳动物细胞、昆虫细胞、除蓝藻外植物细胞、真菌细胞、酵母细胞。
37、更可选的，所述哺乳动物细胞包括成纤维细胞、淋巴细胞、上皮细胞、成髓细胞。
38、本专利技术提供了一种缀合物，所述缀合物包括前面所述的单克隆抗体和与抗体相缀合的物质。
39、可选的，所述物质缀合到抗体之后不影响抗体本身的功能。
40、可选的，所述物质包括荧光染料、化学发光化合物、放射性同位素、酶、或生物素。
41、可选的，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗HPV-18型E蛋白的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体包括SEQ ID NO：1所示的重链可变区CDR1、SEQ ID NO：2所示的重链可变区CDR2、SEQ ID NO：3所示的重链可变区CDR3、SEQ ID NO：9所示的轻链可变区CDR1、LTS所示的轻链可变区CDR2、SEQ ID NO：10所示的轻链可变区CDR3。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体还包含具有与SEQID NO：4、5、6、7所示氨基酸序列至少90％序列一致性的重链可变区框架区FR1、FR2、FR3、FR4，以及具有与SEQ ID NO：11、12、13、14所示氨基酸序列至少90％序列一致性的轻链可变区框架区FR1、FR2、FR3、FR4。
3.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体重链可变区具有与SEQ ID NO：8所示的氨基酸序列至少90％序列一致性，优选95％序列一致性的重链可变区，所述轻链可变区具有与SEQ ID NO：15所示的氨基酸序列至少90％序列一致性，优选95％序列一致性的轻链可变区。
4.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体进一步包含重链恒定区和轻链恒定区。
5.核酸分子，所述核酸分子编码权利要求1-4任一项所述的单克隆抗体或其功能片段。
6.一种生产权利要求1-4任一项所述的单克隆抗体的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：
7.权利要求1-4任一项所述的单克隆抗体的如下任一用途：
8.一种重组载体，所述重组载体包含权利要求5所述的核酸分子；
9.一种细胞，所述细胞包括权利要求1-4任一项所述的单克隆抗体，权利要求5所述的核酸分子或权利要求8所述的重组载体；
10.一种缀合物，所述缀合物包括权利要求1-4任一项所述的单克隆抗体和与抗体相缀合的物质；
...【技术特征摘要】
1.一种抗hpv-18型e蛋白的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体包括seq id no：1所示的重链可变区cdr1、seq id no：2所示的重链可变区cdr2、seq id no：3所示的重链可变区cdr3、seq id no：9所示的轻链可变区cdr1、lts所示的轻链可变区cdr2、seq id no：10所示的轻链可变区cdr3。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体还包含具有与seqid no：4、5、6、7所示氨基酸序列至少90％序列一致性的重链可变区框架区fr1、fr2、fr3、fr4，以及具有与seq id no：11、12、13、14所示氨基酸序列至少90％序列一致性的轻链可变区框架区fr1、fr2、fr3、fr4。
3.根据权利要求1或2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体重链可变区具有与seq id no：8所示的氨基酸序列至少90％序列一致性...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄亚杰，任建廷，刘霄卉，胡振阳，魏瑞，梅斯尧，秦萍萍，
申请(专利权)人：苏州东抗生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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