【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于酶工程和基因工程领域，具体涉及一种perk蛋白的截短突变体及其应用。
技术介绍
1、太阳辐射是诱发人类皮肤损伤的重要环境风险因素，其中紫外线(ultraviolet，uv)辐射与光损伤作用关系最为密切。uv可分为长波紫外线(ultraviolet a，uva)、中波紫外线(ultraviolet b，uvb)和短波紫外线(ultraviolet c，uvc)，它们诱导皮肤光损伤反应的作用依次增强。但由于uvc可以被臭氧层过滤掉，因此直达地球表面的致伤作用微弱。而uvb的损伤效应可达uva的1000倍以上，因此uvb是公认的太阳辐射中最具有人体破坏性的成分。研究表明，uvb能够破坏蛋白质、脂质和核酸的结构及功能，从而引发皮肤灼伤、发泡、皮肤炎甚至皮肤癌等病理损伤反应。因此，uvb引发光损伤效应的防控策略、技术及药物研究一直备受关注。
2、p53是具有肿瘤抑制功能的核转录因子。本团队在以往研究中揭示了uvb能够通过诱导p53活化进而上调凋亡反应特异性靶基因perp表达，并最终介导促皮肤角质细胞和基质细胞凋亡效应。这一结果为靶向p53-perp途径进而拮抗uvb诱导的皮肤光损伤反应策略研究提供了明确的指向性思路。前期研究进行了p53结合蛋白及上游蛋白激酶筛选，结果发现了uvb在诱导p53活化及促细胞凋亡反应过程中能够与内质网(endoplasmic reticulum，er)应激感应蛋白perk(蛋白激酶r样内质网激酶，protein kinase r-like er kinase)发生诱导性结合反应。per
3、然而，由于perk蛋白较大，具有上千个氨基酸，不适于进行药物的制备及药理学研究，因此迫切需要其截短突变体进行后续功能研究。通过设计截短突变体，可以认识蛋白功能域的功能，判断哪些区域是必须结构，以及该结构对整个蛋白的活性和稳定性的影响，从而为蛋白的结构和功能研究提供重要的依据。
技术实现思路
1、为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种perk蛋白的截短突变体及其在预防uvb诱导的皮肤光损伤中的应用。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、本专利技术第一方面提供了一种perk蛋白的截短突变体，所述截短突变体的氨基酸序列如序列表中seq id no:1所示。
4、本专利技术第二方面提供了一种编码核酸，包含所述编码核酸的载体或包含所述编码核酸或所述载体的重组宿主细胞，所述编码核酸可编码本专利技术第一方面所述的截短突变体，其核苷酸序列如序列表中seq id no:2所示。
5、本专利技术第三方面提供了一种引物，包含正向引物和反向引物，所述引物可扩增本专利技术第二方面所述的编码核酸。
6、进一步，所述正向引物的核苷酸序列如序列表中seq id no:3所示；所述反向引物的核苷酸序列如序列表中seq id no:4所示。
7、本专利技术第四方面提供了一种本专利技术第一方面所述截短突变体或本专利技术第二方面所述编码核酸的衍生物。
8、进一步，所述衍生物为截短突变体或编码核酸与其他物质以吸附、包载、共价结合形式而形成。
9、进一步，所述修饰包括糖基化，酰基脂化，磷酸化，乙酰化，甲基化，硫酸化或羟基化。
10、进一步，所述其他物质包含自由佐剂、稳定剂、缓冲剂、表面活性剂、盐和防腐剂组成的组中的一种或多种组分。
11、本专利技术第五方面提供了一种预防uvb诱导皮肤光损伤的药物组合物，所述药物组合物包含本专利技术第一方面所述的截短突变体；或本专利技术第二方面所述的编码核酸；或本专利技术第四方面所述的衍生物。
12、进一步，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体。
13、本专利技术第六方面提供了一种预防uvb诱导皮肤光损伤的产品，所述产品包含本专利技术第一方面所述的截短突变体、本专利技术第二方面所述的编码核酸、本专利技术第四方面所述的衍生物和/或本专利技术第五方面所述的药物组合物。
14、本专利技术第七方面提供了本专利技术第一方面所述的截短突变体、本专利技术第二方面所述的编码核酸、本专利技术第四方面所述的衍生物和/或本专利技术第五方面所述的药物组合物在制备预防uvb诱导皮肤光损伤的产品中的应用。
15、本专利技术第八方面提供了一种制备本专利技术第一方面所述的截短突变体的方法，所述方法包括基因工程技术和人工合成。
16、进一步，所述基因工程技术是指将本专利技术第二方面所述的编码核酸与载体连接，得到本专利技术第二方面所述的重组载体，将重组载体转化至宿主细胞中得到本专利技术第二方面所述的重组宿主细胞，将重组宿主细胞培养、表达并生产本专利技术第一方面所述的截短突变体。
17、本专利技术的优点和有益效果：
18、本专利技术发现了perk能够在uvb刺激作用下结合p53并介导其磷酸化修饰反应和p53-perp途径活化反应。并提供了一种去除n末端的perk c末端突变体，其能够拮抗uvb诱导的p53-perp途径活化及促细胞凋亡效应，这一突变体在防控uvb诱导光损伤反应防控中具有潜在应用价值。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种PERK蛋白的截短突变体，其特征在于，所述截短突变体的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。
2.一种编码核酸，包含所述编码核酸的重组载体或包含所述编码核酸或所述载体的重组宿主细胞，其特征在于，所述编码核酸可编码权利要求1所述的截短突变体，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。
3.一种引物，包含正向引物和反向引物，其特征在于，所述引物可扩增权利要求2所述的编码核酸；
4.一种权利要求1所述的截短突变体或权利要求2所述的编码核酸的衍生物，其特征在于，
5.一种预防UVB诱导皮肤光损伤的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含权利要求1所述的截短突变体；或
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或赋形剂，如稳定剂，缓冲剂，表面活性剂，盐和/或防腐剂。
7.一种预防UVB诱导皮肤光损伤的产品，其特征在于，所述产品包含权利要求1所述的截短突变体、权利要求2所述的编码核酸、权利要求4所述的衍生物和/或权利要求5-6任一项所述的药物组合物。
8.权利要求1所述的截短突变体、权利要求2所述的编码核酸、权利要求4所述的衍生物和/或权利要求5-6所述的药物组合物在制备预防UVB诱导皮肤光损伤的产品中的应用。
9.一种制备权利要求1所述的截短突变体的方法，其特征在于，所述方法包括基因工程技术和人工合成。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述基因工程技术是指将权利要求2所述的编码核酸与载体连接，得到权利要求2所述的重组载体，将重组载体转化至宿主细胞中得到权利要求2所述的重组宿主细胞，将重组宿主细胞培养、表达并生产权利要求1所述的截短突变体。
...【技术特征摘要】
1.一种perk蛋白的截短突变体，其特征在于，所述截短突变体的氨基酸序列如序列表中seq id no:1所示。
2.一种编码核酸，包含所述编码核酸的重组载体或包含所述编码核酸或所述载体的重组宿主细胞，其特征在于，所述编码核酸可编码权利要求1所述的截短突变体，其核苷酸序列如序列表中seq id no:2所示。
3.一种引物，包含正向引物和反向引物，其特征在于，所述引物可扩增权利要求2所述的编码核酸；
4.一种权利要求1所述的截短突变体或权利要求2所述的编码核酸的衍生物，其特征在于，
5.一种预防uvb诱导皮肤光损伤的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含权利要求1所述的截短突变体；或
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或赋形剂，如稳定剂，缓冲剂，表面...
【专利技术属性】
技术研发人员：宋伦，苗玉萌，张冲冲，王伟，刘智慧，张晓丹，刘琨，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。