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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物产业领域,具体涉及一种裂解细胞的方法、装置及其应用。
技术介绍
1、细胞裂解技术,又称为细胞破碎技术,是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内容物包括目的产物成分释放出来的技术,是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。细胞裂解是改变细胞通透性和活性的重要实验方法,在诸多生物化学实验和检测中有着广泛的应用。
2、裂解细胞的方法大致分为机械裂解和非机械裂解两类,机械裂解包括研磨法、滚珠搅拌法、超声波破碎法、高压匀浆破碎法等;非机械裂解包括反复冻融破碎法、高温裂解法、酶溶裂解法、化学破碎法等。机械裂解是比较激烈的方法,可以更全面的裂解细胞,但会造成细胞内dna的损伤;而非机械裂解通常比较温和,较少使dna断裂,但其效率较机械裂解低。
3、裂解细胞的方法虽然有多种,但是总的来说,这些方法都要求有专业的设备和一定的操作技术,往往只能由专业的实验人员在实验室内完成,这极大的限制了这项技术的使用,尤其是在居家检测方面的使用。
技术实现思路
1、基于以上技术问题,为了克服上述技术上的不足,本专利技术提供了一种常温雾化连续流裂解细胞的方法,该方法同时利用了化学裂解法和超声裂解法,只需要使用少量的裂解液来进行细胞裂解,提高了细胞裂解的速度,收率和丰度;同时,利用该方法,本专利技术提供了一种细胞裂解装置和样品收集装置,提高了检测的速度和准确性,并且大大的提高了检测的便捷性,不具备专业知识和技能的人员一样可以快速的完成操作。
2、本专利技
3、本专利技术第二方面的目的,在于提供一种细胞裂解装置。
4、本专利技术第三方面的目的,在于提供一种应用。
5、为了实现本专利技术上述的目的,本专利技术采取的技术方案是:
6、本专利技术的第一个方面,提供一种细胞裂解方法,包括以下步骤:
7、将细胞样品固定在载台表面,将裂解液雾化并冲击细胞,收集细胞裂解液。
8、优选地,所述载体表面覆盖疏水材料。
9、优选地,所述疏水材料包括聚乙烯、聚丙烯、聚四氟乙烯、水性丙烯酸酯、疏水玻璃、疏水陶瓷、疏水金属中的至少一种。
10、优选地,所述载体表面具有微纳结构。
11、优选地,所述微纳结构指表面人为设计的、具有微米或纳米尺度特征尺寸、按照特定方式排布的功能结构。通过微纳结构增大比表面积可以提高表面对样品细胞的吸附能力,避免样本细胞在受到雾化冲击过程中从载体材料上脱落影响裂解效率。进一步地,所述微纳结构可以具备特定的形态且定向排列,具备液体定向输送的功能,可以导引并加速载体表面凝结的裂解液液滴流动,从而避免裂解液液滴由于过多聚集而影响裂解的收率。
12、优选地,所述微纳结构是通过纤维织造形成或者通过微纳加工制备。目前微纳结构的制造方式包括微纳加工和纤维织造两种,其中微纳加工主要是光刻蚀、模板制造等,能形成可以相对复杂和丰富的微纳结构但成本偏高,不适合于规模制造;而纤维制造法形成的微纳结构相对简单且种类较少,但是成本较低,适合目前规模化制造。
13、优选地,所述裂解液包括ripa裂解液、sds裂解液、np40裂解液、tris-triton裂解液、ack裂解液、urea裂解液、tris-hcl裂解液中的至少一种。
14、优选地,所述细胞包括生殖系统脱落细胞、呼吸系统脱落细胞、消化系统脱落细胞、泌尿系统脱落细胞、皮肤脱落细胞中的至少一种。在本专利技术的一些实施方式中,所述细胞为生殖系统粘膜上皮细胞,包括但不限于阴道上皮细胞、子宫颈上皮细胞。
15、优选地,所述样品为通过自然分泌液采集,也可以是通过人工刷取、蘸取等方式直接采集从上皮组织剥离的细胞。优选地,所述样品为组织分泌物或采样拭子刮取的脱落物。在妇科液基细胞学检查中,采用采样刷从宫颈处刷取采集脱落的细胞样本和宫颈分泌物。
16、优选地,所述裂解液雾化的方法包括电流体雾化、超声波雾化、压缩空气式雾化、旋转盘雾化、涡流雾化中的至少一种。
17、在本专利技术的一些实施方式中,所述裂解液雾化的方法包括超声波雾化。
18、优选地,所述超声波雾化是指通过高频振动形成超声波,将液体打碎成小液滴的雾化方法。
19、优选地,所述高频振动可以由压电、磁致伸缩和电致伸缩等方法产生。所述压电是指对超声换能器(通常为石英或者陶瓷)施加电压,导致换能器发生机械形变,产生超声波的高频振动。所述磁致伸缩是指,对磁致伸缩材料(如镍或钴)施加磁场,导致其发生机械变形,产生超声波的高频振动。所述电致伸缩是指,对电致伸缩材料(如锆钛酸铅等材料)施加电场,导致其发生机械变形,产生超声波的高频振动。
20、在本专利技术的一些实施方式中,所述超声波雾化基于压电超声的形式进行。
21、在本专利技术的一些实施方式中,采用雾化片进行超声波雾化,所述雾化的震荡频率为1.7mhz~2.4mhz;所述电压为3~12v。
22、在本专利技术的第一个方面中,本专利技术将裂解液成分的化学裂解和超声雾化冲击的物理裂解结合,将细胞样品固定在载体材料上,通过少量的裂解液,在化学破坏和物理冲击的双重作用下即可实现对细胞的裂解效果。该方法并不需要常规裂解中所需要的离心机、移液器等负责操作仪器,可以被设计在便携式的装置中,具有快速、便携、操作方便等特点。
23、本专利技术的第二个方面,提供一种细胞裂解装置,细胞裂解装置包括裂解室、雾化器、载台、衬底层和载体层,所述裂解室用于储存裂解液,所述雾化器包括进液端和雾化端,所述进液端与所述裂解室相连通,所述雾化端用于将所述裂解液喷出射流,所述载台与所述雾化端之间设置用于形成射流的间隔空间,所述载台用于承载细胞样品,所述所述衬底层的一侧设置有与所述载台连接的连接结构,所述载体层可分离地设置在所述衬底层的另一侧,所述载体层开设有孔隙,所述孔隙的尺寸小于待收集的细胞样品的尺寸。
24、优选地,所述载台的表面为疏水材料。
25、优选地,所述细胞裂解装置还包括收集室,所述载台包括相互连接的样品部和导流部,裂解液通过所述雾化端和所述间隔空间喷射至所述样品部,所述细胞样品设置于所述样品部,所述导流部用于引导裂解液和裂解产物流入所述收集室。
26、优选地,所述收集室包括收集端,所述样品部高于所述收集端,所述导流部由所述样品部倾斜向下地向所述收集端延伸。
27、优选地,所述收集室和所述裂解室相互连通,所述收集室和所述裂解室之间设置有能够阻挡所述裂解产物的过滤结构。
28、优选地,所述收集室设置有可供检测试纸插入的检测口,所述细胞裂解装置还包括可破坏或者可活动的封口结构,所述封口结构设置在所述检测口。
29、在本专利技术的第二个方面中,进一步提供了可以用于实施本专利技术第一个方面的细胞裂解方法的细胞裂解装置,该细胞裂解装置通过少量的裂解液,在化学破坏和物理冲击的双重作用下即可实现对细胞的裂解效果,具有快速、便携本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种细胞裂解方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的细胞裂解方法,其特征在于:
3.根据权利要求2所述的细胞裂解方法,其特征在于:
4.一种细胞裂解装置,其特征在于:
5.根据权利要求4所述的细胞裂解装置,其特征在于,所述细胞裂解装置还包括收集室,所述载台包括相互连接的样品部和导流部,裂解液通过所述雾化端和所述间隔空间喷射至所述样品部,所述细胞样品设置于所述样品部,所述导流部用于引导裂解液和裂解产物流入所述收集室。
6.根据权利要求5所述的细胞裂解装置,其特征在于,所述载台的表面为疏水材料。
7.根据权利要求5所述的细胞裂解装置,其特征在于,所述收集室包括收集端,所述样品部高于所述收集端,所述导流部由所述样品部倾斜向下地向所述收集端延伸。
8.根据权利要求7所述的细胞裂解装置,其特征在于,所述收集室和所述裂解室相互连通,所述收集室和所述裂解室之间设置有能够阻挡所述裂解产物的过滤结构。
9.根据权利要求6所述的细胞裂解装置,其特征在于,所述收集室设置有可供检测试纸插
10.权利要求1~3任一项所述的细胞裂解方法、权利要求4~9任一项所述的细胞裂解装置在制备检测产品中的应用;
...【技术特征摘要】
1.一种细胞裂解方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的细胞裂解方法,其特征在于:
3.根据权利要求2所述的细胞裂解方法,其特征在于:
4.一种细胞裂解装置,其特征在于:
5.根据权利要求4所述的细胞裂解装置,其特征在于,所述细胞裂解装置还包括收集室,所述载台包括相互连接的样品部和导流部,裂解液通过所述雾化端和所述间隔空间喷射至所述样品部,所述细胞样品设置于所述样品部,所述导流部用于引导裂解液和裂解产物流入所述收集室。
6.根据权利要求5所述的细胞裂解装置,其特征在于,所述载台的表面为疏水材料。
7.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员:李华智,
申请(专利权)人:广州万方健医药有限公司,
类型:发明
国别省市:
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