【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及细胞生物学，具体涉及一种细胞培养基添加剂、细胞培养基及其在制备细胞药物中的应用。
技术介绍
1、细胞培养基是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境，血清是在细胞培养中广泛使用的一种天然培养基添加剂，但是该种包含血清的细胞培养基存在诸多缺点，如不同批次间容易存在差异，有潜在的病原体污染风险，若使用动物血清培养基培育出来的细胞输注到人体，则可能存在人体异源性排斥和冲突，存在免疫反应风险，也存在伦理问题且成本也较高。
2、近来，国内外对无血清培养基的需求迅速增长，人们也研发出了多种替代血清的细胞培养基添加剂，如专利us18551128公开了使用螺旋藻水解液替代血清，专利es2000969319t公开了使用大豆水解物的无血清细胞培养基，专利kr1020220185953公开了包括大米提取物和/或蛋清提取物的无血清培养基，寻找一种代替血清的细胞培养基添加剂一直是本领域技术人员追求的目标。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题是提供一种新的细胞培养基添加剂、包括其的细胞培养基及其在制备细胞药物中的应用。
2、为解决以上技术问题，本专利技术采取的技术方案为：
3、本专利技术第一方面提供一种细胞培养基添加剂，所述细胞培养基添加剂为干细胞化铁皮石斛外泌体，所述干细胞化铁皮石斛外泌体中每100ng总rna中lja-mir408-p5_1ss8at的初始拷贝数大于1×105。
4、在一实施
5、在一实施例中，所述干细胞化铁皮石斛外泌体中每100ng总rna中ath-mir156a-5p的初始拷贝数大于1×105。
6、在一实施例中，所述干细胞化铁皮石斛外泌体中每100ng总rna中ath-mir156a-5p的初始拷贝数大于1×106。
7、在一实施例中，所述干细胞化铁皮石斛外泌体是提取自通过铁皮石斛干细胞培养得到的铁皮石斛的外泌体。
8、在一实施例中，所述干细胞化铁皮石斛外泌体的制备包括以下步骤：
9、s1准备铁皮石斛干细胞系：将冻存的铁皮石斛干细胞系复苏；
10、s2干细胞化铁皮石斛培育：将复苏后铁皮石斛干细胞系培育收获得到干细胞化铁皮石斛；
11、s3干细胞化铁皮石斛外泌体提取：将所述干细胞化铁皮石斛匀浆、过滤、离心后得到所述干细胞化铁皮石斛外泌体。
12、在一实施例中，所述s2中培育所述铁皮石斛干细胞系时，将所述铁皮石斛干细胞系置于加入活性炭和植物生长调节剂的凝胶ms固体培养基上，先经自然光培育，待诱导出原球茎后，更换至加入所述活性炭和植物生长调节剂液体培养基上。
13、本专利技术第二方面提供一种细胞培养基，包括基础培养基和如上所述的细胞培养基添加剂。
14、在一实施例中，所述细胞培养基为无血清细胞培养基。
15、在一实施例中，所述基础培养基为mem、dmem、imdm、rpmi1640、f12、α-mem中的一种。
16、在一实施例中，所述细胞培养基应用于培养免疫细胞或间充质干细胞。
17、在一实施例中，所述间充质干细胞具体为骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、胎盘间充质干细胞或脐带血间充质干细胞。
18、在一实施例中，所述细胞培养基还包括生长因子，所述生长因子为egf、bfgf、igf、kgf、hgf和tgf中的一种。
19、在一实施例中，所述细胞培养基中所述干细胞化铁皮石斛外泌体的含量为5-50ug/ml，例如5ug/ml、10ug/ml、15ug/ml、20ug/ml、25ug/ml、30ug/ml、35ug/ml、40ug/ml、45ug/ml、50ug/ml。
20、在一实施例中，所述生长因子的含量为5-20ng/ml，例如5ng/ml、10ng/ml、15ng/ml、20ng/ml。
21、本专利技术第三方面提供一种所述的细胞培养基添加剂或所述的细胞培养基在制备细胞药物中的应用。
22、其中，所述细胞药物包括但不限于干细胞药物、免疫细胞药物等等。
23、由于上述技术方案运用，本专利技术与现有技术相比具有下列优点：
24、本专利技术的细胞培养基添加剂为干细胞化铁皮石斛外泌体(sdo-evs)，相较于普通铁皮石斛外泌体(do-evs)，其中的lja-mir408-p5_1ss8at含量高，且干细胞化铁皮石斛外泌体稳定性好，易于培养获取，避免了使用血清作为细胞培养基添加剂时存在的病原体污染的问题，提高了细胞培养的一致性和可重复性，同时也降低了培养的成本。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种细胞培养基添加剂，其特征在于，所述细胞培养基添加剂为干细胞化铁皮石斛外泌体，所述干细胞化铁皮石斛外泌体中每100ng总RNA中lja-MIR408-p5_1ss8AT的初始拷贝数大于1×105。
2.根据权利要求1所述的细胞培养基添加剂，其特征在于：所述干细胞化铁皮石斛外泌体中每100ng总RNA中ath-miR156a-5p的初始拷贝数大于1×105。
3.根据权利要求1所述的细胞培养基添加剂，其特征在于：所述干细胞化铁皮石斛外泌体是提取自通过铁皮石斛干细胞培养得到的铁皮石斛的外泌体。
4.根据权利要求1所述的细胞培养基添加剂，其特征在于：所述干细胞化铁皮石斛外泌体的制备包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的细胞培养基添加剂，其特征在于：所述S2中培育所述铁皮石斛干细胞系时，将所述铁皮石斛干细胞系置于加入活性炭和植物生长调节剂的凝胶MS固体培养基上，先经自然光培育，待诱导出原球茎后，更换至加入所述活性炭和植物生长调节剂液体培养基上。
6.一种细胞培养基，其特征在于：包括基础培养基和如权利要求1-5任一项所述的
7.根据权利要求6所述的细胞培养基，其特征在于：所述细胞培养基为无血清细胞培养基。
8.根据权利要求6所述的细胞培养基，其特征在于：所述基础培养基为MEM、DMEM、IMDM、RPMI1640、F12、α-MEM中的一种。
9.根据权利要求6所述的细胞培养基，其特征在于：所述细胞培养基应用于培养免疫细胞或间充质干细胞。
10.根据权利要求9所述的细胞培养基，其特征在于：所述间充质干细胞具体为骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、胎盘间充质干细胞或脐带血间充质干细胞。
11.根据权利要求6所述的细胞培养基，其特征在于：所述细胞培养基还包括生长因子，所述生长因子为EGF、bFGF、IGF、KGF、HGF和TGF中的一种。
12.根据权利要求6所述的细胞培养基，其特征在于：所述细胞培养基中所述干细胞化铁皮石斛外泌体的含量为5-50ug/ml。
13.根据权利要求11所述的细胞培养基，其特征在于：所述生长因子的含量为5-20ng/ml。
14.一种如权利要求1至5中任一项所述的细胞培养基添加剂或权利要求6至13中任一项所述的细胞培养基在制备细胞药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种细胞培养基添加剂，其特征在于，所述细胞培养基添加剂为干细胞化铁皮石斛外泌体，所述干细胞化铁皮石斛外泌体中每100ng总rna中lja-mir408-p5_1ss8at的初始拷贝数大于1×105。
2.根据权利要求1所述的细胞培养基添加剂，其特征在于：所述干细胞化铁皮石斛外泌体中每100ng总rna中ath-mir156a-5p的初始拷贝数大于1×105。
3.根据权利要求1所述的细胞培养基添加剂，其特征在于：所述干细胞化铁皮石斛外泌体是提取自通过铁皮石斛干细胞培养得到的铁皮石斛的外泌体。
4.根据权利要求1所述的细胞培养基添加剂，其特征在于：所述干细胞化铁皮石斛外泌体的制备包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的细胞培养基添加剂，其特征在于：所述s2中培育所述铁皮石斛干细胞系时，将所述铁皮石斛干细胞系置于加入活性炭和植物生长调节剂的凝胶ms固体培养基上，先经自然光培育，待诱导出原球茎后，更换至加入所述活性炭和植物生长调节剂液体培养基上。
6.一种细胞培养基，其特征在于：包括基础培养基和如权利要求1-5任一项所述的细胞培养基添加剂。
7.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：张杰，汤子安，戴思聪，王晖，齐曼婷，汪钰宸，
申请(专利权)人：西交利物浦大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。