【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及包括与或不与一种或多种致耐受性抗原缔合的纳米颗粒的组合物，以及包括免疫调节剂(例如，人白介素-2(il-2)、il-2突变蛋白、il-2变体或il-2:抗il-2抗体免疫复合物(il-2/ic))的组合物，以及涉及为了诱导调节性t细胞(treg)(例如，抗原特异性调节性treg)扩增的目的而共同给药此类组合物的相关方法。本专利技术还提供了通过在向受试者给药包括免疫调节剂的组合物之前，向受试者给药包括与或不与和自身免疫性疾患相关联的一种或多种致耐受性抗原缔合的纳米颗粒的组合物来治疗自身免疫性疾患的方法。
技术介绍
1、自身免疫性疾患是由于无法找到其病因的免疫系统异常，机体免疫系统攻击自身正常组织、器官或其他体内组分时发生的疾病。这些自身免疫性疾患是全身性疾病，几乎可以发生在身体的所有部位，包括神经系统、胃肠道系统、内分泌系统、皮肤、骨骼系统和血管组织。已知自身免疫性疾患影响世界人口的约5-8％，但由于对自身免疫性疾患的理解和诊断这些疾病的方法的局限性，自身免疫性疾患所报道的患病率低于实际水平。
2、需要用于治疗自身免疫性病症的改进的组合物和方法。
3、本专利技术解决了这些需求。
技术实现思路
1、在开发本专利技术实施方式的过程中进行的实验引起了在体内诱导高频率抗原特异性treg而无需离体细胞操作的新策略的发展。此类实验引起了对于将纳米盘(nanodisc)与经修饰的il-2相结合以在体内激发出前所未有水平的抗原特异性treg的新策略的开发和优化。
2、可以预见的是，与il-2/ic一起将肽抗原递送至淋巴组织以最大化抗原特异性treg诱导会是理想的。本文所述的实验首次报道了，与单独的il-2/ic相比，淋巴靶向纳米盘介导的肽的递送与il-2/ic的联合疗法得到了抗原特异性treg的显著扩增。
3、还可以预见的是，实际的治疗方法会是至关重要的。此类实验表明，首先理想地给药(例如，皮下)纳米盘，随后全身给药il-2和/或突变蛋白/工程il-2。这确保了抗原特异性treg首先得以准备并生成，并且随后突变蛋白/工程il-2的给药触发抗原特异性treg的强劲增殖。进一步设想给药维持剂量的纳米盘和/或突变蛋白/工程il-2以长期维持抗原特异性treg。
4、因此，本专利技术涉及包括与或不与一种或多种致耐受性抗原缔合(例如，复合、缀合、包封、吸收、吸附、混合)的纳米颗粒的组合物，以及包括免疫调节剂(例如，人白介素-2(il-2)、il-2突变蛋白、il-2变体或il-2:抗il-2抗体免疫复合物(il-2/ic))的组合物，以及涉及为了诱导调节性t细胞(treg)(例如，抗原特异性调节性treg)扩增的目的而共同给药此类组合物的相关方法。本专利技术还提供了通过在向受试者给药包括免疫调节剂的组合物之前，向受试者给药包括与或不与和自身免疫性疾患相关联的一种或多种致耐受性抗原缔合的纳米颗粒的组合物来治疗自身免疫性疾患的方法。
5、在某些实施方式中，本专利技术提供了在受试者(例如，患有自身免疫性疾患或处于患有自身免疫性疾患风险的人受试者)体内对调节性treg(例如，cd4+cd25高foxp3+)的体内扩增的方法，包括向所述受试者给药包括一种或多种纳米颗粒的组合物，随后(例如，在1秒、2秒、1分钟、1小时、1天、1周、1个月、1年等之后)向所述受试者给药包括能够在所述受试者体内扩增treg的一种或多种免疫调节剂(例如，il-2、il-2突变蛋白、il-2变体或il-2/ic)的组合物。在一些实施方式中，包括一种或多种纳米颗粒的组合物与mtor抑制剂(例如，雷帕霉素或其变体)缔合(例如，复合、缀合、包封、吸收、吸附、混合)。在一些实施方式中，在受试者体内对抗原特异性调节性treg(例如，cd4+cd25高foxp3+)的体内扩增对特定组织区域(例如，与一种或多种自身免疫疾患相关的特定组织区域)具有特异性。
6、在某些实施方式中，本专利技术提供了在受试者(例如，患有自身免疫性疾患或处于患有自身免疫性疾患风险的人受试者)体内对抗原特异性的调节性treg(例如，cd4+cd25高foxp3+)的体内扩增的方法，包括向所述受试者给药包括与一种或多种致耐受性抗原缔合的一种或多种纳米颗粒的组合物，随后(例如，在1秒、2秒、1分钟、1小时、1天、1周、1个月、1年等之后)向所述受试者给药包括能够扩增抗原特异性treg的一种或多种免疫调节剂(例如，人细胞因子(例如，il-2、il-2突变蛋白、il-2变体或il-2/ic))的组合物，其中，“抗原特异性”对所述一种或多种致耐受性抗原(其与包括与一种或多种致耐受性抗原缔合的纳米颗粒相关)具有特异性。在一些实施方式中，在受试者体内对抗原特异性调节性treg(例如，cd4+cd25高foxp3+)的体内扩增对特定组织区域(例如，与一种或多种自身免疫疾患相关的特定组织区域)具有特异性。
7、在某些实施方式中，本专利技术提供了用于促进受试者(例如，患有自身免疫性疾患或处于患有自身免疫性疾患风险的人受试者)体内对自身免疫性疾患相关的抗原的强免疫耐受的方法，包括向所述受试者给药包括一种或多种纳米颗粒的组合物，随后(例如，在1秒、2秒、1分钟、1小时、1天、1周、1个月、1年等之后)向所述受试者给药包括能够在受试者体内扩增treg(例如，cd4+cd25高foxp3+)的一种或多种免疫调节剂(例如，人细胞因子(例如，il-2、il-2突变蛋白、il-2变体或il-2/ic))的组合物。在一些实施方式中，所述包括一种或多种纳米颗粒的组合物与mtor抑制剂(例如，雷帕霉素或其变体)缔合(例如，复合、缀合、包封、吸收、吸附、混合)。在一些实施方式中，促进与受试者中自身免疫性疾患相关抗原的强免疫耐受对特定组织区域(例如，与一种或多种自身免疫疾患相关的特定组织区域)具有特异性。
8、在某些实施方式中，本专利技术提供了用于促进与受试者(例如，患有自身免疫性疾患或处于患有自身免疫性疾患风险的人受试者)中自身免疫性疾患相关的抗原的强免疫耐受的方法，包括向所述受试者给药包括与一种或多种致耐受性抗原缔合的一种或多种纳米颗粒的组合物，随后(例如，在1秒、2秒、1分钟、1小时、1天、1周、1个月、1年等之后)向受试者给药包括能够扩增抗原特异性treg(例如，cd4+cd25高foxp3+)的一种或多种免疫调节剂(例如，人细胞因子(例如，il-2、il-2突变蛋白、il-2变体或il-2/ic))的组合物，其中，“抗原特异性”对一种或多种致耐受性抗原(其与包括与一种或多种致耐受性抗原缔合的纳米颗粒相关)具有特异性本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种方法，所述方法包括向受试者给药：
2.根据权利要求1所述的方法，
3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述包括能够扩增Treg的免疫调节剂的组合物包括在纳米颗粒内，使得所述纳米颗粒与所述能够扩增Treg的免疫调节剂缔合。
4.根据权利要求2-3所述的方法，其中，所述包括与一种或多种致耐受性抗原缔合的纳米颗粒的组合物在给药所述包括能够扩增Treg的免疫调节剂的组合物之前给药并且不与所述包括能够扩增Treg的免疫调节剂的组合物同时给药(例如，1秒之前、2秒之前、1分钟之前、1小时之前、1天之前、1周之前、1个月之前、1年之前等)。
5.根据权利要求4所述的方法，其中，在给药所述包括与一种或多种致耐受性抗原缔合的纳米颗粒的组合物的三十天内给药所述包括能够扩增Treg的免疫调节剂的组合物。
6.根据权利要求1或2或3所述的方法，其中，所述纳米颗粒是sHDL纳米颗粒。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述sHDL纳米颗粒包括至少一种磷脂和至少一种HDL载脂蛋白或载脂蛋白模拟物的混合物。
8.根据
9.根据权利要求7所述的方法，其中，所述HDL载脂蛋白组分选自由以下组成的组：载脂蛋白A-I(apoA-I)、载脂蛋白A-II(apoA-II)、载脂蛋白A-II xxx(apoA-II-xxx)、载脂蛋白A4(apoA4)、载脂蛋白Cs(apoCs)、载脂蛋白E(apoE)、载脂蛋白A-I milano(apoA-I-milano)、载脂蛋白A-Iparis(apoA-I-paris)、载脂蛋白M(apoM)、HDL载脂蛋白模拟物、前原载脂蛋白、前原ApoA-I、原ApoAI、前原ApoA-II、原ApoAII、前原ApoA-IV、原ApoA-IV、ApoA-V、前原ApoE、原ApoE、前原ApoAIMilano、原ApoA-IMilano、前原ApoA-IParis、原ApoA-IParis及其混合物。
10.根据权利要求7所述的方法，其中，所述载脂蛋白模拟物由以下的任一个来描述：SEQ ID NO:1-336和WDRVKDLATVYVDVLKDSGRDYVSQF(SEQ ID NO:341)、LKLLDNWDSVTSTFSKLREOL(SEQ ID NO:342)、PVTOEFWDNLEKETEGLROEMS(SEQ ID NO:343)、KDLEEVKAKVQ(SEQ ID NO:344)、KDLEEVKAKVO(SEQ ID NO:345)、PYLDDFQKKWQEEMELYRQKVE(SEQ ID NO:346)、PLRAELQEGARQKLHELOEKLS(SEQ ID NO:347)、PLGEEMRDRARAHVDALRTHLA(SEQ ID NO:348)、PYSDELRQRLAARLEALKENGG(SEQ ID NO:349)、ARLAEYHAKATEHLSTLSEKAK(SEQ ID NO:350)、PALEDLROGLL(SEQ ID NO:351)、PVLESFKVSFLSALEEYTKKLN(SEQ ID NO:352)、PVLESFVSFLSALEEYTKKLN(SEQ ID NO:353)、PVLESFKVSFLSALEEYTKKLN(SEQ ID NO:352)、TVLLLTICSLEGALVRRQAKEPCV(SEQ ID NO:354)QTVTDYGKDLME(SEQ ID NO:355)、KVKSPELOAEAKSYFEKSKE(SEQ ID NO:356)、VLTLALVAVAGARAEVSADOVATV(SEQ ID NO:357)、NNAKEAVEHLOKSELTOOLNAL(SEQ ID NO:358)、LPVLVWLSIVLEGPAPAOGTPDVSS(SEQ ID NO:359)、LPVLVVVLSIVLEGPAPAQGTPDVSS(SEQ ID NO:360)、ALDKLKEFGNTLEDKARELIS(SEQ IDNO:361)、VVALLALLASARASEAEDASLL(SEQ ID ...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种方法，所述方法包括向受试者给药：
2.根据权利要求1所述的方法，
3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述包括能够扩增treg的免疫调节剂的组合物包括在纳米颗粒内，使得所述纳米颗粒与所述能够扩增treg的免疫调节剂缔合。
4.根据权利要求2-3所述的方法，其中，所述包括与一种或多种致耐受性抗原缔合的纳米颗粒的组合物在给药所述包括能够扩增treg的免疫调节剂的组合物之前给药并且不与所述包括能够扩增treg的免疫调节剂的组合物同时给药(例如，1秒之前、2秒之前、1分钟之前、1小时之前、1天之前、1周之前、1个月之前、1年之前等)。
5.根据权利要求4所述的方法，其中，在给药所述包括与一种或多种致耐受性抗原缔合的纳米颗粒的组合物的三十天内给药所述包括能够扩增treg的免疫调节剂的组合物。
6.根据权利要求1或2或3所述的方法，其中，所述纳米颗粒是shdl纳米颗粒。
7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述shdl纳米颗粒包括至少一种磷脂和至少一种hdl载脂蛋白或载脂蛋白模拟物的混合物。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述磷脂选自由以下组成的组：1,2-二月桂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱；1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱；1,2-二棕榈酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱；1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱；1,2-二花生酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱；1,2-二山嵛酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱；1,2-二木蜡酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱；1,2-二肉豆蔻油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱；1,2-二肉豆蔻反油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱；
9.根据权利要求7所述的方法，其中，所述hdl载脂蛋白组分选自由以下组成的组：载脂蛋白a-i(apoa-i)、载脂蛋白a-ii(apoa-ii)、载脂蛋白a-ii xxx(apoa-ii-xxx)、载脂蛋白a4(apoa4)、载脂蛋白cs(apocs)、载脂蛋白e(apoe)、载脂蛋白a-i milano(apoa-i-milano)、载脂蛋白a-iparis(apoa-i-paris)、载脂蛋白m(apom)、hdl载脂蛋白模拟物、前原载脂蛋白、前原apoa-i、原apoai、前原apoa-ii、原apoaii、前原apoa-iv、原apoa-iv、apoa-v、前原apoe、原apoe、前原apoaimilano、原apoa-imilano、前原apoa-iparis、原apoa-iparis及其混合物。
10.根据权利要求7所述的方法，其中，所述载脂蛋白模拟物由以下的任一个来描述：seq id no:1-336和wdrvkdlatvyvdvlkdsgrdyvsqf(seq id no:341)、lklldnwdsvtstfsklreol(seq id no:342)、pvtoefwdnleketeglroems(seq id no:343)、kdleevkakvq(seq id no:344)、kdleevkakvo(seq id no:345)、pylddfqkkwqeemelyrqkve(seq id no:346)、plraelqegarqklheloekls(seq id no:347)、plgeemrdrarahvdalrthla(seq id no:348)、pysdelrqrlaarlealkengg(seq id no:349)、arlaeyhakatehlstlsekak(seq id no:350)、paledlrogll(seq id no:351)、pvlesfkvsflsaleeytkkln(seq id no:352)、pvlesfvsflsaleeytkkln(seq id no:353)、pvlesfkvsflsaleeytkkln(seq id no:352)、tvlllticslegalvrrqakepcv(seq id no:354)qtvtdygkdlme(seq id no:355)、kvkspeloaeaksyfekske(seq id no:356)、vltlalvavagaraevsadovatv(seq id no:357)、nnakeavehlokseltoolnal(seq id no:358)、lpvlvwlsivlegpapaogtpdvss(seq id no:359)、lpvlvvvlsivlegpapaqgtpdvss(seq id no:360)、aldklkefgntledkarelis(seq idno:361)、vvallallasaraseaedasll(seq id no:362)、hlrklrkrllrdaddlqkrlavyoa(seqid no:363)、aqawgerlrarmeemgsrtrdr(seq id no:364)、ldevkeqvaevrakleeqaq(seq idno:365)、dwlkafydkvaeklkeaf(seq id no:236)、dwlkafydkvaeklkeafpdwakaaydkaaekakeaa(seq id no:366)、pvldlfrellnellealkqkl(seq id no:367)、pvldlfrellnellealkqkla(seq id no:368)、pvldlfrellnellealkqklk(seq id no:4)、pvldlfrellnellealkqkla(seq id no:369)、pvldlfrellnellealkkllk(seq id no:370)、pvldlfrellnellealkklla(seq id no:371)、plldlfrellnellealkklla(seq id no:372)和evrskleewfaafrefaeeflarlks(seq id no:373)。
11.根据权利要求2-10所述的方法，其中，所述一种或多种致耐受性抗原是包括长度为3个氨基酸至50个氨基酸的致耐受性抗原。
12.根据权利要求2-10所述的方法，其中，所述一种或多种致耐受性抗原是包括含有seq id no：375-796中的任一个的氨基酸序列的多肽的致耐受性抗原。
13.根据权利要求2-10所述的方法，其中，所述一种或多种致耐受性抗原是人同种异体移植抗原。
14.根据权利要求13所述的方法，其中，所述人同种异体移植抗原选自各种mhc i类和mhc ii类单倍型蛋白的亚基，以及包括rhce、kell、kidd、duffy和ss的次要血型抗原上的单氨基酸多态性。
15.根据权利要求2-10所述的方法，其中，所述一种或多种致耐受性抗原对1型糖尿病具有特异性。
16.根据权利要求15所述的方法，其中，所述致耐受性抗原选自
17.根据权利要求2-10所述的方法，其中，所述致耐受性抗原对以下疾患中的一种或多种具有特异性：类风湿性关节炎、多发性硬化、原发性胆汁性胆管炎、原发性硬化性胆管炎、mog抗体疾病、糖尿病、甲状腺自身免疫性疾病、甲状腺相关眼病和皮肤病、甲状旁腺功能减退症、艾迪生病、卵巢早衰、自身免疫性垂体炎、垂体自身免疫性疾病、免疫性胃炎、恶性贫血、乳糜泻、白癜风、重症肌无力、寻常型天疱疮及其变种、大疱性类天疱疮、疱疹样皮炎杜林病、获得性大疱性表皮松解症、系统性硬化症、混合结缔组织病、舍格伦综合征、系统性红斑狼疮、古德帕斯丘综合征、风湿性心脏病、自身免疫性多腺体综合征1型、aicardi-goutières综合征、急性胰腺炎年龄依赖性黄斑变性、酒精性肝病、肝纤维化、转移、心肌梗死、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、帕金森病、多发性关节炎/胎儿和新生儿贫血、脓毒症和炎性肠病、炎性肠病、移植相关疾患、一种或多种过敏、呼吸病症(例如，哮喘)和gvhd。
18.根据权利要求2-10所述的方法，其中，所述一种或多种致耐受性抗原包括选自以下的致耐受性抗原中的一种或多种：甲状腺球蛋白(tg)、甲状腺过氧化物酶(tpo)、促甲状腺激素受体(tshr)、钠碘转运体(nis)、巨蛋白、甲状腺自身抗原包括tshr、胰岛素样生长因子1受体、钙敏感受体、21-羟化酶、17α-羟化酶和p450侧链裂解酶(p450scc)、acth受体、p450c21、p450c17、fsh受体、α-烯醇化酶、垂体特异性蛋白因子(pgsf)1a和2，以及2型碘甲腺原氨酸脱碘酶、髓鞘碱性蛋白、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白、蛋白脂质蛋白、胶原蛋白ii、h+、k+-atp酶、组织转谷氨酰胺酶和麦醇溶蛋白、酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白1和2、乙酰胆碱受体、桥粒黏蛋白3、1和4、pemphaxin、桥粒胶蛋白、斑珠蛋白、斑周蛋白、桥粒斑蛋白、乙酰胆碱受体、bp180、bp230、网蛋白、层粘连蛋白5、肌内膜、组织转谷氨酰胺酶、胶原蛋白vii、基质金属蛋白酶1和3、胶原蛋白特异性分子伴侣热-休克蛋白47、原纤维蛋白1、pdgf受体、scl-70、u1 rnp、th/to、ku、jo1、nag-2、着丝粒蛋白、拓扑异构酶i、核仁蛋白、rna聚合酶i、ii和iii、pm-slc、纤维蛋白、b23、u1snrnp、核抗原ss-a和ss-b、胞衬蛋白、聚(adp-核糖)聚合酶、拓扑异构酶、核蛋白，包括ss-a、高迁移率族蛋白b1(hmgb1)、核小体、组蛋白、双链dna、肾小球基底膜蛋白包括胶原蛋白iv、心肌肌球蛋白、芳香族l-氨基酸脱羧酶、组氨酸脱羧酶、半胱氨酸亚磺酸脱羧酶、色氨酸羟化酶、酪氨酸羟化酶、苯丙氨酸羟化酶、肝p450细胞色素p4501a2和2a6、sox-9、sox-10、钙敏感受体蛋白和1型干扰素干扰素α、β和ω。
19.根据权利要求2-10所述的方法，其中，所述一种或多种致耐受性抗原对乳糜泻具有特异性。
20.根据权利要求19所述的方法，其中，所述致耐受性抗原选自麦醇溶蛋白、麦谷蛋白及其能够诱导免疫应答的片段。
21.根据权利要求20所述的方法，其中，所述致耐受性抗原选自麦醇溶蛋白或其片段。
22.根据权利要求21所述的方法，其中，所述致耐受性抗原选自由α、γ和ω麦醇溶蛋白或其片段组成的组。
23.根据权利要求21或22所述的方法，其中，所述致耐受性抗原包括与seq id no:375-580中任一个的多肽序列具有至少90％序列同一性的多肽。
24.根据权利要求23所述的方法，其中，所述致耐受性抗原包括与seq id no:375-580的多肽序列中的任一个具有至少90％序列同一性的多肽。
25.根据权利要求24所述的方法，其中，所述致耐受性抗原包括具有seqid no:375-580中任一个的多肽序列的多肽。
26.根据权利要求25所述的方法，其中，所述致耐受性抗原包括具有seqid no:375-580中任一个的序列的两种或更多种多肽序列。
27.根据权利要求2-10所述的方法，其中，所述致耐受性抗原是包括以下n末端至c末端结构的多聚体致耐受性抗原：
28.根据权利要求27所述的组合物，其中，n1为1，n3为0，以及n4为0，并且所述致耐受性抗原包括以下n末端至c末端结构：
29.根据权利要求27-28所述的方法，其中，l1是包括2至200个氨基酸的肽接头。
30.根据权利要求27-29所述的方法，其中，l1是包括5至50个氨基酸的肽接头。
31.根据权利要求27-30所述的方法，其中，l1是包括甘氨酸(g)和丝氨酸(s)残基的肽接头。
32.根据权利要求27-31所述的方法，其中，l1是包括(gs)x、(ggs)x或(ggggs)x的氨基酸序列的肽接头，其中，x是1至10的整数。
33.根据权利要求27-32所述的方法，其中，p1和p2各自包括不同的致耐受性抗原。
34.根据权利要求27-32所述的方法，其中，p1和p2各自包括相同的致耐受性抗原。
35.根据权利要求27所述的组合物，其中，n1为1，n3为1，并且n4为0，并且所述致耐受性抗原包括以下n末端至c末端结构：
36.根据权利要求27-32所述的组合物，其中，l1和l3各自是独立选择的包括2至200个氨基酸的肽接头。
37.根据权利要求27所述的方法，其中，l1和l3各自是独立选择的包括5至50个氨基酸的肽接头。
38.根据权利要求27所述的方法，其中，l1和l3各自是独立选择的包括甘氨酸(g)和丝氨酸(s)残基的肽接头。
39.根据权利要求35所述的方法，其中，l1和l3各自是独立选择的包括(gs)x、(ggs)x或(ggggs)x的氨基酸序列的肽接头，其中，x是1至10的整数。
40.根据权利要求35所述的方法，其中，p1、p2和/或p3各自包括不同的致耐受性抗原。
41...
【专利技术属性】
技术研发人员：詹姆斯·J·穆恩，徐成，汉娜·多布森，徐进，谢芳，安娜·施文德曼，
申请(专利权)人：密执安大学评议会，
类型：发明
国别省市：
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