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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于农药合成,具体涉及一种二化螟性信息素的酶工艺合成方法。
技术介绍
1、cis-11-hexadecenal,化学名为顺-11-十六碳烯醛,分子式为c16h30o;cas登记号:53939-28-9。9z,12z-十八碳二烯醛是1982年有hill课题组鉴定的美国白蛾性信息素主要有效成分之一。顺-11-十六碳烯醛是二化螟性信息素主要有效成分之一。水稻二化螟,属鳞翅目lepidoptera螟蛾科pyralididae,是我国水稻作物主要害虫之一,在我国稻区分布广泛。水稻是我国最重要的粮食作物之一,二化螟在其分蘖期可造成枯鞘、枯心苗,在穗期造成虫伤株和白穗,高发期可造成40%减产,严重影响水稻的产量和品质。随着全球气候和耕作制度的改变及化学农药的使用增加,导致水稻二化螟种群数量在某些地区表现出显著上升的趋势。目前,主要以化学农药防治二化螟为主,但是,长期过度使用化学农药易引发3r问题。新型生物农药的研制是缓解抗药性和增强药效的重要方法,性信息素防治二化螟具有高效、低毒、无污染、不伤天敌等优点,其在化学台成及诱芯研发和田间应用上逐渐完善,应用前景广阔。
2、然而现有二化螟性信息素通过化学方法合成时存在如下不足:合成工艺复杂,反应时间长,反应条件严苛,进而造成难以大规模工业化生产。
技术实现思路
1、针对上述现有技术的不足,本专利技术提供一种二化螟性信息素的酶工艺合成方法,目的在于解决现有化学合成顺-11-十六碳烯醛的方法合成工艺复杂,反应时间长,反应条件严苛,进而
2、本专利技术提供的第一个技术方案为漆酶的突变体,所述突变体是将漆酶(laccase酶)亲本novozyme 809(ec 1.10.3.2)的第31位谷氨酸突变为天冬氨酸。
3、在某些实施方式中,所述亲本的氨基酸序列如seq id no.1所示。
4、本专利技术提供的第二个技术方案为编码第一个技术方案所述突变体的基因。
5、本专利技术提供的第三个技术方案为携带第二个技术方案所述基因的重组质粒。
6、本专利技术提供的第四个技术方案为表达第一个技术方案所述突变体,或含有第二个技术方案所述基因或第三个技术方案所述基因的宿主细胞。
7、本专利技术提供的第五个技术方案为一种顺-11-十六碳烯醛的制备方法,所述方法以顺-11-十六碳烯醇为底物,利用漆酶及第一个技术方案所述的突变体作为催化剂组成催化体系,催化合成顺-11-十六碳烯醛,所述催化体系中还添加有2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(tempo)。
8、在某些实施方式中,所述催化体系中,顺-11-十六碳烯醇、tempo与催化剂的物质的量浓度比为10~30:2~10:5~13。
9、进一步,所述催化体系中,顺-11-十六碳烯醇、tempo与催化剂的物质的量浓度比为15~25:4~8:7~9。
10、在某些实施方式中,所述催化体系中,顺-11-十六碳烯醇的浓度为0.015-0.025mmol/ml。
11、在某些实施方式中,所述催化体系中,所述催化剂与顺-11-十六碳烯醇的物质的量浓度之比为7~11:15~25。
12、在某些实施方式中,所述催化反应的温度为室温,催化反应的ph为3.0-7.0,催化反应的时间为24~48h。
13、本专利技术提供的第六个技术方案为第一个技术方案所述的突变体,或者第五个技术方案所述的方法在制备含二化螟性信息素的产品中的应用。
14、本专利技术的有益效果如下:本专利技术提供的制备顺-11-十六碳烯醛的方法,采用廉价易得的原料通过酶催化的方式在tempo的情况下氧化醇一步到醛,顺-11-十六碳烯醛的纯度达到90%,合成路线非常简单,反应条件温和,合成工艺简洁,可用于工业化生产。
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1.漆酶的突变体,其特征在于,所述突变体是将漆酶(laccase酶)亲本的第31位谷氨酸突变为天冬氨酸。
2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述亲本的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。
4.携带权利要求3所述基因的重组质粒。
5.表达权利要求1或2所述突变体,或含有权利要求3所述基因或权利要求4所述基因的宿主细胞。
6.一种顺-11-十六碳烯醛的制备方法,所述方法以顺-11-十六碳烯醇为底物,利用漆酶及权利要求1所述的突变体作为催化剂组成催化体系,催化合成顺-11-十六碳烯醛,所述催化体系中还添加有2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述催化体系中,顺-11-十六碳烯醇、TEMPO与催化剂的物质的量浓度比为10~30:2~10:5~13。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,顺-11-十六碳烯醇的浓度为0.015-0.025mmol/mL;所述催化剂与顺-11-十六碳烯醇的物质的量浓度之比为7
9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,催化反应的pH为3.0-7.0,催化反应的时间为24~48h。
10.权利要求1或2所所述的突变体,或者权利要求6~9任一项所述的方法在制备含二化螟性信息素的产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.漆酶的突变体,其特征在于,所述突变体是将漆酶(laccase酶)亲本的第31位谷氨酸突变为天冬氨酸。
2.根据权利要求1所述的突变体,其特征在于,所述亲本的氨基酸序列如seq id no.1所示。
3.编码权利要求1或2所述突变体的基因。
4.携带权利要求3所述基因的重组质粒。
5.表达权利要求1或2所述突变体,或含有权利要求3所述基因或权利要求4所述基因的宿主细胞。
6.一种顺-11-十六碳烯醛的制备方法,所述方法以顺-11-十六碳烯醇为底物,利用漆酶及权利要求1所述的突变体作为催化剂组成催化体系,催化合成顺-11-十六碳烯醛,所述催化体系中还添加有2,2...
【专利技术属性】
技术研发人员:沈学锋,郑锋,谭成侠,胡剑锋,张端友,夏海峰,
申请(专利权)人:浙江世佳科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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