【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种体外生物合成太子参环肽b的制备方法。
技术介绍
1、太子参环肽b(heterophyllin b，hb)，是石竹科植物太子参的代表性成分。因能抑制酪氨酸酶的活性而具有减少皮肤中黑色素生成的作用，故常作为美白或淡斑活性成分用于化妆品中。它是由8个氨基酸组成的一种环肽，具体序列为：ile-phe-gly-gly-leu-pro-pro-pro，其中富含的甘氨酸和脯氨酸是皮肤胶原蛋白中最常见的两种氨基酸。由于环肽的结构是首尾相连，与线性肽相比，很难通过传统的方法合成，因此，目前环肽的合成仍然困难和昂贵。
2、太子参环肽b获取的方法主要有天然提取、化学合成和生物合成。天然提取的方法步骤复杂，纯度低，收率低，还易受资源限制。正如专利cn109528804a中描述的一样，需要经过“太子参的提取-脱脂-除氨基酸-醇沉-冻干”等步骤获得总环肽，如果需获得纯度高的太子参环肽b，总环肽还需进一步分离纯化。化学合成的方法主要是固相多肽合成法，专利cn108218964a描述了一种固相多肽合成法与酶法相结合制备太子参环肽b的方法，虽然该方法省去了传统方法中线性肽合成后切割下来纯化的步骤，但固相多肽的合成需要大量有害溶剂，容易对环境造成一定污染；专利cn118006700a采用双疏水载体“分子爪”的方法合成太子参环肽b，该方法要先化学合成式i化合物、式ii化合物、式iii化合物和式iv化合物，合成步骤复杂，需要使用有害溶剂，如二氯甲烷、三氟乙酸等。生物合成的方法具有条件温和、环境友好、专一性强的优点，用来合成太
3、综上，现有制备太子参环肽b的方法，天然提取法步骤繁多，成本高，受资源受限制等；化学合成法步骤复杂，需使用大量有机试剂，不符合绿色环保的理念；生物法体内合成易受到细胞活性和复杂性的限制，常常伴有副产物的生成。因此，亟需一种简单快捷、收率高、纯度高的太子参环肽b制备方法。
技术实现思路
1、本专利技术旨在提供一种太子参环肽b的制备方法，以解决步骤复杂，纯度低，收率低等技术问题。
2、本专利技术第一方面的目的，在于提供一种太子参环肽b的制备方法。
3、为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
4、本专利技术的第一个方面，提供一种太子参环肽b的制备方法，包括以下步骤：
5、将线性太子参环肽b(prehhb)和环化酶gmpopb混合，体外酶促反应，即得到太子参环肽b(环状肽hb)。
6、在本专利技术一些实施方式中，所述线性太子参环肽b和环化酶gmpopb的浓度比为0.5～10:1。
7、在本专利技术一些实施方式中，所述体外酶促反应的温度为15～50℃。
8、在本专利技术一些实施方式中，所述体外酶促反应的反应时间为0.5～24h。
9、在本专利技术一些实施方式中，所述线性太子参环肽b的核苷酸序列如seq id no:1所示。
10、在本专利技术一些实施方式中，所述环化酶gmpopb的核苷酸序列如seq id no:2所示。
11、在本专利技术一些实施方式中，所述制备方法还包括除杂步骤。
12、在本专利技术一些实施方式中，所述除杂的方法包括加热处理法、甲醇处理法、萃取处理法中任一种。
13、在本专利技术一些实施方式中，所述加热处理法包括以下步骤：在外酶促反应结束后，将反应体系于60～100℃加热5～10min。
14、本专利技术的有益效果是：
15、本专利技术提供一种仅需要通过体外酶促反应即将线性太子参环肽b转换为环状的太子参环肽b的制备方法，该方法可有效解决现有技术中环状的太子参环肽b制备步骤复杂，纯度低，收率低等技术问题，可用于简单、低成本、短生产周期的大规模制备环状的太子参环肽b。
16、具体地：
17、可调控性强：与传统的微生物发酵相比，体外酶催化不会受到细胞活性和复杂性的限制。这意味着可以更加精确地控制和调整反应条件，如温度、时间和底物比例等，从而优化反应过程，提高产物的质量和产量。
18、反应速度快：由于体外酶催化系统可以去除细胞内的许多复杂步骤和调节机制，因此反应速度通常比细胞内代谢更快。这有助于缩短生产周期，提高生产效率。
19、副反应少：体外酶催化系统能够更精确地控制反应路径，减少不必要的副反应，从而提高目标产物的纯度和产率。
20、环保：本专利技术利用生物合成技术形成太子参环肽b，相比化学合成的方法，不需要使用大量化学试剂，更加绿色环保。
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1.一种太子参环肽B的制备方法，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述线性太子参环肽B和环化酶GmPOPB的浓度比为0.5～10:1。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述体外酶促反应的温度为15～50℃。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述体外酶促反应的反应时间为0.5～24h。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述线性太子参环肽B的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
6.根据权利要求1～4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述环化酶GmPOPB的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
7.根据权利要求1～4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括除杂步骤。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述除杂的方法包括加热处理法、甲醇处理法、萃取处理法中任一种。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述加热处理法包括以下步骤：在外酶促反应结束后，将反应体系于60～
10.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述线性太子参环肽B和环化酶GmPOPB的浓度比为2～9:1。
...【技术特征摘要】
1.一种太子参环肽b的制备方法，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述线性太子参环肽b和环化酶gmpopb的浓度比为0.5～10:1。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述体外酶促反应的温度为15～50℃。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述体外酶促反应的反应时间为0.5～24h。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述线性太子参环肽b的核苷酸序列如seq id no:1所示。
6.根据权利要求1～4中任一项所述的制备方法，其特...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐崇，何敬愉，吴远清，林琳，张得香，潘丹阳，
申请(专利权)人：广州环亚化妆品科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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