【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及检测试剂盒，尤其涉及一种空间邻近化学发光法禽白血病抗原检测试剂盒及其应用。
技术介绍
1、禽白血病抗原检测是禽白血病净化工作中必不可少的环节，且检测量大，检测时间集中。针对这种情况需要一种操作简单、快速、检测通量大的新技术。分子检测需要首先对样本进行核酸提取，该步骤一般需要40分钟以上。而且需要在专门的实验室进行，防止核酸污染。样本提取之后需要在另外的加样间进行加样，然后去往扩增间进行核酸扩增。核酸扩增过程需要专门配到的仪器，且该过程需要1h左右。整个检测过程需要在不同功能间进行，操作步骤繁琐，用时操作2h。基于以上问题，该方法并不适用于大批量检测。
2、现有免疫学检测的elsia方法使用96孔酶标板作为反应载体，能够实现高通量检测。但是elisa方法属于非均相反应，抗原抗体反应需要足够长的时间才能保证检测的灵敏度。中间需要洗涤酶标板，操作繁琐。整个过程包括加入待检样本反应1h，洗板5次，加入酶结合物反应1h，洗板5次，加入底物反应15min，加入终止液，仪器读值。整体用时超过2h。
3、中国专利cn103163299a公开了一种禽白血病双抗体夹心elisa抗原检测试剂盒，其中包括：包被抗alvp27蛋白单克隆抗体的酶标板、酶标记抗alvp27蛋白单克隆抗体等。捕获抗体和检测抗体分别针对p27蛋白不同的抗原决定簇；包被在酶标板的抗alvp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株alvp27-5d3分泌获得，酶标记抗alvp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株alvp27-4f12分泌获得。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种空间邻近化学发光法禽白血病抗原检测试剂盒及其应用，整体反应时间＜30min，同时能够进行高通量检测，并且具有更优的灵敏度。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种禽白血病抗原检测试剂盒，包括以下组分：
4、碱性磷酸酶标记的p27检测抗体、示踪物和激发液。
5、优选的，所述试剂盒还包括阴性对照和阳性对照。
6、优选的，所述示踪物为吖啶酯标记的p27捕获抗体。
7、优选的，所述碱性磷酸酶标记的p27检测抗体由包括以下步骤的制备方法得到：
8、将碱性磷酸酶溶液与过碘酸钠溶液混合反应，然后加入乙二醇，得到溶液1；
9、将溶液1进行透析处理，透析结束后与碳酸盐缓冲液混合，得到溶液2；
10、将检测抗体透析后与溶液2混合，反应得到碱性磷酸酶标记的p27检测抗体。
11、优选的，所述激发液包括激发液a和激发液b。
12、优选的，所述激发液a中含有苯并噻吩、柠檬酸和柠檬酸钠。
13、优选的，所述激发液b中含有tris、氯化钠和盐酸。
14、优选的，所述阴性对照中含有磷酸盐溶液。
15、优选的，所述阳性对照中含有p27蛋白。
16、本专利技术还提供了上述禽白血病抗原检测试剂盒在制备禽类免疫检测产品中的应用。
17、本专利技术的有益效果：
18、本专利技术无需使用固相载体。传统的酶联免疫检测方法需要将p27检测抗体包被到酶标板孔内，磁微粒化学发光检测方法需要将p27检测抗体包被到磁珠表面。本专利技术省去该操作，又节省了耗材成本。本专利技术采用邻近化学发光，检测过程中不需要进行洗涤。操作简便又省时间。本专利技术可搭配自动化仪器进行检测，在操作简便的同时又能保证大通量检测。
19、本专利技术可用于禽白血病毒的快速检测及鉴别，有灵敏度高、特异性强、操作简便、检测时间短的优点，弥补了常规检测方法的不足，对于禽白血净化工作有很好的实用价值。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，包括以下组分：
2.根据权利要求1所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阴性对照和阳性对照。
3.根据权利要求1所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述示踪物为吖啶酯标记的P27捕获抗体。
4.根据权利要求1所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述碱性磷酸酶标记的P27检测抗体由包括以下步骤的制备方法得到：
5.根据权利要求1所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述激发液包括激发液A和激发液B。
6.根据权利要求5所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述激发液A中含有苯并噻吩、柠檬酸和柠檬酸钠。
7.根据权利要求5所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述激发液B中含有Tris、氯化钠和盐酸。
8.根据权利要求2所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述阴性对照中含有磷酸盐溶液。
9.根据权利要求2所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述阳性对照中含有P27蛋白。
10.权
...【技术特征摘要】
1.一种禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，包括以下组分：
2.根据权利要求1所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阴性对照和阳性对照。
3.根据权利要求1所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述示踪物为吖啶酯标记的p27捕获抗体。
4.根据权利要求1所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述碱性磷酸酶标记的p27检测抗体由包括以下步骤的制备方法得到：
5.根据权利要求1所述的禽白血病抗原检测试剂盒，其特征在于，所述激发液包括激发液a和激发液b。
...【专利技术属性】
技术研发人员：任雪建，李秀梅，刘近，吕园园，杨志，李亚静，杨晓帆，阴思晴，王嘉宾，陶飞飞，刘明瑞，阴笑丹，赵晓月，杨转，孙晓明，黄坤玲，
申请(专利权)人：禾旭郑州生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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