【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品安全，具体涉及一种硝基咪唑类药物半抗原和全抗原及其制备方法与应用。
技术介绍
1、公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、禽蛋及蛋制品中兽药残留问题是该类产品的主要安全风险之一，主要与禽类养殖过程中超范围超限量使用兽药有关。硝基咪唑类抗原虫药，包括甲硝唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟基地美硝唑等，可用于治疗禽组织滴虫病等，该药物的大量使用会导致其在禽蛋中残留，消费者食用含有硝基咪唑类药物残留的禽蛋后，导致药物在人体内蓄积，进而影响消费者健康。针对动物性食品中硝基咪唑的监管要求，相关国家和组织均制定了相关法规标准。我国《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》(gb 31650-2019)标准规定甲硝唑、地美硝唑等允许作治疗用，但不得在动物性食品中检出。为了进一步监控禽蛋类产品的质量安全，自2021年起，国家食品安全抽检任务对鲜蛋(鸡蛋、鸭蛋、鹌鹑蛋、鹅蛋、鸽蛋)的硝基咪唑类药物进行检测，并于2023年将该指标纳入了再制蛋产品的风险监测计划中。
3、目前，禽蛋及蛋制品中硝基咪唑类药物的相关检测标准有《食品安全国家标准动物性食品中硝基咪唑类药物残留量检验方法》(gb 31658.23-2022)、《动物性食品中甲硝唑、地美硝唑及其代谢残留检测液相色谱-串联质谱法》(农业部1025号公告-2-2008)、《动物源性食品中多种碱性药物残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法》(sn/
技术实现思路
1、为了克服上述问题，本专利技术提供了一种硝基咪唑类药物半抗原和全抗原及其制备方法与应用。
2、为实现上述技术目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、本专利技术的第一个方面，提供了一种硝基咪唑类药物半抗原，，其结构式如式ⅰ所示：
4、
5、本专利技术的第二个方面，提供硝基咪唑类药物半抗原的制备方法，包括：
6、(1)2-甲基-5-硝基咪唑与4-溴正丁炔在碱性条件下，亲核取代合成中间体1；
7、(2)中间体1与叠氮乙酸乙酯反生click反应合成中间体2；
8、(3)中间体2在碱性条件下水解合成硝基咪唑类药物半抗原；
9、反应路线为：
10、
11、在一种或多种实施方式中，步骤(1)中，2-甲基-5-硝基咪唑与4-溴正丁炔在碱性条件下，亲核取代合成中间体1的方法包括：
12、将2-甲基-5-硝基咪唑、4-溴正丁炔和碳酸钾分散于n,n-二甲基甲酰胺(dmf)中，加热反应合成中间体1。
13、优选地，2-甲基-5-硝基咪唑、4-溴正丁炔和碳酸钾的质量比为4.5～5.5:6～7:9～12，优选为5:6.28:10.87。
14、优选地，2-甲基-5-硝基咪唑在dmf中的浓度为45～55g/l，优选为50g/l。
15、优选地，加热反应的温度为65～80℃，优选为70℃，反应的时间为20～30h，优选为24h。
16、在一种或多种实施方式中，步骤(2)中，中间体1与叠氮乙酸乙酯反生click反应合成中间体2的方法包括：
17、将中间体1和叠氮乙酸乙酯分散于dmf和水的混合溶液中，后加入抗坏血酸钠和五水合硫酸铜作为催化剂，加热反应合成中间体2。
18、优选地，中间体1和叠氮乙酸乙酯的质量必维7.5～8.5:6.5～8，优选为8:7。
19、优选地，dmf和水的混合溶液中，dmf和水的体积比为30:6～8，优选为30:7.2。
20、优选地，中间体1在dmf和水的混合溶液中的浓度为0.2～0.23g/l，优选为0.215g/l。
21、优选地，加热反应的温度为55～70℃，优选为60℃，反应的时间为3～5h，优选为4h。
22、在一种或多种实施方式中，步骤(3)中，中间体2在碱性条件下水解合成硝基咪唑类药物半抗原的方法包括：
23、中间体在氢氧化钠乙醇水溶液中，加热反应合成硝基咪唑类药物半抗原。
24、优选地，加热反应的温度为65～80℃，优选为70℃，反应的时间为3～5h，优选为4h。
25、本专利技术的第三个方面，提供硝基咪唑类药物全抗原，由上述硝基咪唑类药物半抗原与载体蛋白偶联后得到。
26、在一种或多种实施方式中，所述载体蛋白包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白或血蓝蛋白。
27、本专利技术的第四个方面，提供硝基咪唑类药物特异性抗体，所述抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。
28、在一种或多种实施方式中，所述硝基咪唑类药物特异性抗体是以硝基咪唑类药物全抗原为免疫原，辅以佐剂免疫实验动物(如小鼠)，制备得到的单克隆抗体。
29、本专利技术的第五个方面，提供硝基咪唑类药物半抗原，或硝基咪唑类药物全抗原或硝基咪唑类药物特异性抗体制备的硝基咪唑类药物检测试剂或试剂盒。
30、在一种或多种实施方式中，所述硝基咪唑类药物包括：甲硝唑、地美硝唑、羟基甲硝唑、羟基地美硝唑。
31、本专利技术的第六个方面，提供硝基咪唑类药物半抗原，或硝基咪唑类药物全抗原或硝基咪唑类药物特异性抗体、或检测试剂或试剂盒在硝基咪唑类药物的elisa免疫分析检测中的应用。
32、在一种或多种实施方式中，采用elisa免疫分析方法检测实际样本中硝基咪唑类药物的残留。
33、优选地，所述实际样本包括禽蛋及蛋制品。
34、本专利技术的第七个方面，提供硝基咪唑类药物半抗原，或硝基咪唑类药物全抗原或硝基咪唑类药物特异性抗体、或检测试剂在制备硝基咪唑类药物的胶体金检测试纸条中的应用。
35、本专利技术的有益效果：
36、(1)本专利技术中以2-甲基-5-硝基咪唑为原料与4-溴正丁炔在碱性条件下，亲核取代合成中间体1，中间体1与叠氮乙酸乙酯反生click反应合成中间体2；中间体2在碱性条件下水解合成硝基咪唑类药物半抗原。在半抗原的基础上偶联载体蛋白合成全抗原，全抗原可以将硝基咪唑结构暴露出来作为抗原决定簇，筛选获得广谱性硝基咪唑类药物单克隆抗体。
37、(2)将本专利技术提供的单克隆抗体，运用到胶体金层析试纸中，此胶体金层析试纸可以用于禽蛋及蛋制品中硝基咪唑本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种硝基咪唑类药物半抗原，其特征在于，其结构式如式Ⅰ所示：
2.权利要求1所述的硝基咪唑类药物半抗原的制备方法，其特征在于，包括：
3.硝基咪唑类药物全抗原，其特征在于，由权利要求1所述的硝基咪唑类药物半抗原与载体蛋白偶联后得到。
4.如权利要求3所述的硝基咪唑类药物全抗原，其特征在于，所述载体蛋白包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白或血蓝蛋白。
5.硝基咪唑类药物特异性抗体，其特征在于，所述抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。
6.如权利要求5所述的硝基咪唑类药物特异性抗体，其特征在于，所述硝基咪唑类药物特异性抗体是以硝基咪唑类药物全抗原为免疫原，辅以佐剂免疫实验动物，制备得到的单克隆抗体。
7.权利要求1所述的硝基咪唑类药物半抗原，或权利要求3所述的硝基咪唑类药物全抗原或权利要求5所述的硝基咪唑类药物特异性抗体制备的硝基咪唑类药物检测试剂或试剂盒。
8.权利要求1所述的硝基咪唑类药物半抗原，或权利要求3所述的硝基咪唑类药物全抗原或权利要求5所述的硝基咪唑类药物特异性抗体或权利要求7所述的
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，采用ELISA免疫分析方法检测实际样本中硝基咪唑类药物的残留；
10.权利要求1所述的硝基咪唑类药物半抗原，或权利要求3所述的硝基咪唑类药物全抗原或权利要求5所述的硝基咪唑类药物特异性抗体、或权利要求7所述的检测试剂在制备硝基咪唑类药物的胶体金检测试纸条中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种硝基咪唑类药物半抗原，其特征在于，其结构式如式ⅰ所示：
2.权利要求1所述的硝基咪唑类药物半抗原的制备方法，其特征在于，包括：
3.硝基咪唑类药物全抗原，其特征在于，由权利要求1所述的硝基咪唑类药物半抗原与载体蛋白偶联后得到。
4.如权利要求3所述的硝基咪唑类药物全抗原，其特征在于，所述载体蛋白包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白或血蓝蛋白。
5.硝基咪唑类药物特异性抗体，其特征在于，所述抗体为多克隆抗体或单克隆抗体。
6.如权利要求5所述的硝基咪唑类药物特异性抗体，其特征在于，所述硝基咪唑类药物特异性抗体是以硝基咪唑类药物全抗原为免疫原，辅以佐剂免疫实验动物，制备得到的单克隆抗体。
7.权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员：周一冉，田洪芸，吕峰，杨昊，吕邓义，王炳志，杨星星，
申请(专利权)人：深圳市易瑞生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。