【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于食品抗菌剂，具体涉及一种溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体及其制备方法。
技术介绍
1、脂质体是一种依靠磷脂、固醇等材料的自组装即可形成的类生物膜材料，具有独特的两亲性，可同时负载水溶性或油溶性物质，并有效改善物质的存在状态及稳定性等性质。脂质体技术被广泛应用于医药、化妆品及食品领域。
2、精油是食品中常见的植物型天然抗菌剂，从植物中即可提取，具有安全、抗菌性强且成本低的优点。精油的抗菌机理主要在于其主要活性成分可与微生物细胞膜、线粒体的脂质发生相互作用，破坏微生物细胞结构的有序性，从而导致内容物、重要离子和分子大量流失，以致微生物细胞死亡。但精油在食品中的直接应用遭受着诸多限制。从性质上讲，精油通常具有较强的挥发性及氧化性，导致了精油的生物利用率低；从营养上讲，作为油脂，精油可能会与食品的组成成分发生相互作用，导致营养破坏；从风味上讲，由于精油会产生大量芳香类物质，直接应用可能会掩蔽或破坏食品自身风味。因此，利用脂质体技术对植物精油进行包封，可以提高精油的稳定性、水溶性及生物活性，大大提升精油在食品中的应用潜力。目前研究较多的精油脂质体多为直接制备单层脂质体，部分研究会采取用多糖等生物聚合物作为脂质体包衣，进一步提升精油脂质体的稳定性。也有研究采取将精油同其他抗菌剂复配的形式，共同制备为脂质体提升脂质体抗菌性能。百里香精油源于香料百里香，是一种植物型天然抗菌剂，具有良好的抗菌、抗氧化、抗炎等作用，百里香精油脂质体已被证实具有良好的稳定性及抗菌效果。
3、溶菌酶是食品中常见的动物型天然抗菌剂，
4、精油脂质体目前的发展，主要受到抗菌类型单一、单层脂质体自身稳定性弱等因素的限制。由于精油脂质体通常只包封一种精油，并且精油对细胞壁的破坏力较弱，因此，精油脂质体一般对革兰氏阴性菌（如大肠杆菌等）的杀菌能力更强，但对革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌）的杀菌能力较弱，因此，精油脂质体受到抗菌类型单一的限制。目前，最常见的制备精油脂质体的方法是利用薄膜水化法制备脂质体，其过程为：首先将磷脂、胆固醇及精油一同溶解于有机溶剂中，在负压的条件下蒸发去除有机溶剂，形成精油脂质体薄膜，利用水或pbs等溶液对薄膜进行水化，再将所得溶液进行超声使其分散均匀，最终所得即为精油脂质体溶液。由于该法制备的脂质体通常为单层脂质体，这类脂质体一般存在稳定性较差的问题，有许多研究通过利用多糖或蛋白质对其进行修饰，以提高脂质体的稳定性。利用多糖和蛋白质修饰脂质体的原理通常为静电吸引，常见的脂质体蛋白质类修饰剂为乳清蛋白、乳铁蛋白等。在此情况下，溶菌酶是一种创新的脂质体修饰剂。它不仅可作为一种蛋白质，修饰并提高脂质体的稳定性，还可以因为其特殊的脂质体吸附机制，在进入脂质体核心后同时作为一种芯材，发挥一定的杀灭革兰氏阴性菌的能力。针对该问题，有必要利用溶菌酶修饰精油脂质体，提升精油脂质体的综合性能，可提供一种半复配的新型食品抗菌剂。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体及其制备方法。具体技术方案如下：
2、一种溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：由以下组分组成：大豆卵磷脂、胆固醇、百里香精油（teo）、溶菌酶（lyz）、磷酸盐缓冲液、超纯水，其中，大豆卵磷脂与胆固醇的质量比为5-8:1，百里香精油与超纯水的固液比（mg/ml）为1.5-3.5:1，溶菌酶与大豆卵磷脂的质量体积比为0.01%-0.15%。
3、进一步的，所述百里香精油为百里香酚百里香精油、沉香醇百里香精油或侧柏醇百里香精油中的任一种。
4、一种溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体的制备工艺，包括以下步骤：
5、1）将大豆卵磷脂、胆固醇与百里香精油按一定比例溶解在氯仿中，得溶液a，其中，大豆卵磷脂与氯仿的固液比（mg/ml）为10:1，百里香精油与氯仿的固液比（mg/ml）为1.5-3.5:1；
6、2）将溶液a在减压条件下旋转蒸发，直至有机溶剂完全去除，瓶壁上形成淡黄色的脂质薄膜；
7、3）向脂质薄膜中加入超纯水，剧烈摇晃或搅拌，直至薄膜脱落并完全溶解，得溶液b；
8、4）将溶液b探针超声破碎，放入4℃环境保存，得溶液c；
9、5）将溶菌酶溶于ph=6.8的磷酸盐缓冲液中得溶液d，其中，固液比（mg/ml）为1:1；
10、6）将溶液c和溶液d混合，磁力搅拌混匀，放入4℃环境保存，即得溶菌酶修饰得百里香精油抗菌脂质体。
11、进一步的，步骤1）中所述的大豆卵磷脂、胆固醇的质量比为5-8:1。
12、进一步的，步骤2）中所述的减压条件温度为40-45℃。
13、进一步的，步骤3）中所述的超纯水与步骤（1）所述的氯仿体积比为1:1。
14、进一步的，步骤4）中所述的探针超声破碎，功率为260 w，超声时间为5分钟。
15、进一步的，步骤5）中所述的磷酸盐缓冲液为0.2 mol/l的磷酸氢二钠与0.2 mol/l的磷酸二氢钠溶液按体积比1:1混合制得。
16、进一步的，步骤6）中所述的磁力搅拌时间为4-6小时。
17、10.根据权利要求3所述的抗菌脂质体，其特征在于，所述天然抗菌剂的粒径为80~150nm。
18、本专利技术具有以下优点：
19、（1）本专利技术制备的抗菌脂质体克服了精油难溶于水，易氧化、挥发且耐热性差的问题，提高了精油的储存稳定性，提供了精油在食品中长期抑菌的能力。
20、（2）本专利技术制备的抗菌脂质体相较未修饰的百里香精油抗菌脂质体，具有更好的物化稳定性。溶菌酶的修饰使百里香精油脂质体对酸、热具有更好的耐受力及抗氧化能力，使得环境对精油脂质体的影响降低。
21、（3）本专利技术制备的抗菌脂质体抗菌性能良好且持久。脂质体的包封使精油的释放得到控制，在溶菌酶的修饰下这种控释能力进一步提升，精油的缓慢释放可起到持久抗菌效果。
22、（4）本专利技术所用原料均为食品级，且价格低廉，制备方法简单，可以应用于工业化大生产。
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1.一种溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体及其制备方法，其特征在于：包括如下重量份的原料：大豆卵磷脂15-22份、胆固醇15-22份、百里香精油14-35份、溶菌酶8-15份、磷酸盐缓冲液8-15份、超纯水15-22份。
2.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：大豆卵磷脂与胆固醇的质量比为5-8:1，百里香精油与超纯水的固液比（mg/mL）为1.5-3.5:1，溶菌酶与大豆卵磷脂的质量体积比为0.01%-0.15%。
3.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：包括以下步骤：
4.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：步骤1）中所述的大豆卵磷脂、胆固醇的质量比为5-8:1。
5.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：步骤2）中所述的减压条件温度为40-45℃。
6.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：步骤3）中所述的超纯水与步骤（1）所述的氯仿体积比为1:1。
7.如权力要求1所述
8.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：步骤5）中所述的磷酸盐缓冲液为0.2 mol/L的磷酸氢二钠与0.2 mol/L的磷酸二氢钠溶液按体积比1:1混合制得。
9.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：步骤6）中所述的磁力搅拌时间为4-6小时。
10.根据权利要求3所述的抗菌脂质体，其特征在于，所述百里香精油抗菌脂质体的粒径为80~150 nm。
...【技术特征摘要】
1.一种溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体及其制备方法，其特征在于：包括如下重量份的原料：大豆卵磷脂15-22份、胆固醇15-22份、百里香精油14-35份、溶菌酶8-15份、磷酸盐缓冲液8-15份、超纯水15-22份。
2.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：大豆卵磷脂与胆固醇的质量比为5-8:1，百里香精油与超纯水的固液比（mg/ml）为1.5-3.5:1，溶菌酶与大豆卵磷脂的质量体积比为0.01%-0.15%。
3.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：包括以下步骤：
4.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：步骤1）中所述的大豆卵磷脂、胆固醇的质量比为5-8:1。
5.如权力要求1所述的溶菌酶修饰的百里香精油抗菌脂质体，其特征在于：步...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴笛，周典，李沁虹，李默寒，李远桥，
申请(专利权)人：成都大学，
类型：发明
国别省市：
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