【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及新材料，具体涉及一种脱细胞基质材料及其制备方法和应用。
技术介绍
1、脱细胞基质生物材料是用适当的方法将组织/器官进行脱细胞处理，去除组织中可能引起排斥反应的细胞及其他抗原分子，保留三维结构和功能蛋白，具有生物诱导功能，可以在体内/体外形成特定的功能化组织，可用于组织损伤修复/重建的一种新型生物材料。目前应用较多的脱细胞生物材料主要是异种去细胞基质，这类天然生物材料的原材料主要来源于动物小肠粘膜下层、膀胱粘膜下层、胃粘膜下层、心包膜、腹膜及真皮层。脱细胞基质生物材料广泛应用于医药领域，相比不可吸收材料或者传统的高分子材料，它具有诱导组织再生的能力，因此被认为是理想的组织修复材料。但动物源性生物材料也存在一些风险，一方面在于其携带的外源残留dna、脂肪等免疫原性物质，在植入人体后可能会引起免疫反应；另一方面在于其处理过程中用到的试剂容易破坏细胞外基质的三维结构，使其在体内失去了诱导组织再生的能力。另外，脱细胞基质材料还存在一个普遍的问题就是力学性能不足，降解速率较快且不可调控。
2、关于脱细胞基质中的有效活性成分，因使用不同的去细胞试剂或方式，脱细胞基质中保留的有效活性成分差异很大。现有技术中的去细胞方法主要有：1)物理法：例如反复冻融法，此方法属于物理方法进行脱细胞处理，由于其所需周期太长，现在基本已经不用；2)化学法：主要有酸、碱、除垢剂(也称表面活性剂)，除垢剂例如sds、triton x-100、chaps，上述都是化工合成或半合成的，去污力强，去细胞效果好，但是通常采用这类去细胞试剂制备的生物补
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提出一种脱细胞基质材料及其制备方法和应用，成本低，原料来源广，制备方法简单，克服了传统脱细胞基质材料降解速率较快且不可调控、力学性能不佳以及容易引发炎症反应等问题，具有优异的生物相容性、低免疫原性和生物活性，降低了产物的降解速率、提高了产物的力学强度。
2、本专利技术的技术方案是这样实现的：
3、本专利技术提供一种脱细胞基质材料的制备方法，将猪皮经过预处理后，在通入二氧化碳的离子液体中脱细胞处理，酶解去除表面抗原，与阿魏酸、玻尿酸/抗菌肽复合物反应，制得脱细胞基质材料。
4、作为本专利技术的进一步改进，包括以下步骤：
5、s1.猪皮的预处理：将猪皮经过清洗、脱毛、清洗，去除表皮角质层和皮下脂肪层，取真皮层，切割成合适大小，用2-4％氢氧化钠浸泡震荡处理3-10h，制得预处理的猪皮材料；
6、s2.脱细胞处理：将预处理的猪皮材料加入离子液体中，通入二氧化碳，搅拌处理，透析，冷冻干燥，制得脱细胞真皮基质；
7、s3.酶解处理：将脱细胞真皮基质加入水中，加入α-半乳糖苷酶和胰蛋白酶，加热酶解，过滤，洗涤，干燥，制得去抗原脱细胞真皮基质；
8、s4.玻尿酸/抗菌肽复合物的制备：将玻尿酸加入水中，加入edc(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺)和nhs(n-羟基丁二酰亚胺)，活化反应，加入抗菌肽，搅拌反应，透析，冷冻干燥，制得玻尿酸/抗菌肽复合物；
9、s5.脱细胞基质材料的制备：将阿魏酸和去抗原脱细胞真皮基质混合加入水中，加入edc和nhs，活化反应，加入玻尿酸/抗菌肽复合物，搅拌反应，透析，冷冻干燥，制得脱细胞基质材料。
10、作为本专利技术的进一步改进，步骤s2中所述预处理的猪皮材料、离子液体的固液比为1:7-10g/ml，所述二氧化碳的通气量为20-30ml/min，所述搅拌处理的时间为1-2h，所述离子液体选自乙酸-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、五氟化硼蒽醌酮离子液体、n-丁基吡啶四氟硼酸盐、4-甲脒基吡啶盐酸盐、吡啶对甲苯磺酸盐、1-丁基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丁基-2,3-二甲基咪唑三氟甲烷磺酸盐中的至少一种。
11、作为本专利技术的进一步改进，所述离子液体为1-丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐和1-丁基-2,3-二甲基咪唑三氟甲烷磺酸盐的混合物，质量比为10:3-5。
12、作为本专利技术的进一步改进，步骤s3中所述脱细胞真皮基质、α-半乳糖苷酶和胰蛋白酶的质量比为100:3-5:2-3，所述加热酶解的温度为35-38℃，时间为2-4h。
13、作为本专利技术的进一步改进，步骤s4中所述玻尿酸、edc、nhs、抗菌肽的质量比为10:4-6:2-3:5-7，所述活化反应的温度为20-25℃，时间为30-60min，所述搅拌反应的时间为12-15h。
14、作为本专利技术的进一步改进，步骤s5中所述阿魏酸、去抗原脱细胞真皮基质、edc、nhs、玻尿酸/抗菌肽复合物的质量比为2-4:12-15:6-8:3-4:7-9，所述活化反应的温度为0-4℃，时间为30-50min，所述搅拌反应的时间为20-24h。
15、作为本专利技术的进一步改进，具体包括以下步骤：
16、s1.猪皮的预处理：将猪皮经过清洗、脱毛、清洗，去除表皮角质层和皮下脂肪层，取真皮层，切割成合适大小，用2-4％氢氧化钠浸泡震荡处理3-10h，制得预处理的猪皮材料；
17、s2.脱细胞处理：将预处理的猪皮材料加入离子液体中，所述预处理的猪皮材料、离子液体的固液比为1:7-10g/ml，通入二氧化碳，通气量为20-30ml/min，搅拌处理1-2h，透析，冷冻干燥，制得脱细胞真皮基质；
18、s3.酶解处理：将100重量份脱细胞真皮基质加入水中，加入3-5重量份α-半乳糖苷酶和2-3重量份胰蛋白酶，加热至35-38℃，酶解2-4h，过滤，洗涤，干燥，制得去抗原脱细胞真皮基质；
19、s4.玻尿酸/抗菌肽复合物的制备：将10重量份玻尿酸加入水中，加入4-6重量份edc和2-3重量份nhs，20-25℃活化反应30-60min，加入5-7重量份抗菌肽，搅拌反应12-15h，透析，冷冻干燥，制得玻尿酸/抗菌肽复合物；
20、s5.脱细胞基质材料的制备：将2-4重量份阿魏酸和12-15重量份去抗原脱细胞真皮基质混合加入水中，加入6-8重量份edc和3-4重量份nhs，0-4℃活化反应30-50min，加入7-9重量份玻尿酸/抗菌肽复合物，搅拌反应20-24h，透析，冷冻干燥，制得脱细胞基质材料。
21、本专利技术进一步保护一种上述的制备方法制得的脱细胞基质材料。
22、本专利技术进一步保护一种上述脱细胞基质材料在制备医美产品中的应用。
23、本专利技术具有如下有益效果：
24、本专利技术制备了一种脱细胞基质材料，克服了传统脱细胞基质材料降解速率较快且不可调控、力学性能不佳以及容易引发炎症反应等问题。
25、本专利技术先将猪皮预处理获得了真皮层的猪皮材料，在通入二氧化碳的离子液体本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种脱细胞基质材料的制备方法，其特征在于，将猪皮经过预处理后，在通入二氧化碳的离子液体中脱细胞处理，酶解去除表面抗原，与阿魏酸、玻尿酸/抗菌肽复合物反应，制得脱细胞基质材料。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述预处理的猪皮材料、离子液体的固液比为1:7-10g/mL，所述二氧化碳的通气量为20-30mL/min，所述搅拌处理的时间为1-2h，所述离子液体选自乙酸-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、五氟化硼蒽醌酮离子液体、N-丁基吡啶四氟硼酸盐、4-甲脒基吡啶盐酸盐、吡啶对甲苯磺酸盐、1-丁基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丁基-2,3-二甲基咪唑三氟甲烷磺酸盐中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述离子液体为1-丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐和1-丁基-2,3-二甲基咪唑三氟甲烷磺酸盐的混合物，质量比为10:3-5。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述脱细胞真皮基质
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述玻尿酸、EDC、NHS、抗菌肽的质量比为10:4-6:2-3:5-7，所述活化反应的温度为20-25℃，时间为30-60min，所述搅拌反应的时间为12-15h。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤S5中所述阿魏酸、去抗原脱细胞真皮基质、EDC、NHS、玻尿酸/抗菌肽复合物的质量比为2-4:12-15:6-8:3-4:7-9，所述活化反应的温度为0-4℃，时间为30-50min，所述搅拌反应的时间为20-24h。
8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
9.一种如权利要求1-8任一项所述的制备方法制得的脱细胞基质材料。
10.一种如权利要求9所述脱细胞基质材料在制备医美产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种脱细胞基质材料的制备方法，其特征在于，将猪皮经过预处理后，在通入二氧化碳的离子液体中脱细胞处理，酶解去除表面抗原，与阿魏酸、玻尿酸/抗菌肽复合物反应，制得脱细胞基质材料。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述预处理的猪皮材料、离子液体的固液比为1:7-10g/ml，所述二氧化碳的通气量为20-30ml/min，所述搅拌处理的时间为1-2h，所述离子液体选自乙酸-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐、五氟化硼蒽醌酮离子液体、n-丁基吡啶四氟硼酸盐、4-甲脒基吡啶盐酸盐、吡啶对甲苯磺酸盐、1-丁基-2,3-二甲基咪唑六氟磷酸盐、1-丁基-2,3-二甲基咪唑三氟甲烷磺酸盐中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述离子液体为1-丙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐和1-丁基-2,3-二甲基咪唑三氟甲烷磺酸盐的混合物，质量比为10:3-5。
5.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：左一聪，邓思羚，韩苗苗，
申请(专利权)人：深圳市迈捷生命科学有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。