从延胡索中同步分离延胡索乙素和原阿片碱的方法技术

本发明专利技术公开了一种从延胡索中同步分离延胡索乙素和原阿片碱的方法。延胡索先制成总碱，然后采用高速逆流色谱法进行分离，两相溶剂系统采用石油醚－乙酸乙酯－甲醇－水，分配比（体积）为２２～２６∶２５～３０∶２０～２３∶１７～２０，上相为固定相，下相为流动相，用流动相溶解延胡索总碱，在１０５～１２０ｍｉｎ收集原阿片碱波峰组分，在１６５～１７０ｍｉｍ收集延胡索乙素波峰组分。本发明专利技术由于先将延胡索醇浸膏净化处理成生物总碱，选用的溶剂系统和配比恰当，因此分离度高，分离组分的纯度高达９８％，延胡索乙素和原阿片碱的收率分别达到１６．９％和１４．７％，而且能够将延胡索总碱中两种单体组分同步分离出来。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及的是生物碱的分离的方法，特别是从延胡索中同步分离延胡索乙素和原阿片碱的方法。
技术介绍
延胡索又称元胡、玄胡、玄胡索，其基原为罂粟科植物延胡索(Corydalisyanhusuo W.T.Wang)的干燥鳞茎。延胡索性温，味苦辛，归于心、肝、脾经，具有活血、利气、止痛等功效，临床主要用于治疗各种跌打伤痛、痈疽肿痛、痛经及心血管疾病。在已确定的延胡索近20种生物碱中，延胡索乙素和原阿片碱为其主要活性成分，因此，延胡索生物碱的分离纯化就成为延胡索研究的一个重要课题。目前，人们从延胡索生物碱中分离纯化延胡索乙素和原阿片碱采的方法是大孔树脂分离方法，虽然这种方法作为一种经典分离方法能够将延胡索乙素和原阿片碱从延胡索中分离出来，但该方法的缺陷主要是固相载体对分离组分的吸附太严重，从而导致被分离组分的损失；其次是大孔树脂分离时脱析溶剂用量大、耗时较长，难以实现工业化生产。高速逆流色谱(HSCCC)是近年来发展起来的一种液-液分配色谱新技术，其特点是被分离物质在两相液体中进行分配，不需要任何固相载体，具有混合物分离回收率高、快速、预处理简单、分离纯化与制备同步完成的特点，因而越来越多地应用于天然物质的分离。在该技术中溶剂系统的选择和配比是该技术的关键因素之一。溶剂系统与被分离物质种类、结构与性质等因素有关；相同溶剂系统中各组分配比不同，则分离效果、产品组分的收率和纯度亦不同。在《世界科学技术-中医药现代化》2006.8(2)，P.18-19上，愈雁等人发表了一篇“应用高速逆流色谱技术从延胡索中分离延胡索乙素[J]”的论文，文中公开了延胡索乙素单一组分的分离技术，应用该技术，延胡索乙素的收率为4.3％，纯度为96.4％。除此之外，有关从延胡索中同步分离延胡索乙素和原阿片碱的方法不曾有过任何公开文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提出一种同步分离延胡索乙素和原阿片碱两种组分单体的方法，采用该方法能够达到纯度高、收率高，过程简捷的分离效果，适宜工业应用。实现上述目的的技术方案是：①原料处理：将干燥的延胡索块茎粉碎成40目左右的粗粉。②醇膏制备：粗粉用4～6倍量的70％～90％工业酒精回流提取1～2h，提取三次，合并提取液并过滤，减压浓缩至干，并经50℃减压干燥得醇浸膏。③生物总碱制备：醇浸膏先用10倍量的0.5～1.5％盐酸溶解，过滤，再用10～20％氨水调节溶解液pH到9.0，然后用氯仿萃取3次，每次萃取的氯仿用量与溶解液量相当，收集氯仿层，减压回收氯仿，真空干燥得到延胡索总碱。④分离：采用高速逆流色谱法，两相溶剂系统采用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，-->分配比(体积)为22～26∶25～30∶20～23∶17～20，超声脱气30min，以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，以7～10mL/min的流速将固定相泵入高速逆流色谱仪螺旋管中，待固定相充满整个管路后，停泵，启动主机，并将转速调至750～850r/min，以1.5～2.0mL/min的流速泵入流动相，当流动相从出口处流出，即表明上下相达到平衡，记录固定相被推出的体积，并使固定相保留值在0.5～0.58之间。然后用流动相溶液溶解延胡索总碱，使其浓度为10mg/mL，以2.0mL/min的流速持续泵入该溶液，分离温度25℃，紫外检测波长为280nm，在105～120min收集原阿片碱波峰组分；在165～170mim收集延胡索乙素波峰组分。本专利技术的特点在于：①醇浸膏经过净化处理制备成了生物总碱，所选用的溶剂系统和配比恰当，不仅提高了高速逆流色谱的分离度，而且使分离组分的纯度提高到了98％，延胡索乙素和原阿片碱的收率分别达到16.9％和14.7％。②能够同步将延胡索总碱中两种单体组分延胡索乙素和原阿片碱分离出来，提高了工作效率，减少了生产成本。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步说明。实施例1①分离设备：HSCCC-TBE300A(高速逆流色谱仪，上海同田生化技术有限公司)。②原料处理：延胡索鲜样经清水洗去泥土、沥水、烘干，干燥的延胡索块茎经药物粉碎机粉碎，过40目筛，制得延胡索粗粉。③醇膏制备：延胡索粗粉用70％～90％工业酒精溶解，70℃～80℃回流提取2～3次，料液比为1∶4～6，时间1～2h，提取液抽滤后合并→减压浓缩→50℃减压干燥→醇浸膏。④生物总碱制备：醇浸膏先用10倍量的0.5～1.5％盐酸溶解，过滤，再用10～20％氨水调节溶解液pH到9.0，然后用氯仿萃取3次，每次萃取的氯仿用量与溶解液量相当，收集氯仿层，减压回收氯仿，真空干燥得到延胡索总碱。⑤分离：按分配比(体积)：石油醚∶乙酸乙酯∶甲醇∶水＝22∶25∶23∶17，将各种试剂加入分液漏斗中，充分震荡后静置，超声脱气30min。以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，以7～10mL/min的流速将固定相泵入高速逆流色谱仪螺旋管中，待固定相充满整个管路后，停泵，启动主机，并将转速调至750～850r/min，以1.5～2.0mL/min的流速泵入流动相，当流动相从出口处流出，即表明上下相达到平衡，记录固定相被推出的体积，并使固定相保留值在0.5～0.58之间。然后用流动相溶液溶解延胡索总碱，使其浓度为10mg/mL，以2.0mL/min的流速持续泵入该溶液，分离温度25℃，紫外检测波长为280nm，在105～120min收集原阿片碱波峰组分；在165～170mim收集延胡索乙素波峰组分。实施例2按照实施例1的步骤完成延胡索乙素和原阿片碱的同步分离。其中两相溶剂系统分配比(体积)为：石油醚∶乙酸乙酯∶甲醇∶水＝24∶27∶21∶19。实施例3按照实施例1的步骤完成延胡索乙素和原阿片碱的同步分离。其中两相溶剂系统分配比(体积)为：石油醚∶乙酸乙酯∶甲醇∶水＝26∶29∶20∶20。-->本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从延胡索中同步分离延胡索乙素和原阿片碱的方法，其特征在于：　　①原料处理：将干燥的延胡索块茎粉碎成４０目左右的粗粉；　　②醇膏制备：粗粉用４～６倍量的７０％～９０％工业酒精回流提取１～２ｈ，提取三次，合并提取液并过滤，减压浓缩至干，并经５０℃减压干燥得醇浸膏；　　③生物总碱制备：醇浸膏先用１０倍量的０．５～１．５％盐酸溶解，过滤，再用１０～２０％氨水调节溶解液ｐＨ到９．０，然后用氯仿萃取３次，每次萃取的氯仿用量与溶解液量相当，收集氯仿层，减压回收氯仿，真空干燥得到延胡索总碱；　　④分离：采用高速逆流色谱法，两相溶剂系统采用石油醚－乙酸乙酯－甲醇－水，分配比（体积）为２２～２６∶２５～３０∶２０～２３∶１７～２０，超声脱气３０ｍｉｎ，以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，以７～１０ｍＬ／ｍｉｎ的流速将固定相泵入高速逆流色谱仪螺旋管中，待固定相充满整个管路后，停泵，启动主机，并将转速调至７５０～８５０ｒ／ｍｉｎ，以１．５～２．０ｍＬ／ｍｉｎ的流速泵入流动相，当流动相从出口处流出，即表明上下相达到平衡，记录固定相被推出的体积，并使固定相保留值在０．５～０．５８之间。然后用流动相溶液溶解延胡索总碱，使其浓度为１０ｍｇ／ｍＬ，以２．０ｍＬ／ｍｉｎ的流速持续泵入该溶液，分离温度２５℃，紫外检测波长为２８０ｎｍ，在１０５～１２０ｍｉｎ收集原阿片碱波峰组分；在１６５～１７０ｍｉｍ收集延胡索乙素波峰组分。...

【技术特征摘要】
1.一种从延胡索中同步分离延胡索乙素和原阿片碱的方法，其特征在于：①原料处理：将干燥的延胡索块茎粉碎成40目左右的粗粉；②醇膏制备：粗粉用4～6倍量的70％～90％工业酒精回流提取1～2h，提取三次，合并提取液并过滤，减压浓缩至干，并经50℃减压干燥得醇浸膏；③生物总碱制备：醇浸膏先用10倍量的0.5～1.5％盐酸溶解，过滤，再用10～20％氨水调节溶解液pH到9.0，然后用氯仿萃取3次，每次萃取的氯仿用量与溶解液量相当，收集氯仿层，减压回收氯仿，真空干燥得到延胡索总碱；④分离：采用高速逆流色谱法，两相溶剂系统采用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，分配比(体积)为22～26∶25～30∶20～23∶17～20，超声脱气30min，以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，以7～10mL/min的流速将固定相泵入高速逆流色谱仪螺旋管中，待固定相充满整个管路后，停泵，启动主机，并将转速调至750～850r/min，以1.5～2.0mL/m...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴三桥，冯自立，李新生，江海，张晨露，
申请(专利权)人：陕西理工学院，
类型：发明
国别省市：61[中国|陕西]