试剂组合物，其在对试样中的小而密LDL胆固醇(sdLDL‑C)进行定量的下述方法中作为第1试剂组合物使用，所述方法包括：使前述第1试剂组合物作用于试样的工序；和在使第1试剂组合物作用于试样的前述工序之后，使用于定量前述sdLDL‑C的第2试剂组合物进行作用，从而对残留的脂蛋白中的胆固醇进行定量的工序，所述试剂组合物包含非离子表面活性剂，并且具有胆固醇酯酶活性、胆固醇氧化酶活性及鞘磷脂酶活性，试剂组合物与聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)基材的接触角为63.0°以上67.0°以下。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及试剂组合物及试剂盒。
技术介绍
1、作为与ldl胆固醇的测定方法有关的技术，有专利文献1(日本特开2000-325097号公报)中记载的技术。该文献中记载了一种脂蛋白胆固醇的测定方法，其包括下述工序：通过向含有脂蛋白的试样中加入酶和第1表面活性剂，从而使hdl胆固醇选择性地进行酶反应的第1工序；接着，通过加入第2表面活性剂，从而使ldl胆固醇选择性地进行酶反应的第2工序；以及，通过测定在第1或第2工序中因与酶的反应而消耗的化合物或生成的化合物，从而测定hdl胆固醇及/或ldl胆固醇，根据该方法，能够提供下述测定方法及测定试剂，其无需会使反应液的浊度上升的脂蛋白凝集剂，使用的酶没有限制，且在使ldl胆固醇反应的工序中无需新添加其它酶即可简便且廉价地对ldl胆固醇进行定量，另外根据需要能够在不形成脂蛋白的凝集(其会妨碍光学测定)的情况下准确且廉价地测定hdl胆固醇，因此认为在动脉硬化症等的临床检查的领域中尤其有用。
2、现有技术文献
3、专利文献
4、专利文献1：日本特开2000-325097号公报
技术实现思路
1、专利技术所要解决的课题
2、本申请的专利技术人对测定ldl胆固醇中的小而密ldl胆固醇(small dense low-density lipoprotein，sdldl-c)进行了研究。于是发现专利文献1中记载的技术在反应特异性(具体而言为与基准法的相关性)及检样稀释后的准确性的方面存在改善的余地。
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p>3、本专利技术提供检样稀释后的准确性及特异性优异的sdldl-c的测定技术。4、用于解决课题的手段
5、本申请的专利技术人为了提高sdldl-c的定量的反应特异性(具体而言为与基准法的相关性)及检样稀释后的准确性而进行了研究。结果首次发现，通过使sdldl-c的定量中使用的试剂组合物的接触角为特定范围，从而与作为基准的超离心法的相关性良好，能够实现检样稀释后的准确性优异的sdldl-c的定量，从而完成了本专利技术。
6、根据本专利技术，提供以下的试剂组合物及试剂盒。
7、[1]试剂组合物，其在对试样中的小而密ldl胆固醇(sdldl-c)进行定量的下述方法中作为第1试剂组合物使用，所述方法包括：
8、使前述第1试剂组合物作用于前述试样的工序；和
9、在使第1试剂组合物作用于前述试样的前述工序之后，使用于定量前述sdldl-c的第2试剂组合物进行作用，从而对残留的脂蛋白中的胆固醇进行定量的工序，
10、所述试剂组合物包含非离子表面活性剂，
11、所述试剂组合物具有胆固醇酯酶活性、胆固醇氧化酶活性及鞘磷脂酶活性，
12、利用以下的方法1测定的、该试剂组合物与聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)基材的接触角为63.0°以上67.0°以下。
13、(方法1)
14、(1)pet基材：pet(非晶性聚酯)树脂板，透明，厚度2mm
15、(2)前处理：用70％乙醇水溶液擦拭未使用的pet基材的表面。擦拭后，在5分钟以内实施测定。
16、(3)测定方法及条件：液滴法、θ/2法，温度：15～25℃，注射器：teflon(注册商标，以下相同。)涂层18g，滴加方法、滴加量：2μl，在滴加后1秒后进行测定。
17、(4)接触角的计算：测定5次，求出5次的平均值。
18、[2]如[1]所述的试剂组合物，其中，利用以下的方法2-1测定的、该试剂组合物的5℃时的粘度为2.5mpa·s以下。
19、(方法2-1)
20、(1)装置：ems粘度计(electro magnetically spinning visco meter)
21、(2)测定方法及条件：测定方式：电磁旋转法，电动机转速：1000rpm，保持时间：600秒，测定温度：5℃，顺序循环(sequence loop)：1次，试样：500μl
22、(3)粘度的计算：实施5次测定，算出5次的平均值。
23、[3]如[1]或[2]所述的试剂组合物，其中，利用以下的方法2-2测定的、该试剂组合物的37℃时的粘度为1.05mpa·s以下。
24、(方法2-2)
25、(1)装置：ems粘度计(electro magnetically spinning visco meter)
26、(2)测定方法及条件：测定方式：电磁旋转法，电动机转速：1000rpm，保持时间：600秒，测定温度：37℃，顺序循环：1次，试样：500μl
27、(3)粘度的计算：实施5次测定，算出5次的平均值。
28、[4]如[1]至[3]中任一项所述的试剂组合物，其中，前述非离子表面活性剂包含聚氧乙烯单苯乙烯化苯基醚。
29、[5]如[4]所述的试剂组合物，其中，前述聚氧乙烯单苯乙烯化苯基醚中的聚氧乙烯的聚合度n为5以上80以下。
30、[6]如[4]或[5]所述的试剂组合物，其中，相对于该试剂组合物整体而言，该试剂组合物中的前述聚氧乙烯单苯乙烯化苯基醚的含量为0.05％(w/v)以上0.6％(w/v)以下。
31、[7]如[1]至[6]中任一项所述的试剂组合物，其中，该试剂组合物包含氢供体及偶合剂中的任一者。
32、[8]如[1]至[7]中任一项所述的试剂组合物，其中，该试剂组合物还具有抗坏血酸氧化酶活性。
33、[9]如[1]至[8]中任一项所述的试剂组合物，其中，该试剂组合物还具有选自由过氧化物酶活性及过氧化氢酶活性组成的组中的至少一种活性。
34、[10]试剂盒，其用于前述试样中的前述sdldl-c的定量，所述试剂盒包含：
35、由[1]至[9]中任一项所述的试剂组合物形成的第1试剂组合物；和
36、用于定量前述sdldl-c的第2试剂组合物。
37、[11]如[10]所述的试剂盒，其中，前述第2试剂组合物具有过氧化物酶活性。
38、专利技术效果
39、根据本专利技术，可以提供反应特异性(具体而言为与基准法的相关性)及检样稀释后的准确性优异的sdldl-c的测定技术。
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【技术保护点】
1.试剂组合物，其在对试样中的小而密LDL胆固醇(sdLDL-C)进行定量的下述方法中作为第1试剂组合物使用，所述方法包括：
2.如权利要求1所述的试剂组合物，其中，利用以下的方法2-1测定的、该试剂组合物的5℃时的粘度为2.5mPa·s以下，
3.如权利要求1或2所述的试剂组合物，其中，利用以下的方法2-2测定的、该试剂组合物的37℃时的粘度为1.05mPa·s以下，(方法2-2)
4.如权利要求1或2所述的试剂组合物，其中，所述非离子表面活性剂包含聚氧乙烯单苯乙烯化苯基醚。
5.如权利要求4所述的试剂组合物，其中，所述聚氧乙烯单苯乙烯化苯基醚中的聚氧乙烯的聚合度n为5以上80以下。
6.如权利要求4所述的试剂组合物，其中，相对于该试剂组合物整体而言，该试剂组合物中的所述聚氧乙烯单苯乙烯化苯基醚的含量为0.05％(w/v)以上0.6％(w/v)以下。
7.如权利要求1或2所述的试剂组合物，其中，该试剂组合物包含氢供体及偶合剂中的任一者。
8.如权利要求1或2所述的试剂组合物，其中，该试剂组合物还具有抗坏血酸氧化酶活性。
9.如权利要求1或2所述的试剂组合物，其中，该试剂组合物还具有选自由过氧化物酶活性及过氧化氢酶活性组成的组中的至少一种活性。
10.试剂盒，其用于所述试样中的所述sdLDL-C的定量，所述试剂盒包含：
11.如权利要求10所述的试剂盒，其中，所述第2试剂组合物具有过氧化物酶活性。
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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.试剂组合物，其在对试样中的小而密ldl胆固醇(sdldl-c)进行定量的下述方法中作为第1试剂组合物使用，所述方法包括：
2.如权利要求1所述的试剂组合物，其中，利用以下的方法2-1测定的、该试剂组合物的5℃时的粘度为2.5mpa·s以下，
3.如权利要求1或2所述的试剂组合物，其中，利用以下的方法2-2测定的、该试剂组合物的37℃时的粘度为1.05mpa·s以下，(方法2-2)
4.如权利要求1或2所述的试剂组合物，其中，所述非离子表面活性剂包含聚氧乙烯单苯乙烯化苯基醚。
5.如权利要求4所述的试剂组合物，其中，所述聚氧乙烯单苯乙烯化苯基醚中的聚氧乙烯的聚合度n为5以上80以下。
6.如权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：伊藤康树，
申请(专利权)人：电化株式会社，
类型：发明
国别省市：
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