【技术实现步骤摘要】
本申请属于生物医药，尤其涉及一种鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原、制备方法及其应用。
技术介绍
1、鲍曼不动杆菌（acinetobacter baumannii）是临床常见的严重耐药细菌之一，其感染对象主要为老年、长期住院患者，尤其是重症监护室及其他重症患者，其感染可引起肺炎，严重软组织或伤口感染、插管相关感染、尿路感染、菌血症和继发性脑膜炎等，其中以肺炎及血流感染最为常见及严重。其耐药性的增强和在医疗环境中的传播使其感染治疗变得异常困难，甚至导致了医院内的严重感染爆发事件。
2、目前，针对鲍曼不动杆菌的治疗主要依赖于抗生素，然而，由于其高度耐药性的表现，许多常规抗生素已经失去了对该菌的治疗效果，这加剧了对替代治疗方案的需求。因此，迫切需要研发新的用于鲍曼不动杆菌感染的防治方法。
技术实现思路
1、本申请的目的在于提供一种鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原、制备方法及其应用，旨在解决现有技术中的针对鲍曼不动杆菌感染的治疗和预防效果不佳的问题。
2、为实现上述申请目的，本申请采用的技术方案如下：
3、第一方面，本申请提供一种鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原，所述鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原的氨基酸序列如seq id no.1所示。
4、第二方面，本申请提供了一种编码第一方面所述的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原的基因，其核苷酸序列如seq id no.2所示。
5、第三方面，本申请提
6、a）质粒构建，原核表达：
7、将如seq id no.2所示的核苷酸序列的基因连接在表达载体中，获得构建的质粒并转入原核表达系统中进行诱导表达；
8、b）进行离心收集：
9、收集诱导表达后的菌液进行离心，弃去上清液，加入pbs缓冲液混匀后，利用超声裂解，然后再进行离心，收集上清液；
10、c）获取含有his标签的a1s_1027重组蛋白：
11、将步骤b）收集的菌种在含卡那抗性的lb培养基中进行培养至od600为0.8时，加入iptg诱导剂置于摇床中进行诱导，然后离心收集菌体，加入pbs重悬菌体后，用高压均质仪器破碎，破碎后进行离心，收集上清液并与his标签蛋白琼脂糖高速纯化树脂进行结合，获得含有his标签的a1s_1027重组蛋白；
12、d）提取a1s_1027目的蛋白：
13、待步骤c）中的上清液与his标签蛋白琼脂糖高速纯化树脂结合完毕后，利用pbs缓冲液进行杂蛋白的清洗，然后利用低质量摩尔浓度的咪唑进行洗杂，接下来用高质量摩尔浓度的咪唑洗脱目的蛋白并进行收集和置换缓冲液；
14、e）纯化a1s_1027目的蛋白：
15、使用离子交换柱对步骤d）收集的a1s_1027目的蛋白进行进一步纯化，获取高纯度的a1s_1027重组蛋白抗原。
16、根据一种优选实施方式，在步骤a）中，所述表达载体为pet-28a质粒，所述原核表达系统为大肠杆菌bl21（de3）感受态。
17、第四方面，本申请提供了第一方面所述的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原在制备治疗或预防鲍曼不动杆菌感染的药物中的应用。
18、根据一种优选实施方式，所述药物为鲍曼不动杆菌疫苗。
19、第五方面，本申请提供了一种由第一方面所述的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原免疫动物制备的鲍曼不动杆菌a1s_1027特异性抗体。
20、第六方面，本申请提供了第五方面所述的鲍曼不动杆菌a1s_1027特异性抗体在制备治疗或预防鲍曼不动杆菌感染的药物中的应用。
21、第七方面，本申请提供了一种鲍曼不动杆菌检测试剂盒，包括第一方面所述的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原，和/或，
22、第五方面所述的鲍曼不动杆菌a1s_1027特异性抗体。
23、基于上述技术方案，本申请提供的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原、制备方法及其应用至少具有如下有益技术效果：
24、本申请提供的一种鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原为治疗和预防鲍曼不动杆菌感染的药物例如疫苗提供了一种新的抗原储备，填补了目前该领域的空白。本申请提供的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原的制备工艺简洁、操作步骤易控制易实现，所得到的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白纯度较高，产量较高，适用于大规模生产。
25、另一方面，利用本申请的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原制备的疫苗无毒副作用，能够产生高效价的抗体，具有良好的抗鲍曼不动杆菌感染的免疫保护效果，适用于制备特异性抗体。
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1.一种鲍曼不动杆菌A1S_1027重组蛋白抗原，其特征在于，所述鲍曼不动杆菌A1S_1027重组蛋白抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种编码权利要求1所述的鲍曼不动杆菌A1S_1027重组蛋白抗原的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种如权利要求1所述的鲍曼不动杆菌A1S_1027重组蛋白抗原的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在步骤a）中，所述表达载体为pET-28a质粒，所述原核表达系统为大肠杆菌BL21（DE3）感受态。
5.权利要求1所述的鲍曼不动杆菌A1S_1027重组蛋白抗原在制备治疗或预防鲍曼不动杆菌感染的药物中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物为鲍曼不动杆菌疫苗。
7.一种由权利要求1所述的鲍曼不动杆菌A1S_1027重组蛋白抗原免疫动物制备的鲍曼不动杆菌A1S_1027特异性抗体。
8.权利要求7所述的鲍曼不动杆菌A1S_1027特异性抗体
9.一种鲍曼不动杆菌检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的鲍曼不动杆菌A1S_1027重组蛋白抗原，和/或，
...【技术特征摘要】
1.一种鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原，其特征在于，所述鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原的氨基酸序列如seq id no.1所示。
2.一种编码权利要求1所述的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原的基因，其特征在于，其核苷酸序列如seq id no.2所示。
3.一种如权利要求1所述的鲍曼不动杆菌a1s_1027重组蛋白抗原的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在步骤a）中，所述表达载体为pet-28a质粒，所述原核表达系统为大肠杆菌bl21（de3）感受态。
【专利技术属性】
技术研发人员：李彦，陈凯，孙向成，石云，王宁，谢雨，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：
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