【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及真菌发酵，具体是指一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法与应用。
技术介绍
1、畜禽真菌感染是指由病原性真菌在畜禽中引起的疾病的总称。虽然在自然界中，真菌种类繁多，对畜禽和人类致病的种类相对较少。但是，特别是在温暖潮湿的环境中真菌感染极容易发生。因此，真菌感染在畜禽中也是一个常见影响畜禽健康的问题。
2、畜禽真菌感染主要可以分为以下几类：
3、1.体表真菌病。主要发生在皮肤和粘膜上，多为浅表性和局限性。这类疾病的病原主要来自特定的真菌属，如小孢子菌属和毛癣菌属。这些真菌生长于羽毛、毛发、趾甲和皮肤，可导致宿主产生多种疾病，统称为皮肤真菌病。此外，人畜之间可以通过接触而互相传染。
4、2.体内真菌病。主要发生在动物机体的深层结构和器官，也可能影响皮肤。这些真菌病病原主要分布在曲霉菌属、类球虫霉属、隐球菌属和组织胞浆菌属中。例如，黄曲霉能在畜禽中引起急性和慢性真菌毒素中毒，而烟曲霉能引起各种真菌病，包括幼鸡的霉菌性肺炎等。
5、3.其他真菌病。这包括霉菌性流产(由胎盘受真菌感染引起)、霉菌性乳腺炎(通常由乳房内注射受真菌污染的抗生素制剂引起)、霉菌性瘤胃炎(长期饲喂抗生素的犊牛中发生)等。
6、畜禽真菌感染的防治药物研究一直是兽医领域的重要课题。随着养殖业的规模化发展和养殖环境的复杂化，真菌感染问题日益突出，对畜禽的健康和生产性能构成严重威胁。因此，研发有效、安全的防治药物对于保障畜禽健康、提高养殖效益具有重要意义。
技术实现思路b>
1、本专利技术的目的在于提供一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法。
2、本专利技术的另一个目的在于基于上述制备的发酵液，提供一种防治畜禽真菌感染疾病的药物。
3、本专利技术通过下述技术方案实现：一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，包括以下步骤：
4、(1)从榕树果实中分离并筛选出具有发酵能力的优势内生真菌，并进行扩大培养后作为发酵菌；
5、(2)将榕树叶、榕树气生根和榕树果实分别进行预处理，作为发酵原料；
6、(3)将发酵菌与发酵原料均置于发酵装置中搅拌混合后，进行发酵；
7、(4)发酵结束后，对发酵液进行收集处理，即得成品。
8、为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(1)中，从榕树果实中分离并筛选出具有发酵能力的优势内生真菌的具体过程为：
9、(1.1.1)选取榕树鲜果的健康部位作为采集样本；
10、(1.1.2)灭杀采集样本表面的杂菌，在无菌条件下，将采集样本切割成小块置于装有液态培养基容器内，通过培养箱为采集样本中的内生真菌提供适宜的生长温度，使得采集样本中的内生真菌在液态培养基容器内生长形成明显的菌落；
11、(1.1.3)通过连续划线法或稀释涂布平板法选择生长旺盛的菌落，从混合菌群中分离出单一的内生真菌菌落；
12、(1.1.4)对分离出的单一内生真菌菌落进行鉴定，确定作为发酵菌的优势内生真菌。
13、为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(1)中，对分离筛选出的具有发酵能力的优势内生真菌进行扩大培养的具体过程为：
14、(1.2.1)以新鲜摘取的榕树果实为原料，制备真菌培养基；
15、(1.2.2)将优势内生真菌接种到制备的真菌培养基上进行斜面培养，并通过隔水式恒温培养箱提供37℃的恒温，依次进行100ml、500ml、5000ml的三级扩大培养。
16、为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(1.2.1)中，使用新鲜摘取的榕树果实为原料制备真菌培养基的具体过程为：
17、(1.2.1.1)将新鲜摘取的榕树果实捣碎，置于瓷锅内，加净化水煎煮浓缩后，过滤除掉残渣，即得榕树果营养液；
18、(1.2.1.2)煎煮榕树果营养液至65℃以上，加入蔗糖、尿素；
19、(1.2.1.3)灭菌后冷却至常温，加入琼脂，即得固态的真菌培养基。
20、为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述从榕树果实中分离并筛选出具有发酵能力的优势内生真菌为青霉菌属、镰刀菌属、小从壳属、刺盘孢属中的至少一种。
21、为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(2)中，对榕树叶、榕树气生根和榕树果实分别进行预处理的具体过程为：
22、(2.1)清洗榕树叶与榕树气生根，除去杂质后切碎成为1-2cm小块，风干备用，榕树果实直接风干备用；
23、(2.2)按质量百分比计，将75％榕树叶、5％的榕树气生根、25％的榕树果实混合均匀后，粉碎成10目～20目的粗粉；
24、(2.3)按物料重量，加入粗粉五倍重量的纯化水，消毒杀菌后，即得发酵原料。
25、为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(3)中，将发酵菌与发酵原料均置于发酵装置中进行发酵的过程为：按质量百分比计，发酵装置中加入95wt％发酵原料，加入5wt％的发酵菌，调节初始发酵ph为5～6.8，搅拌20min，进行第一次发酵，发酵过程；发酵过程中ph会降低，发酵三至四天后，发酵装置内的ph降低至3～4时，发酵会停止，此时重新加入新的发酵菌5wt％，并加入碱液重新调节ph值为5～6.8，搅拌20min，进行第二次发酵，如此重复，进行第三次发酵，完成发酵过程，全部发酵过程保持温度为28℃～32℃。
26、为了更好地实现本专利技术的方法，进一步地，所述步骤(4)中，对发酵液进行收集处理的具体过程为：滤去发酵液中的滤渣，常温下对发酵液进行浓缩，并进行抗菌防腐处理后，装瓶即得成品。
27、一种防治畜禽真菌感染疾病，所述药物的主要成分为上述基于榕树内生真菌的发酵液制备方法制备得到的发酵液。
28、为了更好地实现本专利技术所述的防治畜禽真菌病的药物，所述发酵液中包含有黄酮类化合物、单萜及三萜皂苷类化合物、酚酸类化合物。
29、本技术方案的主要技术原理为，榕树内的优势内生真菌被动物采食后在动物消化道内可以大量繁殖并形成绝对优势，从而抑制其他来源的真菌生长繁殖，包括环境中具有致病作用的真菌；另外，榕树内的优势内生真菌在动物体内代谢也产生了许多代谢产物，这些代谢产物同样对其他来源的真菌形成抑制或者杀灭作用。基于此原理，本技术方案选择榕树果实内的优势内生真菌作为发酵菌，基于资源最大化利用，以榕树的树叶、果实、气生根作为发酵原料，制备该优势内生真菌及其代谢产物(发酵液)，以该发酵液作为抑杀其他真菌的物质。
30、本专利技术与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
31、本专利技术提供的利用榕树内生真菌发酵榕树叶、榕树气生根和榕树果实的方法，其能够可以充分利用榕树的再生生物资源，不会对榕树生态环境造成破坏性影响，通过榕树内生真菌的发酵作用，提高生物活性物质的提取效率和转化率，所制的发酵液能够作为防治畜禽真菌感染疾病的药物进行使用，该发酵液对真菌有明显的抑杀效本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，从榕树果实中分离并筛选出具有发酵能力的优势内生真菌的具体过程为：
3.根据权利要求2所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，对分离筛选出的具有发酵能力的优势内生真菌进行扩大培养的具体过程为：
4.根据权利要求3所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述步骤（1.2.1）中，使用新鲜摘取的榕树果实为原料制备真菌培养基的具体过程为：
5.根据权利要求1~4任一项所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述从榕树果实中分离并筛选出具有发酵能力的优势内生真菌为青霉菌属、镰刀菌属、小从壳属、刺盘孢属中的至少一种。
6.根据权利要求1~4任一项所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中，对榕树叶、榕树气生根和榕树果实分别进行预处理的具体过程为：
7.根据权利要求1~
8.根据权利要求1~4任一项所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中，对发酵液进行收集处理的具体过程为：滤去发酵液中的滤渣，常温下对发酵液进行浓缩，并进行抗菌防腐处理后，装瓶即得成品。
9.一种防治畜禽真菌感染疾病的药物，其特征在于，所述药物的主要成分为权利要求1~8任一项所述基于榕树内生真菌的发酵液制备方法制备得到的发酵液。
10.根据权利要求9所述一种防治畜禽真菌感染疾病，其特征在于，所述发酵液中包含有黄酮类化合物、单萜及三萜皂苷类化合物、酚酸类化合物。
...【技术特征摘要】
1.一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，从榕树果实中分离并筛选出具有发酵能力的优势内生真菌的具体过程为：
3.根据权利要求2所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，对分离筛选出的具有发酵能力的优势内生真菌进行扩大培养的具体过程为：
4.根据权利要求3所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述步骤（1.2.1）中，使用新鲜摘取的榕树果实为原料制备真菌培养基的具体过程为：
5.根据权利要求1~4任一项所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述从榕树果实中分离并筛选出具有发酵能力的优势内生真菌为青霉菌属、镰刀菌属、小从壳属、刺盘孢属中的至少一种。
6.根据权利要求1~4任一项所述的一种基于榕树内生真菌的发酵液制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中，对榕树叶、榕树气生根和榕树果实分别进行预处理的具体过程为：
7.根据权利要求1~4任一项所述的一种基于榕树内生真菌的发酵...
【专利技术属性】
技术研发人员：廖海标，李城丰，
申请(专利权)人：广州白云山宝神动物保健品有限公司，
类型：发明
国别省市：
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